Da trans-sialidase e dos minicírculos de Trypanosoma cruzi à doença de Chagas / From the trans-sialidase and the minicircles of Trypanosama cruzi to Chagas disease

RESUMO

A doença de Chagas é causada pelo protozoário Kinetoplastidea Trypanosoma cruzi. O parasita inicia seu contato com o hospedeiro invadindo suas células para se reproduzir, podendo depois de algum tempo gerar uma patologia envolvendo processos imunológicos de natureza ainda pouco entendida. a T. cruzi entra ativamente em células de mamíferos formando o vacúolo parasitóforo, do qual deve escapar ao citoplasma para se replicar. Uma das moléculas envolvidas nestes processos é a enzima trans-sialidase. Esta enzima catalisa a transferência de ácido siálico de glicoconjugados dos hospedeiros para aceptores na superfície do parasita. Entretanto, não é conhecido como ela atua no processo de invasão. Nesta tese mostramos que a forma tripomastigota derivada de células de mamífero expressa e libera 20 vezes mais trans-sialidase que a forma metacíclica tripomastigota, que corresponde ao estágio do parasita derivado do inseto vetor. Ambas formas invadem células da mesma maneira, mas os tripomastigotas escapam mais rapidamente do vacúolo parasitóforo. Para testar se os níveis de trans-sialidase dos tripomastigotas derivados de célula são responsáveis pelo aumento de velocidade de escape, a trans-sialidase foi superexpressada em metacíclicos. A invasão de células ReLa não foi aumentada, porém os parasitas com altos níveis de trans-sialidase escaparam do vacúolo parasitóforo mais rapidamente que os parasitas que não super-expressavam a enzima. Em células CRa Lec-2, que são deficientes na incorporação de ácido siálico na superfície e interior dos lisossomos, todos os tipos de tripomastigotas escaparam com a mesma velocidade. Já as células CRa selvagens apresentaram a diferença de escape observada nas células ReLa. Estes resultados demonstram que o ácido siálico é uma barreira ao escape do parasita para o citoplasma e que a função da trans-sialidase é de...