Drug resistance of Mycobacterium tuberculosis strains in southern Brazil / Estudo da resistência de cepas de Mycobacterium tuberculosis aos antimicrobianos no sul do Brasil

INTRODUCTION: The aim of this work was to evaluate the prevalence of Mycobacterium tuberculosis (MT) strains with mutations that could result in resistance to the main drugs used in treatment in a region with one of the highest numbers of tuberculosis (TB) cases in southern Brazil. METHODS: Deoxyribonucleic acid (DNA) from 120 sputum samples from different patients suspicious of pulmonary tuberculosis who attended the Municipal Public Laboratory for Mycobacterium sp. diagnosis was directly amplified and analyzed by PCR-SSCP. The DNA was amplified in known hotspot mutation regions of the genes rpoB, ahpC, embB, katG, inhA, and pncA. RESULTS: The percentage of samples positive by culture was 9.2 percent (11/120); 5 percent (6/120) were positive by bacilloscopy and MT-PCR, and DNA fragments of the aforementioned resistance genes could be amplified from seven (7) of the eleven (11) samples with positive results, either by culture or PCR/bacilloscopy. All presented a SSCP pattern similar to a native, nonresistant genotype, with the ATCC strain 25177 as control, except for one sample (0.01 percent), which presented a SSCP profile demonstrating mutation at the embB gene. CONCLUSIONS: These results are consistent with the empirical observations by physicians treating TB patients in our region of a low occurrence of cases that are refractory to conventional treatment schemes, in contrast to other parts of the country. Continued surveillance, especially molecular, is essential to detect and monitor the outbreak of MT-resistant strains.

INTRODUÇÃO: O objetivo deste trabalho foi avaliar a prevalência de cepas de Mycobacterium tuberculosis (MT) com mutações que podem resultar em resistência às principais drogas utilizadas no tratamento em uma das regiões com o maior número de casos de tuberculose (TB) no Sul do Brasil. MÉTODOS: O ácido desoxiribonucleico (DNA) de 120 amostras de escarro de diferentes pacientes com suspeita de TB pulmonar que procuraram o serviço público de saúde do município sede da região para o diagnóstico de MT foi diretamente amplificado e analisado por PCR-SSCP. Foram amplificadas regiões conhecidas onde ocorrem a maioria das mutações nos genes rpoB, ahpC, embB, katG, inhA, and pncA. RESULTADOS: Nove virgula dois por cento (11/120) das amostras apresentaram resultado positivo por cultura, 5 por cento (6/120) foi positiva por bacilscopia e PCR para MT, e os fragmentos dos genes mencionados puderam ser amplificados em sete (7) dos onze (11) casos com resultado positivo, seja por cultura ou PCR/baciloscopia. Todos estes casos apresentaram um padrão de SSCP similar ao genótipo nativo, não resistente, por comparação com a cepa controle ATCC 25177, com exceção de uma amostra (0,01 por cento), que apresentou um padrão de SSCP mutante no gene embB. CONCLUSÕES: Estes resultados são consistentes com as observações empíricas por parte dos clínicos que tratam os pacientes com TB na região, de uma baixa ocorrência de casos refratários ao tratamento convencional, em contraste com outras partes do país. Porém, a vigilância contínua, especialmente molecular, é essencial para identificar e monitorar o aparecimento de cepas de MT resistentes.

Infecção por Mycoplasma pulmonis em ratos wistar provenientes de biotério / Mycoplasma pulmonis infection in Wistar rats from an animal house

Mycoplasma pulmonis, causador da Micoplasmose Respiratória Murina (MRM), é uma das espécies de micoplasmas mais patogênicas para roedores de laboratório. A morbidade e mortalidade dos animais infectados por este micoplasma pode ser elevada, especialmente nos estudos de longa duração ou em animais com infecção subclínica exacerbada pela experimentação. Desta maneira haverá interferência na interpretação dos resultados experimentais. No presente estudo foi avaliada a taxa de infecção por M. pulmonis em ratos provenientes do biotério da Universidade Regional de Blumenau criados para experimentação científica, por cultura e PCR. Dentre os 20 animais analisados, 15 (75por cento) apresentaram DNA de M. pulmonis no lavado broncoalveolar e duas amostras produziram colônias típicas em agar SP4. Os resultados obtidos evidenciaram uma alta taxa de infecção por micoplasma em ratos no biotério avaliado, apesar do reconhecimento desta problemática no país a partir da década de 1990.

Identificação Laboratorial de β - Lactamases de Espectro Estendido (ESBLs) Revisão / Laboratory Identification of Extended - Spectrum β - lactamases A review

Segundo vários autores (BELL st al., 2002; RAHMAN et al., 2004; BRIGANTE et al., 2005), a incidência de bactérias produtoras de Beta-Lactamases de Espectro Estendido (ESBLs) é distinta nas diversas áreas geográficas estudadas. As Beta-Lactamases do Espectro Estendido (ESBLs) produzidas por bacilos gram negativos estão entre os grandes problemas da medicina atual. Quando produtoras destas enzimas, os microorganismos (principalmente K. pneumoniae e E. coli) tornam-se altamente eficazes em inativar as penicilinas, cefalosporinas de primeira, segunda e terceira geração. Além disso, as bactérias produtoras de ESBLs são frequentemente resistentes à diversas classes de antibióticos não Beta-Lactâmicos, causando grande dificuldade no tratamento destas infecções. O grande objetivo deste artigo é alertar os laboratórios de análises clínicas para as dificuldades na detecção rotineira deste fenômeno e a grande relevância clínica desta detecção para a saúde do paciente, além de sua enorme importância no controle das infecções hospitalares causadas por cepas produtoras de beta-lactamases.

Efeito da desnutrição protéica experimental na hemopoese medular / Experimental protein malnutrition effect in the medular hemopoiesis

A desnutrição protéico-energética (DPE) é a forma de desnutrição mais encontrada em áreas subdesenvolvidas, atingindo principalmente recém-nascidos de baixo peso para sua idade gestacional, pacientes hospitalizados sob alimentação parenteral, idosos, crianças pré-escolares, indivíduos com distúrbios alimentares como na anorexia nervosa e bulimia e pacientes portadores de neoplasias, doenças crônicas e sob quimioterapia. No sistema hematopoético, a proliferação e diferenciação celular ocorrem de forma constante e equilibrada, sensível às demandas de linhagens celulares específicas. O comportamento medular da população de cada linhagem hematopoética é controlado pelo equilíbrio entre auto-renovação das células tronco, a diferenciação e a morte celular...

Aspectos fisiopatológicos do líquido cefalorraquidiano: importânia na rotina laboratorial / Phisiopathologicals aspects of cerebrospinal fluid: the importance in rotine laboratory

A análise do líquido cefalorraquidiano (LCR) tem se mostrado como um dos principais exames laboratoriais de urgência imediata, pois freqüentemente uma patologia inflamatória, tumoral, vascular ou alérgica, que acomete o sistema nervoso central (SNC), meninges ou membranas pio-aracnóides, revela-se de um modo claro pelos exames do liquor. Na avaliação de um paciente com suspeita de meningite, tradicionalmente, realiza-se a análise da citologia do LCR e culturas. Além disso, já é conhecido que as dosagens de proteínas e glicose são também usadas para distinguir a meningite tuberculosa, fúngica ou bacteriana da meningite virótica. O objetivo deste estudo foi avaliar as variações apresentadas na citologia total e específica, a determinação das análises clínicas tradicionais bem como o doseamento de lactado e desidrogenase láctica (LDH) que está-se tornando um grande auxiliar no diagnóstico das meningites. As análises do LCR de 80 crianças atendidas no Hospital Infantil Joana de Gusmão foram analisadas no Laboratório Médico Ciências. Os resultados demonstram uma variação citológica global e específica em crianças de diferentes faixas etárias com diagnóstico laboratorial de meningite séptica e asséptica. Vale ressaltar o valor clínico das análises da LDH e do lactato já que são indicadores muito sensíveis e precoce na meningite bacteriana comparado com a glicose.