Extração de DNA de coágulo sanguíneo humano como método alternativo para estudos de genotipagem / DNA extraction from clotted human blood as a alternative method for genotyping studies
Rev. bras. anal. clin
; 29(3): 151-154, 1997. graf, tab
Artigo
em Português
| LILACS
| ID: lil-526279
Biblioteca responsável:
BR408.1
RESUMO
Foi otimizado um método de extração de DNA de coágulo sangüíneo. Amostras de sangue total colhidas em EDTA e de coágulo foram obtidas de 10 indivíduos não aparentados. Os coágulos foram homogeneizados (sistema Potter-Elvelyn NSE-11R). O DNA foi extraído pelo método de precipitação salina modificado (Clin.Chem.42-S298,1996). A quantificação e a pureza do DNA foram realizadas por espectrofotometria em 260 e 280 nm, sendo a sua integridade verificada por eletroforese em gel de agarose. A qualidade do DNA foi avaliada por amplificação da região polimórfica Ava II do gene do receptor da LDL, por PCR. A quantidade de DNA de coágulo foi semelhante a de sangue total (61,5 ± 11,9 e 60,6 ± 12,6 mg/ml de sangue, respectivamente). A pureza do DNA de coágulo foi semelhante a de sangue total (A260/280=1,87 ± 0,19 e 1,96 ± 0,17, respectivamente). As amostras de DNA apresentaram-se intactas no gel de agarose e sem contaminação com RNA. O rendimento do DNA obtido por este método dói maior que o dos descritos em outros estudos e mostrou-se adequado para análise do polimorfismo genético do receptor da LDL. Portanto, o procedimento de extração de DNA, otimizado em nosso laboratório, é simples, rápido e aplicável para obtenção de DNA de alta qualidade de amostras de coágulo sangüíneo, sendo útil em estudos de genotipagem.
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Coleções:
Bases de dados internacionais
Base de dados:
LILACS
Assunto principal:
Coagulação Sanguínea
/
Testes de Coagulação Sanguínea
/
DNA
/
Técnicas de Diagnóstico Molecular
/
Genes
Tipo de estudo:
Estudo diagnóstico
Limite:
Feminino
/
Humanos
/
Masculino
Idioma:
Português
Revista:
Rev. bras. anal. clin
Assunto da revista:
Patologia
Ano de publicação:
1997
Tipo de documento:
Artigo
País de afiliação:
Brasil
/
Estados Unidos
Instituição/País de afiliação:
FDA Food & Drug Adminitration/US
/
Universidade de São Paulo/BR