Characterization of the penicillin G acylase from Bacillus megaterium ATCC 14945
Braz. arch. biol. technol
; 48(spe): 105-111, June 2005.
Artigo
em Inglês
| LILACS
| ID: lil-415463
Biblioteca responsável:
BR1.1
RESUMO
O objetivo deste trabalho foi caracterizar a enzima penicilina G acilase (PGA) produzida por Bacillus megaterium, uma importante enzima industrial que catalisa a hidrólise de penicilina G, para produção de antibióticos semi-sintéticos. Purificação da enzima por ultra/diafiltração não permitiu detectar a banda de PGA por eletroforese SDS-PAGE devido ao elevado conteúdo de outras proteínas remanescentes. Contudo, utilizando DNA do microrganismo que vem sendo estudado, foi possível amplificar os genes das duas sub-unidades de PGA previstas na literatura, mostrando que a enzima em estudo é também constituída de duas sub-unidades, 245 e 537 aminoácidos cada, com massas moleculares médias de 26950 e 59070 Da, respectivamente. Foram estudadas as influências da temperatura 25-600C, pH 5-10, e concentração do substrato na velocidade da reação de hidrólise da penicilina G. A temperatura e pH ótimos foram de 370C e 8,0, respectivamente. O modelo de Michaelis-Menten representou bem a cinética da reação, com valores de parâmetros estimados de 1,83 mM para Km e Vmáx= 0,165*10-3 mmol/min/UI.
Texto completo:
Disponível
Coleções:
Bases de dados internacionais
Base de dados:
LILACS
Idioma:
Inglês
Revista:
Braz. arch. biol. technol
Assunto da revista:
Biologia
Ano de publicação:
2005
Tipo de documento:
Artigo
/
Congresso e conferência
País de afiliação:
Brasil
Instituição/País de afiliação:
Departamento de Engenharia Química/BR
/
Universidade Federal de São Carlos/BR