Utilização de pentoxifilina e antioxidantes na criopreservação do sêmen bovino: qualidade seminal e estresse oxidativo / Utilization of pentoxifylline and antioxidants in cryopreservation of bovine semen: semen quality and oxidative stress

RESUMO

O presente estudo avaliou a adição da pentoxifilina, tocoferol, ascorbato e suas combinações sobre a proteção da célula espermática bovina contra os efeitos deletérios da criopreservação. Foram utilizados 24 touros Nelores (Bos taurus indicus), criados em sistema semi-intensivo. Foi coletado um ejaculado de cada reprodutor, diluídos em TRIS-citratogema-glicerol e divididos em seis partes. Cada parte foi suplementada da seguinte maneira sem aditivos (controle), tocoferol (10 mmol/mL), tocoferol (10 mmol/mL) + pentoxifilina (1mg/mL), ascorbato (0,45mg/mL), ascorbato (0,45mg/mL) + pentoxifilina (1mg/mL) ou pentoxifilina (1mg/mL). Após o descongelamento, as amostras foram avaliadas quanto à motilidade e características do movimento, integridade da membrana plasmática e de acrossomo e atividade mitocondrial. Os níveis de peroxidação lipídica espontânea e induzida foram avaliados pela produção de substâncias reativas ao ácido tiobarbitúrico (TBARS). A suplementação com pentoxifilina, tocoferol, ascorbato e suas combinações, não alterou (P>0,05) a atividade mitocondrial, integridade acrossomal, e a concentração de TBARS espontâneo e induzido. A adição de tocoferol + pentoxifilina reduziu a motilidade progressiva quando comparado ao ascorbato e também a integridade da membrana espermática quando comparado ao controle e ao ascorbato (P˂0,05). Já a adição de ascorbato + pentoxifilina foi deletéria sobre linearidade em comparação ao tratamento ascorbato (P˂0,05). A adição de ascorbato, tocoferol e pentoxifilina individualmente ou em combinação, não foi eficiente em diminuir os danos causados pela criopreservação e estresse oxidativo em amostras pós descongelamento de sêmen bovino.

ABSTRACT

The present study evaluated the addition of pentoxifylline, tocopherol and ascorbate and their combinations on the protection of bovine spermatic cells against the deleterious effects of cryopreservation. A total of 24 Nelore bulls (Bos Taurus indicus) were included in this study, raised in a semi-intensive system. One ejaculation was collected from each bull and diluted in tris-citrate-yolk-glycerol, divided into six portions, and then supplemented with no additives (control); tocopherol (10 mmol/ml), tocopherol (10 mmol/ml) + pentxoifylline (1 mg/ml), ascorbate (0.45 mg/ml), ascorbate (0.45 mg/ml) + pentoxifylline (1 mg/ml) and pentxoifylline (1 mg/ml). After thawing, the samples were evaluated for motility and characteristics of movement, acrosomal and plasma membrane integrity, and mitochondrial activity. Spontaneous and induced lipid peroxidation levels were evaluated by the production of thiobarbituric acid reactive substances (TBARS). Supplementation with pentoxifylline, tocopherol and ascorbate and their combinations, did not alter mitochondrial activity, acrosomal integrity, or the spontaneous and induced TBARS concentration (P>0.05). The ascorbate, tocopherol and pentoxifylline additions, both individually and in combinations, were inefficient in decreasing the damage caused by cryopreservation and oxidative stress in post-thawed bovine semen samples.