Caracterização genotípica de isolados de Leishmania obtidos de hospedeiros portadores de leishmaniose tegumentar americana / Genotipic characterization of Leishmania isolated obtained from patients hosts of cutaneous leishmaniasis

RESUMO

As leishmanioses constituem um grupo de zoonoses causadas por protozoários do gênero Leishmania. Causam variadas manifestações clínicas e são de grande importância epidemiológica. Constituem um sério problema de saúde pública mundial e estão entre as sete prioridades da Organização Mundial de Saúde. Nas Américas, Leishmania (Viannia) braziliensis é a espécie mais prevalente na forma tegumentar da doença, com diferentes formas clínicas. No Brasil, a leishmaniose tegumentar americana (LTA) é uma doença com diversidade de agentes, reservatórios e vetores, apresentando diferentes padrões de transmissão. Considerável variabilidade genética encontrada nestes parasitas explicaria as adaptações nos diferentes ambientes geográficos. A relevância do quadro sintomatológico e a possível influência genotípica são fatores que devem ser estudados, pois podem contribuir para a melhoria no diagnóstico, tratamento, prognostico e no desenvolvimento de ações epidemiológicas. O objetivo deste estudo foi de analisar a variabilidade genética de isolados de L. (V.) braziliensis isoladas de amostras clínicas de diferentes regiões do Estado de São Paulo. Foram analisadas 132 amostras de origem humana e canina de casos confirmados por diagnóstico molecular de LTA por L.(V.) braziliensis distribuídas em 36 municípios. As amostras foram ensaiadas por duas metodologias de genotipagem a PCR-LSSP e a PCR-RFLP. DNA de dezenove amostras foram amplificados e genotipados pela PCR-LSSP. Os resultados mostraram que os isolados apresentaram características genéticas distintas. A seguir, amostras de DNA de cinquenta e duas amostras foram amplificadas e genotipadas pela PCR-RFLP, onde se revelaram nove padrões genéticos distintos. Esses resultados sugerem que no Estado de São Paulo circulam isolados de L. (V.) braziliensis polimórficos. Estes dados corroboram com estudos em outras regiões do Brasil, que mostram uma grande variabilidade destas populações naturais de focos endêmicos.

ABSTRACT

The leishmaniases are a group of zoonoses caused by protozoa of the genus Leishmania, presenting with various clinical manifestations and having a wide epidemiological diversity. They are a serious public health problem worldwide and are among the seven priorities of the World Health Organization. In the Americas, Leishmania (Viannia) braziliensis is the most prevalent species of the cutaneous form of the disease, causing different clinical forms. In Brazil, American cutaneous leishmaniasis (ACL) has a wide variety of agents, reservoirs and vectors, with different transmission patterns. Considerable genetic variability found in these parasites could explain the adaptations to different geographical environments. The significance of symptomatology and possible genotypic influence are factors that must be studied as they can contribute to improving diagnosis, treatment, prognosis and development of epidemiological surveillance measures. The objective of this study was to analyze the genetic variability of isolated of L. (V.) braziliensis isolated from clinical samples from different regions of São Paulo.We analyzed 132 samples of human and canine cases of confirmed ACL by molecular diagnosis by L. (V) braziliensis distributed in 36 municipalities. The samples were tested by two genotyping methods: LSSP-PCR and PCR-RFLP. DNA of nineteen samples was amplified and genotyped by PCRLSSP. The results showed high levels of polymorphism. Next, the fifty-two DNA samples were amplified and genotyped by PCR-RFLP and produced 9 distinct genetic patterns. These results suggest that polymorphic L. (V.) braziliensis isolates have been circulating in the state of São Paulo. These data corroborate studies in other regions of Brazil that show a great variability of these natural populations in endemic areas.