Evaluation of culture media for counts of Bifidobacterium animalis in the presence of yoghurt bacteria

ABSTRACT

Much attention has been paid to the use of Bifidobacterium sp. in yoghurts due to their excellent therapeutic and nutritional properties. However, in order to present health properties, it is recommended that each commercial product should indicate the minimum daily amount required for it to confer health benefit(s) based on in vitro and human studies. Besides the inherent low growth of Bifidobacterium sp in milk, there is a need for a reliable method for counting Bifidobacterium sp in the presence of yoghurt bacteria. This study evaluated the use of the media M-MRS, MRS-NNLP and RCPB pH5 aimed at counting the number of Bifidobacterium animalis subesp. lactis in the presence of Streptococcus thermophilus and Lactobacillus delbrueckii subsp bulgaricus after yoghurt fermentation. The M-MRS medium was not selective, allowing for the growth of L. delbrueckii subsp bulgaricus. MRS-NNLP medium presented a good selectivity for B. animalis Bb12 with a slight reduction in the cell count of this microrganism when compared it to the standard MRS medium in pure culture. MRS-NNLP medium was considered a good option to enumerate B. animalis Bb12 although the reduction found in pure culture due to the low difference between the counts. The medium RCPB pH5 presented differentiated growth of B. animalis Bb12 in relation to the yoghurt bacteria and a cell recovery equal to that of the standard MRS, being considered the best option to enumerate Bifidobacterium sp in the presence of yoghurt bacteria.

RESUMO

Tem-se dado muita atenção à utilização de Bifidobacterium sp. em iogurtes devido às suas excelentes propriedades terapêuticas e nutricionais. Entretanto, é recomendado que, baseado em testes in vitro e em humanos, cada produto comercial indique qual a quantidade mínima diária recomendada de ingestão para que se obtenha os benefícios desejados à saúde. Além da inerente dificuldade do crescimento de Bifidobacterium sp em leite, há uma necessidade de padronização de um método de contagem confiável de Bifidobacterium sp na presença das bactérias do iogurte. Este trabalho avaliou o uso dos meios M-MRS, MRS-NNLP e RCPB pH5, visando a contagem do número de células de Bifidobacterium animalis Bb12 na presença de Streptococcus thermophilus e Lactobacillus delbrueckii subsp bulgaricus após a fermentação do iogurte. O meio M-MRS não foi seletivo, apresentando crescimento de L. delbrueckii subsp. bulgaricus. O meio MRS-NNLP apresentou boa seletividade para B. animalis Bb12, apesar de uma leve redução no número de células ter sido verificada quando comparado ao meio padrão MRS em cultura pura. O meio MRS-NNLP foi considerado uma boa opção para a contagem de B. animalis Bb12 porque a diferença encontrada entre as contagens em cultura pura foi bastante pequena. O meio RCPB pH5 apresentou crescimento diferencial de Bifidobacterium animalis Bb12 em relação às bactérias do iogurte e uma recuperação de células igual ao meio padrão MRS, sendo considerado o melhor meio de cultura deste estudo para a contagem de Bifidobacterium sp na presença das culturas do iogurte.