Sorologia para o vírus da língua azul em bovinos de corte, ovinos e veados campeiros no Pantanal sul-mato-grossense / Bluetongue virus serosurvey in beef cattle, sheep, and pampas deer from Brazilian Pantanal

This investigation was carried out in beef cattle (n=219), sheep (n=55), and pampas deer (Ozotoceros bezoarticus) (n=49) from Nhecolândia, sub region of Brazilian Pantanal in Mato Grosso do Sul State, Brazil. It was aimed to assess the seropositivity of these species to bluetongue virus (BTV) by agar gel immunodiffusion test. Seropositivity rates were 42.0% for cattle and 10.9% for sheep. The pampas deer showed to be all seronegative. In cattle, seropositivity to BTV significantly increased with age (P<0.001). These data, the favorable environmental conditions to development of BTV vectors, and the bovine reproductive disorders reported by farmers may indicate that BTV infection occurrs in herds of Brazilian Pantanal, and probably induces to economical losses.

Meningoencefalite por Herpesvirus bovino 5 em Minas Gerais: relato de caso clínico / Meningoencephalitis by Bovine herpesvirus 5 in Minas Gerais state: clinical case report

Relata-se um caso de meningoencefalite causada por Herpesvirus bovino 5 (BoHV-5) heritabilityem uma vaca com cinco anos de idade. O animal manifestou quadro clínico inicial de síndrome medular baixa, caracterizada por incoordenação dos membros pélvicos, sinais estes ainda não descritos para a enfermidade. Dentro de pouco tempo a doença evoluiu para síndrome cerebral, e o óbito ocorreu seis dias após o inicio dos sintomas. Na histopatologia, evidenciou-se meningoencefalite difusa, não supurada, e a confirmação do diagnóstico foi feita por reação em cadeia de polimerase e sequenciamento do segmento parcial da glicoproteína G do vírus. O trabalho confirma a presença do BoHV-5 em Minas Gerais, descreve características clínicas novas para a enfermidade e ressalta sua importância no diagnóstico diferencial das neuropatias bovinas.

A clinical case of meningoencephalitis by Bovine herpesvirus 5 (BoHV-5) in a five-year-old cow was reported. The disease began with low spinal cord signs, characterized by incoordination, and these symptoms had never been related to this illness before. Signs of a brain syndrome were observed and the cow died in six days. At the histopathology, a spread non-supurative meningoencephalitis was diagnosed, and the virus identification was made by PCR and partial sequence of the glycoprotein G. This study confirm the BoHV-5 presence in the State of Minas Gerais, Brazil, describes new clinic characteristics, and show the importance of the disease in the differentiate diagnosis with others bovine central nervous system affections.

Padronizacão da técnica de imunoistoquímica para o diagnóstico etiológico de rotina da diarréia bovina a vírus / Bovine viral diarrhea diagnostic: immunohistochemistry standardization for routine

The immunohistochemistry standardization for bovine viral diarrhea virus (BVDV) diagnostic was described. The formalin-fixed tissue samples from a heifer with mucosal disease were used as positive control. The validation of the first phase results was performed using samples from an aborted fetus and a calf infected with reference strains of BVDV. The best results were seen using monoclonal antibodies and a commercial kit consisting of labelled streptavidin biotin (LSAB) reagents and the diaminobenzidine (DAB) substrate-chromogen reagent. The immunohistochemistry demonstrated to be an useful method for routine diagnosis for the controll and detection of BVDV infection.

Utilização de parte da região codificadora da glicoproteína b na diferenciação do herpesvírus bovino 1.1, herpesvírus bovino 1.2 e herpesvírus bovino 5 / Utilization of part of the region which codes for glycoprotein b in bovine herpesvirus 1.1, bovine herpesvirus 1.2 and bovine herpesvirus 5

Utilizou-se uma reação em cadeia de polimerase (PCR) previamente desenvolvida para a amplificação de parte da região única longa 27 (UL27) do genoma de herpesvírus bovino 1.1 (BoHV-1), que codifica a glicoproteína B, buscando a diferenciação entre isolados de BoHV-1.1 e BoHV-5. Os produtos de PCR gerados a partir de isolados de BoHV-1.1 e BoHV-5 mostraram padrão de amplificação diferenciado em seus tamanhos moleculares. Analisando as seqüências de nucleotídeos dos produtos de PCR obtidos de dois isolados de BoHV-5, juntamente com as seqüências dos produtos de PCR obtidos de um isolado de BoHV-1.1 e de três isolados de BoHV-1.2, previamente depositados no GenBank, verificou-se que a diferença observada na amplificação se deve ao número de repetições de G-C presentes no final da região codificadora da gB, particularmente nas seqüências 5'-G(A/T)CC-3'. A análise dessas seqüências-motivo desponta como uma ferramenta auxiliar na diferenciação entre isolados de BoHV-1.1, BoHV-1.2 e BoHV-5.

Padronização da técnica de imunoperoxidase para detecção do vírus da diarréia bovina a vírus em cultura de células: Standardization of immunoperoxidase test to detection bovine viral diarrhea virus in cell culture

The aim of this study was to standardize the immunoperoxidase in cell monolayer assay (IPMA) for the etiological diagnosis of bovine viral diarrhea (BVD). The method was standardized in monolayer of primary bovine fetal lung culture inoculated with cytophatic and non-cytophatic classical strains of BVD virus and tested using samples that were considered suspected in the classical technique of viral isolation. The IPMA successfully identified BVD virus and presented better results when heat was used for fixation, BSA 4% solution in PBS was used for blocking and AEC chromogen was used for revelation. Both monoclonal and polycloral antibodies gave good results when used as primary antibodies.

Este estudo teve como objetivo a padronização do ensaio de imunoperoxidase em monocamada de células (IPM) para o diagnóstico etiológico da diarréia bovina a vírus (DBV). O teste foi padronizado em monocamada de cultivo primário de pulmão fetal bovino (PFB) inoculada com as amostras clássicas, citopatogênica (CP) e não citopatogênica (NCP), do vírus da DBV e testado em amostras biológicas suspeitas processadas no teste clássico de isolamento viral (IV). O método de IPM identificou o vírus da DBV, apresentando melhores resultados com a utilização do calor como agente fixador, a soroalbumina bovina a 4% em PBS como bloqueador e a revelação com o cromógeno 3-amino-9-etil-carbazol (AEC). Como anticorpos primários, tanto o anticorpo policlonal como o monoclonal forneceram bons resultados.

Padronizaçäo da técnica de imunoperoxidase para detecçäo do vírus da diarréia bovina a vírus em cultura de células / Standardization of immunoperoxidase test to detection bovine viral diarrhea virus in cell culture

Este estudo teve como objetivo a padronizaçäo do ensaio de imunoperoxidase em monocamada de células (IPM) para o diagnóstico etiológico da diarréia bovina a vírus (DBV). O teste foi padronizado em monocamada de cultivo primário de pulmäo fetal bovino (PFB) inoculada com as amostras clássicas, citopatogênica (CP) e näo citopatogênica (NCP), do vírus da DBV e testado em amostras biológicas suspeitas processadas no teste clássico de isolamento viral (IV). O método de IPM identificou o vírus da DBV, apresentando melhores resultados com a utilizaçäo do calor como agente fixador, a soroalbumina bovina a 4 por cento em PBS como bloqueador e a revelaçäo com o cromógeno 3-amino-9-etil-carbazol (AEC). Como anticorpos primários, tanto o anticorpo policlonal como o monoclonal forneceram bons resultados

Detecçäo de herpesvírus bovino 5 (BoHV-5) em bovinos do Sudeste Brasileiro / Detection of bovine herpesvirus type 5 (BoHV-5) in cattle in Southeast Brazil

This paper reports the detection of bovine herpesvirus type 5 (BoHV-5) by a specific nested PCR assay. Samples were collected from the central nervous system (CNS) of cattle from Minas Gerais and São Paulo States, Brazil. All animals died presenting neurological symptoms. Nineteen frozen CNS samples analyzed had been previously tested by fluorescence antibody test for rabies virus and showed negative results. Three paraffin-embedded brain tissue samples were examined by histopatology and the observed alterations suggested nonsuppurative meningoencephalitis. BoHV-5 was detected in five (22.7 percent) among 22 tested samples. The occurrence of BoHV-5 infection is reported in the Southeast region of Brazil, indicating that epidemiological studies should be carried out