Efeito de sistemas de refrigeração sobre a viabilidade do sêmen bovino congelado analisado por meio de sistema computadorizado e sondas fluorescentes / Effect of refrigeration systems upon frozen bull sperm viability assessed by computer-assisted sperm analysis and fluorescent probes

ABSTRACT

O sucesso da criopreservação do sêmen depende da manutenção do potencial de fertilidade dos espermatozoides. Nos espermatozoides deve haver a preservação da integridade e funcionalidade de várias das suas estruturas. A fase de estabilização permite a saída de água dos espermatozoides por osmose. Este estudo tem o objetivo de comparar o efeito da refrigeração em refrigerador comercial (RC) e em caixa de transporte refrigerada (CTR) na viabilidade do sêmen congelado bovino diluído em três diferentes meios (A, B e C). Dez touros Nelore, Bos taurus indicus mantidos em central de inseminação artificial foram utilizados e as amostras de sêmen analisadas para checar a integridade das membranas plasmáticas e por meio da análise computadorizada (CASA). A fase de estabilização (5C/4 horas) foi realizada em RC e em CTR, sendo as amostras expostas ao vapor de nitrogênio durante 20 minutos e após mergulhadas no nitrogênio. A estatística foi feita com a análise de variância com nível de significância a 5%. No RC os parâmetros pós-descongelação para PM e ALH foram superiores (p 0,05) no meio B em relação ao C. Amostras que foram estabilizadas na CTR apresentaram parâmetros superiores (p 0,05) para PM e LIN nos meios A e B, em relação ao C. Os parâmetros BCF e STR foram superiores (p 0,05) no meio B em relação ao C. As amostras do meio B tiveram maior (p 0,05) PMI quando e

RESUMO

Sperm cryopreservation success depends upon the maintenance of spermatozoa fertility potential. Sperm cells must preserve both integrity and functionality of several cell structures. The stabilization phase must allow the exit of water from the sperm cells via osmosis. This study aimed to compare the effect of refrigeration in the commercial refrigerator (CR) and the transport/refrigeration box (TRB) upon the viability of frozen bull sperm diluted in three different extenders (A, B and C). Ten Nellore bulls, Bos taurus indicus maintained in Artificial Insemination Center were used and the spermatozoa samples was assessed for Plasma Membrane Integrity and CASA evaluation. The stabilization phase (5C/4 hours) was performed in the CR as well as in the TRB, and then samples were exposed to nitrogen vapor during 20 minutes and then plunged into nitrogen. The statistical analysis was done using the variance analysis and the significance level was set at 5%. In the CR the post-thawing parameters for PM and ALH were higher (p 0.05) in the extender A (glicine egg-yolk) and extender B (glicine egg-free) when compared with extender C (TRIS egg-yolk). As for BCF, STR and LIN, the parameters were higher (p 0.05) in extender B than in C. Samples that were stabilized in the TRB presented higher post-thawing parameters (p 0.05) for PM and LIN in extender A and extender B when c