Prevalence of "non-oral" pathogenic bacteria in subgingival biofilm of subjects with chronic periodontitis

ABSTRACT

The oral cavity may act as a reservoir for several pathogens related to systemic infections. Therefore, the purpose of this study was to determine the prevalence and levels of pathogenic bacteria in the subgingival biofilm of chronic periodontitis lesions and healthy periodontal sites using the checkerboard DNA-DNA hybridization technique. 200 samples of subgingival biofilm from sites with periodontitis (probing pocket depth > 4 mm and /or clinical attachment level > 4 mm) and 200 samples from healthy sites of 14 patients with chronic periodontitis, as well as 200 samples from 3 periodontally healthy patients were obtained. The presence and levels of 11 pathogenic bacteria were determined using whole genomic DNA probes and the checkerboard method, computed for each site and then across sites within each subject group. Significance of differences in clinical and microbiological parameters among groups were examinated using the Mann-Whitney and Wilcoxon sign tests. The predominant species in all 600 samples included Corynebacterium diphtheriae, Enterococcus faecalis, Staphylococcus aureus,Acinetobacter baumannii and Escherichia coli. In general, most of the species were detected in greater prevalence and levels in sites with and without disease from patients with periodontitis in comparison to the periodontally healthy group. In particular, C. diphtheriae, E. coli, E. faecalis, P. aeruginosa and S. aureus were significantly more prevalent and detected in higher counts in diseased sites of patients with periodontal disease compared to healthy subjects (p 0.05). Clinical signs of disease presented a positive correlation with the species A. baumannii, Streptococcus pyogenes, E. coli, S. aureus and P. aeruginosa. In conclusion, "non-oral" pathogenic bacteria are detected in high prevalence and levels in periodontal sites of chronic periodontitis patients.

RESUMO

Apesar da extensa literatura sobre a associação de bactérias orais e doenças sistêmicas, tem se dado pouca atenção à cavidade oral como um reservatório de bactérias patogênicas "não-orais". A microbiota oral é constituída de mais de 300 espécies bacterianas já caracterizadas, além de organismos não cultiváveis que vêm sendo descobertos através de técnicas moleculares. O objetivo do presente estudo foi determinar a prevalência e os níveis de 11 bactérias patogênicas "não-orais" em sítios periodontais de pacientes com periodontite e de pacientes saudáveis, utilizando a técnica do "Checkerboard DNA-DNA hybridization". 200 amostras de biofilme subgengival de sítios doentes (PBS > 4mm e/ou NCI > 4mm), 200 amostras de sítios saudáveis de 14 pacientes com periodontite e 200 amostras de sítios de 3 pacientes saudáveis foram selecionadas. A prevalência (% de sítios colonizados) e os níveis de cada espécie bacteriana foram computados para cada sítio e dentro de cada grupo. Diferenças clínicas e microbiológicas entre os grupos foram avaliadas através dos testes de Mann-Whitney e Wilcoxon. As espécies que predominaram nas 600 amostras analisadas incluíram Corynebacterium diphtheriae, Enterococcus faecalis, Staphylococcus aureus, Acinetobacter baumannii e Escherichia coli. Em geral, a maioria das espécies estudadas foi detectada com maior freqüência e em níveis elevados nos sítios com e sem doença nos pacientes com periodontite em relação ao grupo com saúde periodontal. Em particular, C. diphtheriae, E. coli, E. faecalis, Pseudomonas. aeruginosa e S. aureus foram significantemente mais prevalentes e detectadas em maior número nos sítios doentes de pacientes com periodontite em relação aos sítios de indivíduos com saúde periodontal (p 0,05). Sinais clínicos de doença periodontal apresentaram uma correlação positiva com as espécies A. baumannii, Streptococcus pyogenes, E. coli, S. aureus e P. aeruginosa. Além disso, as espécies S. pyogenes e A. baumannii, C. diphteriae e E. faecalis,C. diphteriae e S. pyogenes, S. aureus e P. aeruginosa também demonstraram uma forte correlação positiva entre si. Bactérias patogênicas "não-orais" são detectadas em grande prevalência e altos níveis em sítios de pacientes com periodontite crônica.