Análise do STR-F13A01 e MPSs do mtDNA para fins de identificação humana: comparação de três métodos de extração de DNA de dentes submetidos ao calor(AU) / STR-F13A01 and mtDNA MPSs analysis in human identification: comparing three DNA extraction methods from burned teeth

RESUMO

Nos casos de carbonização humana, usualmente, há uma limitação do emprego dos remanescentes biológicos para estudo. Nesses casos, têm-se usado por eleição dentes para análises forenses, já que sua constituição anatômica proporciona proteção ao material genético. No presente estudo, avaliou-se a amplificação por PCR do DNA obtido de dentes submetidos a calor (200°C, 400°C, 500°C e 600°C) durante 60 minutos, testando-se três métodos de extração (orgânico, isopranol/acetato de amônia e sílica). Foram utilizados oito pares de dentes de indivíduos diferentes, sendo que um foi mantido in natura ("gold standart") e o outro submetido à queima. Para amplificação do DNA, empregaram-se iniciadores de DNA genômico (STR-F13A01) e DNA mitocondrial (MPSs). Para o DNA genômico, a análise em gel de poliacrilamida permitiu verificar que com o método orgânico 50% das amostras foram amplificadas, 38% com isopropanol/acetato de amônia e 0% com a sílica. Para os MPSs, o seqüenciamento das amostras mostrou que o método orgânico confirmou 100% dos resultados em 200°C, 50% em 400°C e 0% em 500°C e 600°C. Para o método isopropanol/acetato de amônia, em 100% das temperaturas foi possível a análise do mtDNA. Para o método da sílica, obtivemos resultados de 50% em 400°C e 500°C e 0% em 200°C e 600°C. Nossos resultados permitem concluir que o método isopropanol/acetato de amônia é o mais indicado para obtenção de DNA amplificável por PCR de amostras carbonizadas nas temperaturas utilizadas neste trabalho.