Diversidad genética de aislamientos peruanos de Leptospira spp. mediante electroforesis en gel de campo pulsado / Genetic diversity of Peruvian isolates of Leptospira spp. through pulsed field gel electrophoresis

Objetivos. Determinar la diversidad genética de aislamientos peruanos de Leptospira spp. mediante electroforesis en gel de campo pulsado (PFGE). Materiales y métodos. Se estandarizó la metodología de PFGE propuesta por Galloway y Levett (2008). Se elaboró una base de datos con los perfiles de PFGE de 65 cepas de referencia y se aplicó la técnica en 111 aislamientos de Leptospira spp. obtenidos en Perú entre 2002 y 2010. Resultados. Se determinó gran diversidad genética de serovares de Leptospira spp. circulantes en nuestro país. Se identificaron 57 serovares, 47 en 97 aislamientos patógenos. Los serovares más frecuentes fueron Icterohaemorrhagiae/Copenhageni (n=24) y Canicola (n=7). Las especies más frecuentes fueron L. santarosai (49,5%) y L. interrogans (37,1%). La distribución de especies, clusters y serovares varió según la fuente del aislamiento, el contexto ambiental y la procedencia. Conclusiones. Existe gran diversidad de serovares circulantes en el Perú, la cual está relacionada a la especie, el reservorio, el contexto ambiental y la procedencia del aislamiento. Se evidencia las relaciones genéticas y epidemiológicas entre aislamientos de diferentes fuentes, lo cual está relacionada a la especie, el reservorio, el contexto ambiental y la procedencia del aislamiento.

Objectives. Determine the genetic diversity of Peruvian isolations of Leptospira spp. through Pulsed Field Gel Electrophoresis (PFGE). Materials and methods. The PFGE methodology proposed by Galloway and Levett (2008) was standardized. A database including the PFGE profiles of 65 reference strains was prepared, and the technique was applied in 111 isolates of Leptospira spp. obtained in Peru between 2002 and 2010. Results. A great generic diversity of serovars of circulating Leptospira spp. was determined in our country. 57 serovars were identified, 47 out of 97 pathogen isolates. Most frequent serovars were Icterohaemorrhagiae/Copenhageni (n=24) and Canicola (n=7). The most frequent species were L. santarosai (49,5%) and L. interrogans (37,1%). The distribution of species, clusters and serovars changed according to the source of isolate, the environmental context and the origin. Conclusions. There is great diversity of circulating serovars in Peru. There are genetic and epidemiological relations among isolates of different sources, and this is related to species, reservoir, environmental context and the origin of the isolate.

Brote de leptospirosis asociado a la natación en una fuente de agua subterránea en una zona costera, Lima - Perú / An outbreak of leptospirosis associated with swimming in a spring of underground water in a coastal area, Lima - Peru

Objetivos. Determinar la magnitud de un brote y los factores asociados a la presencia de leptospirosis en la localidadde residencia de un menor de edad que presentó un cuadro de síndrome ictérico hemorrágico. Materiales y métodos.Fueron entrevistados y examinados niños y adolescentes de la zona de residencia del caso índice que frecuentaban unafuente común de infección entre los meses de enero y febrero del 2004. Se realizaron exámenes de ELISA IgM, MAT, PCR y cultivo para el diagnóstico de leptospirosis. Resultados. Fueron incluidos 77 sujetos entre 2 a 18 años de edad, siendo confirmados 21 casos (27,3 por ciento). Los signos y síntomas de los casos confirmados fueron fiebre, cefalea, mialgias, dolor abdominal, náusea, vómitos e hiporexia. Tres de ellos presentaron ictericia, hemorragia y falla renal. El análisis bivariado mostró que aquellos que estuvieron en contacto con la fuente de infección de agua clara (cristalina) tuvieron un OR=3,26(IC95 por ciento 1,22 a 8,72) y el contacto con perros en la fuente de agua un OR de 5,63 (IC95 por ciento 1,40 a 22,63). Conclusiones. Se confirmó un brote de leptospirosis dentro de un contexto epidemiológico nuevo relacionados a una fuente común de agua subterránea y asociada al contacto con perros dentro de esta fuente. Esta investigación permitirá ampliar el conocimiento acerca de esta patología, así como considerar la leptospirosis como causa de enfermedad febril aguda.

Objectives. Identify the frequency and risk factors of leptospirosis outbreak in the locality of residence of an index casewith icterohemorrhagic syndrome. Material and methods. Were interviewed and examined children and teenagers fromresidence area of index case who frequented a common source of infection between January and February, 2004. Allof them were screened for leptospirosis using IgM-ELISA and microscopic agglutination test (MAT), PCR and culture.Results. Were enrolled 77 subjects between 2 to 18 years old, only 21 (27.3 per cent) were confirmed cases. The signs and symptoms of the confirmed cases were fever, headache, myalgia, abdominal pain, nausea, vomiting and anorexia. Three of them presented with jaundice, bleeding and renal failure. The presence of contact with the source of infection of underground water (OR=3.26, 95 per centIC 1.22 to 8.72), and the contact with dogs in the water source of infection (OR = 5.63, 95 per cent IC = 1.40 to 22.63) were identified as significant factors associated with leptospirosis. Conclusions. It wasconfirmed an outbreak of leptospirosis in a new epidemiological context related to a common source of underground water and associated by contact with dogs in the same source. This data will allow to expand the knowledge about this disease as well as to consider leptospirosis as an important cause of acute febrile disease.

Evaluación de dos ensayos de ELISA IgM en la investigación de un brote de Leptospirosis / Evaluation of two ELISA IgM assays in leptospirosis outbreak research

Se evaluó dos pruebas rápidas para el diagnóstico serológico de leptospirosis aguda, la prueba de ELISA IgM pool (Instituto Nacional de Salud, Lima) comparada con un ELISA IgM comercial (PANBIO) tomando como gold standar la prueba de microaglutinación (MAT).Se examinó 24 pacientes admitidos en un hospital para la investigación de un brote de leptospirosis. Se tomó dos muestras de suero, la primera cuando fueron hospitalizados y la segunda cuando fueron a la consulta o dados de alta del hospital. Se diagnóstico leptospirosis en 19 de 24 pacientes por MAT. La prueba de ELISA IgM-pool tuvo una mejor sensibilidad para muestras agudas que el ELISA IgM comercial (73,7 por ciento vs 31,6 por ciento), valores predictivos positivos (93,3 vs 85,7 por ciento) y negativos (44,4 vs 23,5 por ciento) e igual especificidad (80 por ciento). En la evolución de sueros convalecientes tuvieron el mismo rendimiento, sensibilidad de 100 por ciento y especificidad de 80 por ciento. La prueba rápida ELISA IgM-pool es altamente sensible y específica, no requirere de equipo especializado y se encuentra disponible para el uso en cualquier laboratorio.

Was assessed two rapid tests for serodiagnosis of acute leptospirosis, the ELISA IgM pool (Instituto Nacional de Salud, Lima), compared with a commercial ELISA IgM (PANBIO) against the gold standard microagglutination test (MAT). We examined 24 patients admitted to ahospital for investigation of a leptospirosis outbreak. It took two samples of serum, the first when they were hospitalized and the secondwhen the consultation or discharged from the hospital. Leptospirosis were diagnosed in 19 of 24 patients by MAT. ELISA IgM pool was show a better sensitivity for acute samples that commercial IgM ELISA (73.7 per cent vs 31.6 per cent), positive (93.3 vs 85.7 per cent) and negative (44.4 vs 23.5 per cent) predictive values and same specificity (80 per cent). In the evolution of convalescent sera had the same performance, sensitivity of100 per cent and specificity of 80 per cent. The rapid test of ELISA IgM pool is highly sensitive and specific, Not requiring specialized equipment and are available for use in any laboratory.

Prevalencia de anticuerpos contra leptospira en personas asintomáticas y en perros de Chancay, Lima 2001 / Prevalence of antibodies against leptospira in asymtomatic persons and dogs in Chancay, Lima 2001

Objetivos. Determinar la prevalencia de anticuerpos contra Leptospiras en personas asintomáticas dedicadas a la agricultura, pesca y comercio y en perros domésticos de localidades de Chancay (Huaral, Lima). Material y métodos. Estudio transversal analítico, se tomó muestras de suero de 268 pobladores de tres localidades, en quienes se evaluó la presencia de anticuerpos totales contra Leptospiras por el método de ELISA IgG y la prueba de microaglutinación (MAT). Se buscaron los factores asociados con la positividad a Leptospiras calculando el OR con su intervalo de confianza al 95 por ciento. De la misma manera, se tomó muestras de suero de 241 perros a los que se realizó la prueba de MAT. Resultados. La prevalencia de anticuerpos contra Leptospira en población asintomática fue de 10,1 por ciento (IC95 por ciento: 6,3-13,9), la cual estuvo asociada con el abastecimiento de agua para consumo en quebrada o pozo (OR: 3,48, IC95 por ciento: 1,39-8,74), con el antecedente de nadar en el río o acequia (OR: 4,75, IC95 por ciento: 1,51-14,92) y con tener una edad entre 21-40 años (OR: 2,47, IC95 por ciento: 1,10-5,52). Los serovares más frecuentes fueron Icterohaemorrhagiae y Canicola según MAT. En canes, 27,8 por ciento (67/241) tuvieron serología positiva a leptospiras. Conclusiones. Existe una mediana prevalencia de serología positiva para Leptospiras en la población general asintomática y condiciones favorables para la presencia de Leptospiras en las localidades estudiadas. En estas zonas se recomienda realizar actividades educativas preventivas frecuentes, tomando en cuenta los resultados de este estudio y el personal de salud debe sospechar de la leptospirosis como una causa de enfermedad febril.

Objectives. To determine the prevalence of antibodies against Leptospiras in asymptomatic persons engaged in agriculture, fisheries and trade, and domestic dogs from Chancay (Huaral, Lima). Material and methods. Cross sectional survey, serum samples were taken from 268 residents of three localities, who were assessed of the presence of total antibodies against Leptopsiras by IgG ELISA and microagglutionation test (MAT). We founded the associated factors with positive Leptospiras calculating OR and 95 per cent confidence interval. By de same token, it took serum samples from 241 dogs to be tested for MAT Results. The prevalence of antibodies against Leptospira in asymptomatic persons was 10.1 per cent (95 per cent CI: 6.3-13.9), wich was associated tith water supply for consumption in creek or pit (OR: 3.48, 95 per cent CI: 1.39-8.74), with the history of swimming in the river or canal (OR: 4.75, 95 per cent CI: 1.51-14.92) and have an age between 21-40 years (OR: 2.47, 95 per cent CI: 1.10-5.52). The most frequent serovars were Icterohaemorrhagiae and Canicola according MAT. In dogs, 27.8 per cent (67/241) had positive serology to Leptospiras. Conclusions. There is a median prevalence of positive serology for Leptospiras in the asymptomatic general population and encouraging conditions for the presence of Leptospiras in the localities studied. In this areas is recommended frequent preventive educational activities, taking in to account the results of this study and health personnel to be suspected of Leptospirosis as a cause of febrile syndrome.