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The nuts and bolts of SARS-CoV-2 Spike Receptor Binding Domain heterologous expression
Mariano Maffei; Linda C Montemiglio; Grazia Vitagliano; Luigi Fedele; Shaila Sellathurai; Federica Bucci; Mirco Compagnone; Valerio Chiarini; Cecile Exertier; Alessia Muzi; Giuseppe Roscilli; Beatrice Vallone; Emanuele Marra.
Afiliação
  • Mariano Maffei; Evvivax biotech
  • Linda C Montemiglio; Institute of Molecular Biology and Pathology (IBPM), National Research Council, Rome, Italy
  • Grazia Vitagliano; Takis biotech
  • Luigi Fedele; Takis biotech
  • Shaila Sellathurai; Takis biotech
  • Federica Bucci; Takis biotech
  • Mirco Compagnone; Neomatrix biotech
  • Valerio Chiarini; Takis biotech
  • Cecile Exertier; Department of Biochemical Sciences A. Rossi Fanelli University of Rome, Sapienza, Rome, Italy
  • Alessia Muzi; Takis biotech
  • Giuseppe Roscilli; Takis biotech & Evvivax biotech
  • Beatrice Vallone; Department of Biochemical Sciences A. Rossi Fanelli University of Rome, Sapienza, Rome, Italy
  • Emanuele Marra; Takis biotech & Evvivax biotech
Preprint em Inglês | bioRxiv | ID: ppbiorxiv-460782
Artigo de periódico
Um artigo publicado em periódico científico está disponível e provavelmente é baseado neste preprint, por meio do reconhecimento de similaridade realizado por uma máquina. A confirmação humana ainda está pendente.
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ABSTRACT
COVID-19 is a highly infectious disease caused by a newly emerged coronavirus (SARS-CoV-2) that has rapidly progressed into a pandemic. This unprecedent emergency has stressed the significance of developing effective therapeutics to fight current and future outbreaks. The receptor-binding domain (RBD) of the SARS-CoV-2 surface Spike protein is the main target for vaccines and represents a helpful "tool" to produce neutralizing antibodies or diagnostic kits. In this work, we provide a detailed characterization of the native RBD produced in three major model systems Escherichia coli, insect and HEK-293 cells. Circular dichroism, gel filtration chromatography and thermal denaturation experiments indicated that recombinant SARS-CoV-2 RBD proteins are stable and correctly folded. In addition, their functionality and receptor-binding ability were further evaluated through ELISA, flow cytometry assays and bio-layer interferometry.
Licença
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Texto completo: Disponível Coleções: Preprints Base de dados: bioRxiv Tipo de estudo: Experimental_studies Idioma: Inglês Ano de publicação: 2021 Tipo de documento: Preprint
Texto completo: Disponível Coleções: Preprints Base de dados: bioRxiv Tipo de estudo: Experimental_studies Idioma: Inglês Ano de publicação: 2021 Tipo de documento: Preprint
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