Estudo dos mecanismos envolvidos na expressão de fator de crescimento de células progenitoras e fator de crescimento para fibroblastos-2 por odontoblastos estimulados por lipopolissacarídeos via p42/44, p38 e PI3K / Study of the mechanisms involved in the expression of SCF and FGF 2 by LPS-stimulated odontoblasts via p42/44, p38 and PI3K

RESUMO

Avaliar a expressão de SCF e FGF-2 por odontoblastos (OD) estimulados por LPS, via p42/44, p38 e PI3K no processo. OD line MDPC-23 murino células foram estimuladas com 0,1, 1, 10 e 100 μg / ml LPS por horas 1, 6 e 24. A expressão de SCF e FGF-2 no OD foi avaliada por RT-PCR. Produção de SCF no sobrenadante da cultura foi analisado por ELISA. Examinar se a expressão de SCF e FGF 2eram e produção de citocinas dependentes / ou presença de leucotrienos, as células foram pré-tratados com dexametasona (DEXA) e MK886 (MK) por 30 minutos e então estimulados com LPS (0, 1 μg / mL) para 1 hora. Para avaliar as vias de transdução de sinal, as células foram pré-tratados por 30 minutos com um inibidor específico para p42/44 (PD98059, PD), p38 (SB203580, SB) e PI3K (wortmannin, Wort), logo depois foram estimulados com LPS (0.1μg / mL) por 1 hora. Células estimuladas por LPS após 1 hora expressar SCF em uma concentração de 0,1 μg / mL com concentrações decrescentes de 1, 10 e 100, seguidos por períodos de 6 e 24 hous. A expressão do FGF 2 em odontoblastos estimulados por LPS eram capazes de induzir concentrações 0,1 e 10 μg/mL 1 hora após. A DEXA e MK foram capazes de inibir a expressão de mRNA para SCF e FGF-2. PD, SB e Wort bloqueou a indução da expressão do SCF e FGF-2. DEXA e MK inibiu a expressão de SCF e FGF-2 através da ativação de p42 / 44, p38 e PI3K. Os dados sugerem que SCF e FGF-2 liberados pela OD podem atuar como moduladores da resposta imune e reparação os tecidos após a inflamação, levando à produção de mediadores químicos que participam na formação de novos tecidos de celulares.

ABSTRACT

Evaluate the expression of SCF and FGF-2 by odontoblasts (OD) stimulated by LPS, via p42/44 , p38 and PI3K in the process. OD line MDPC-23 murine cells were stimulated with 0.1, 1, 10 and 100 μg / mL LPS for 1, 6 and 24 hours. The expression of SCF and FGF-2 in OD was evaluated by RT-PCR. Production of SCF in the culture supernatant was analyzed by ELISA. To examine whether the expression of SCF and FGF 2eram dependent cytokine production and / or presence of leukotriene, cells were pretreated with dexamethasone (DEXA) and MK886 (MK) for 30 minutes and then stimulated with LPS (0 , 1 μg / mL) for 1 hour. To evaluate signal transduction pathways, cells were pretreated for 30 minutes with a specific inhibitor for p42/44 (PD98059, PD), p38 (SB203580, SB) and PI3K (wortmannin, Wort), soon after were stimulated with LPS (0.1μg/mL) for 1 hour. Cells stimulated by LPS after 1 hour express SCF in a concentration of 0.1 μg / mL with decreasing concentrations of 1, 10 and 100, followed by periods of 6 and 24 hous. The expression of FGF 2 in odontoblasts stimulated by LPS were capable of inducing concentrations 0.1 and 10ug/mL 1 hour after. The DEXA and MK were able to inhibit the expression of mRNA for SCF and FGF-2 . PD, SB and Wort blocked the induction of expression of the SCF and FGF-2. DEXA and MK inhibited the expression of SCF and FGF-2 via activation of p42 / 44, p38 and PI3K. The data suggest that SCF and FGF-2 released by the OD can act as modulators of immune response and tissue repair after inflammation, leading to production of chemical mediators.