Use of monoclonal antibody for detecting Vibrio cholerae O1 in oysters by means of agglutination test / Detecção de Vibrio cholerae O1 em ostras utilizando anticorpo monoclonal em ensaio de aglutinação

ABSTRACT

V. cholerae serovar O1 is the etiologic agent responsible for pandemic cholera, and it is considered the most important human pathogenic Vibrio. The symptoms presented by patients affected by this bacterium vary from mild diarrhea to severe disease, and may even lead to death. Among the diverse types of seafood, the oysters pose as an important means for cholera transmission. Traditional methods used to detect V. cholerae are laborious and time-consuming, and there is an urgent need to establish a rapid, sensitive, specific, simple, and low-cost testing . The objective of this trial was, therefore, to assess the performance of a slide agglutination test using latex particles sensitized with specific monoclonal antibodies (MAb) for detecting V. cholerae O1 in experimentally-contaminated oysters. The slide agglutination test based on sensitized latex detected 1.2X102 CFU of bacteria (dilution 132). Oyster samples used in the present study, for being experimentally contaminated, were originally free of V. cholerae, but other bacteria were found, such as Proteus mirabilis, Pseudomonas spp, and other vibrios. The present study demonstrated that the period of time needed to verify the food contamination with V. cholerae is 18 hours, taking in consideration that traditional methods require an average of 7-day period for getting the final results. The produced MAb presented 100% of s

RESUMO

O V. cholerae sorogrupo O1 é o agente etiológico da cólera pandêmica, sendo considerado dentre os víbrios patogênicos ao homem, o mais importante. Os sintomas das infecções por esta bactéria variam de diarréia branda a doença grave podendo até levar a óbito. Dentre os alimentos marinhos, as ostras representam uma das principais vias na transmissão de cólera. Os métodos convencionais para detecção do V. cholerae O1 são laboriosos e demorados havendo, portando, a necessidade de implantar métodos rápidos, sensíveis, específicos, simples e de baixo custo. O objetivo deste estudo foi avaliar a técnica de aglutinação de partículas de látex sensibilizadas com anticorpo monoclonal (AcMo) na detecção de V. cholerae O1 em ostras, contaminadas laboratorialmente. A técnica de aglutinação com látex sensibilizado detectou 1,2x102 UFC da bactéria (diluição 1/32). As amostras de ostras utilizadas para contaminação originalmente não continham V. cholerae, mas outras bactérias foram detectadas, tais como Proteus mirabilis, Pseudomonas spp. e outros víbrios. O presente estudo demonstrou que a detecção de V. cholerae em alimentos foi reduzida para 18 horas, considerando que pela metodologia convencional a análise é finalizada, em média, em 7 dias. O AcMo produzido apresentou uma sensibilidade e especificidade de 100% para V. cholerae.