Obtención y empleo de anticuerpos monoclonales contra el activador tisular del plasminógeno / Obtention and application of monoclonal antibodies againts the tissue plasminogen activator

RESUMEN

Se obtuvieron los anticuerpos monoclonales (AcM) CB-tPA.1, CB-tPA.2 y CB-tPA.3, de la clase IgG1, secretados por hibridomas generados mediante la fusión del P3/x63.Ag8.653 con linfocitos esplénicos de ratones inmunizados con activador tisular del plasminógeno (t-PA) natural, purificado a partir de sobrenadante de cultivos de la línea de melanoma humano BOWES. Estos AcM reconocen en inmunodot el t-PA natural de simple y doble cadena, y t-PA recombinante de doble cadena (In Vitron). Se desarrollaron sistemas ELISA tipo sandwich, que emplean los AcM como anticuerpos de captura y anticuerpos policlonales de conejo anti t-PA, conjugados con peroxidasa, en el revelado de la reacción. La sensibilidad de estos sistemas fue de 3 ng/ml y pueden ser empleados para la cuantificación de t-PA natural y recombinante, así como para la medida de t-PA en muestras de sangre