Tall stature and poor breast development after estrogen replacement in a hypergonadotrophic hypogonadic patient with a 45,X/46,X,der(X) karyotype with SHOX gene overdosage / Estatura alta e hipodesenvolvimento mamário após reposição estrogênica em paciente com hipogonadismo hipergonadotrófico e cariótipo 45,X/46,X, der(X) com superdosagem do gene SHOX

SHOX is exclusively expressed in the developing distal limb bones of human embryos and in the first and second pharyngeal arches. It works as a promoter for linear growth and as a repressor of growth plate fusion. It was reported, recently, that SHOX overdosage and gonadal estrogen deficiency have led to tall stature due to continued growth. We report, in the present study, a female patient with 45,X/46,X, psu idic(X)(pter→q21::q21→pter) karyotype, tall stature, and hypergonadotrophic hypogonadism without Turner stigmas. She did not present breast development even after long term therapy with high estrogen doses. Fluorescence in situ hybridization depicted the presence of three copies of SHOX gene. Microsatellite studies showed paternal origin of der(X). Further studies in similarly affected patients will clarify if the absence of breast development, despite previous high-dose estrogen treatment, is associated to triple copy of SHOX gene.

O gene SHOX é expresso, exclusivamente, no primeiro e no segundo arcos faríngeos, assim como nas extremidades dos ossos dos membros em embriões humanos. SHOX normalmente atua como um promotor para o crescimento linear e como um repressor do fechamento da placa de crescimento. Recentemente, foi descrito que o excesso da proteína SHOX associada à deficiência estrogênica gonadal leva à estatura alta devido ao contínuo crescimento. Neste estudo descrevemos uma paciente do sexo feminino com cariótipo 45,X/46,X,psu idic(X)(pter→q21::q21→pter), estatura alta, hipogonadismo hipergonadotrófico e sem estigmas de Turner. A paciente não apresentou desenvolvimento de mamas, mesmo depois do tratamento prolongado com altas doses de estrógenos. FISH evidenciou a presença de três cópias do SHOX. Estudo de microssatélites demonstrou a origem paterna do der(X). Estudos futuros em pacientes com semelhanças clínicas esclarecerão se a ausência de desenvolvimento de mamas, apesar do tratamento com altas doses de estrógenos, está associada à tripla cópia do SHOX.

Frequency of the allelic variant (Trp8Arg/Ile15Thr) of the luteinizing hormone gene in a Brazilian cohort of healthy subjects and in patients with hypogonadotropic hypogonadism

OBJETIVO: Avaliar a freqüência da variante alélica (Trp8Arg/Ile15Thr) do gene da subunidade b do hormônio luteinizante em um grupo de brasileiros saudáveis e em pacientes portadores de hipogonadismo hipogonadotrófico.CASUÍSTICA E MÉTODOS: Duzentos e dois adultos (115 mulheres) com função sexual preservada e 48 pacientes (24 mulheres) portadoras de hipogonadismo hipogonadotrófico foram submetidos a estudo molecular utilizando técnicas de reação em cadeia da polimerase seguida por digestão enzimática com as enzimas de restrição Nco I (para detecção da mutação pontual Trp8Arg) e Fok I (para detecção da mutação pontual Ile15Thr). Os níveis basais de hormônio luteinizante e FSH, testosterona ou estradiol foram dosados em 37 indivíduos normais (21 mulheres) e 27 pacientes portadores de hipogonadismo hipogonadotrófico (13 mulheres) pelo método imunofluorométrico (hLH-Spec and hFSH-Spec, AutoDELFIA, Wallac Oy, Turku, Finland).RESULTADOS: A variante alélica (Arg8/Thr15) do gene da subunidade b do LH apresentou freqüência similar nos indivíduos saudáveis (14.4%) e nos pacientes portadores de hipogonadismo hipogonadotrófico (16.6%). Não houve interferência da variante alélica do gene da subunidade b do LH nos níveis de LH dos indivíduos normais e dos pacientes portadores de hipogonadismo hipogonadotrófico.CONCLUSÃO: Este estudo indica que a variante alélicaArg8/Thr15 do gene da subunidade b do LH é um polimorfismo comum na população brasileira (14.4%). A freqüência similar dessa variante em indivíduos saudáveis e em portadores de hipogonadismo hipogonadotrófico exclui o papel da variante na etiologia do hipogonadismo hipogonadotrófico.

Post-mortem forensic identity testing: application of PCR to the identification of fire victim

CONTEXT: DNA analysis has been used with success in the identification of carbonized corpses and victims of large accidents. The analysis requires relatives of crash victims to donate blood for analysis. The relatives are generally willing contribute to the identification by giving a blood sample. OBJECTIVE: To describe the use of the polymerase chain reaction (PCR) for genetic characterization of one victim extensively burned by fire. DESIGN: Case report. CASE REPORT: DNA was extracted from blood of the cardiac chamber, and 15 different loci (D1S80, ApoB, D17S30, D3S1744, D18S849, D12S1090, FGA, D7S820, D1S533, D9S304, HUMCSF1PO, HUMTPOX, HUMTHO1, amelogenin and HLA-DQA1) were analyzed using the PCR technique. Results from all loci typing of the corpse were then compared to that of his alleged biological parents, revealing a genetic compatibility.

Protocol for rapid fetal sex determination in chorionic villus through polimerase chain reaction

A determinaçäo do sexo fetal e essencial para o diagnóstico pré-natal de doenças relacionadas ao sexo como hiperplasia adrenal congenita e sindrome de insensibilidade androgenica. As tecnicas de biologia molecular identificam a presença do cromossomo Y através de metodologia mais fácil e rapida do que a técnica citogenetica convencional. Utilizamos DNA extraido de vilo corionico de oito biopsias realizadas entre a 10 e 12 semanas de gestaçäo, para amplificar um fragmento de 778 pb correspondente a sequencia do gene SRY ("primers" XES10-XES11) na determinaçäo do sexo fetal. Como controle interno da reaçäo amplificamos simultaneamente um fragmento de 650 pb do exon 6-8 do gene CYP21B, gene ativo da 21 hidroxilase ("primers" 5' GAGGGATCACATCGTCGTGGAGATG3' e 5'TTCGTGGTCTAGCTCCTCCTG3'). O protocolo utilizado na PCR foi 94 graus C - 2 min; 32 ciclos: 94 graus C - 1 min, 63 graus C - 1 min, 72 graus C- 2 min e um ciclo de extensäo de 72 graus C - 10 min. Para confirmaçäo dos resultados da PCR realizou-se cariotipo a partir de cultura de células obtidas atraves de biopsia de vilosidade corionica. Em um caso o material näo foi suficiente para a realizaçäo do cariotipo. Este protocolo foi testado em 200 amostras de DNA extraido de leucocitos de homens e mulheres normais. A amplificaçäo do gene CYP21B ocorreu em todas as amostras enquanto a amplificaçäo do gene SRY apenas nas amostras dos homens. Das oito amostras de DNA extraidas de vilo corionico o gene SRY foi positivo em tres fetos masculinos e negativo nos cinco fetos femininos. O sexo fetal foi confirmado pelo cariotipo ou após o nascimento. Nos concluimos que este protocolo representa um método fácil, rapido e seguro de determinaçäo do sexo fetal