ABSTRACT
Introdução: Existe pouco entendimento a respeito dos mecanismos moleculares que levam à formação dos quelóides e cicatrizes hipertróficas, assim como não existe um modelo animal adequado para seu estudo, visto que só ocorrem em humanos. A teoria mais aceita propõe que um aumento na regulação do TGF-b1 leva à formação dessas cicatrizes. Objetivo: Criar um modelo animal de quelóide utilizando células geneticamente modificadas codificando o TGF-b1. Método: Fibroblastos dérmicos humanos foram geneticamente modificados para aumentarem a expressão de TGF-b1 na forma selvagem ou latente ou na forma mutante ou ativa. Os fibroblastos transfectados foram transplantados intradermicamente em camundongos atímicos, e a formação de tecido fibroso analisada em diferentes intervalos de tempo por meio de histologia e imunohistoquímica. Resultados: Após a injeção intradérmica nos camundongos atímicos, apenas os fibroblastos expressando a forma ativa do TGF-b1 formaram nódulos quelóide-like, contendo colágeno e fibronectina. Estas estruturas persistiram microscopicamente por mais tempo que os implantes dos fibroblastos controle e os expressando a forma latente do TGF-b1. Conclusões: A injeção de fibroblastos transfectados codificando o TGF-b1 levou à formação de nódulos semelhantes ao quelóide na pele de camundongos atímicos. O TGF-b1 precisa estar em sua forma ativa para produzir os nódulos fibróticos.
Subject(s)
Rats , Cicatrix, Hypertrophic , Fibroblast Growth Factor 1 , Fibroblasts , In Vitro Techniques , Keloid , Models, Animal , Transforming Growth Factor beta , Genetic Techniques , Immunohistochemistry , MethodsABSTRACT
Introdução: O aumento na produção de TGF-β1 tem sido implicado na formação de cicatrizes hipertróficas e quelóides, mas não está claro se esse aumento é a causa ou efeito da formação dessas cicatrizess. Objetivo: Caracterizar o papel do TGF -β1 e de sua ativação na formação de fibrose de pele. Métodos: Fibroblastos dérmicos humanos foram geneticamente modificados para aumentarem a expressão de TGF -β 1 na forma selvagem ou latente, ou na forma mutante ou ativa. A secreção de TGF-β1 foi avaliada; assim como sua bioatividade, através da proliferação celular, expressão de actina a de músculo liso e habilidade de contrair géis de colágeno. Os fibroblastos transfectados foram transplantados intradermicamente em camundongos atímicos, e a formação de tecido fibroso analisado em diferentes intervalos de tempo através de histologia e imuno-histoquímica. Resultados: Os fibroblastos modificados geneticamente produziram 20 vezes mais TGF-β1 que as células controle. Os fibroblastos expressando o TGF-β1 ativo tiveram aumento nos níveis de actina a de músculo liso, um aumento na habilidade de contrair géis de colageno, com proliferação celular diminui da. Após a injeção intradérmica nos camundongos atímicos, apenas os fibroblastos expressando a forma ativa do TGF -β 1 formaram nódulos semelhantes ao quelóide, contendo colágeno e fibronectina. Estas estruturas persistiram microscopicamente por mais tempo que os implantes dos fibroblastos controle e os expressando a forma latente do TGF-β1. Conclusões: TGF-β1 levou à formação de fibrose na pele de camundongos atímicos. O TGF-β1 precisa estar em sua fonrmativa para produzir fibrose.
Subject(s)
Fibroblasts , FibrosisABSTRACT
A cultura de células, na Cirurgia Plástica, representa uma perspective para o estudo dos mecanismos celulares que norteiam o processo cicatricial de diversos tecidos. Algumas etapas do processo de cicatrização dependem de fatores físicos como a pressão parcial de O2. Em uma cultura de células, é possível submeter células a um ambiente hipóxico. O presente estudo relata um método alternativo de baixo custo para o estabelecimento de um ambiente hipóxico em frascos de cultura de células.
Subject(s)
Cell Culture Techniques , Wound Healing , Low Cost Technology , Surgery, Plastic , Cell HypoxiaABSTRACT
In Plastic Surgery, cell culture represents the perspective of studying cellular mechanisms that guide the healing process of several tissues. Some steps of the healing process depend on physical factors as the tissular partial pressure of O2. In cell culture, it is possible to submit cells to hypoxic enviroment. The present study reports an alternative method at low cost for the establishment of hypoxic environment in cell culture flasks.
A cultura de células, na Cirurgia Plástica, representa uma perspective para o estudo dos mecanismos celulares que norteiam o processo cicatricial de diversos tecidos. Algumas etapas do processo de cicatrização dependem de fatores físicos como a pressão parcial de O2. Em uma cultura de células, é possível submeter células a um ambiente hipóxico. O presente estudo relata um método alternativo de baixo custo para o estabelecimento de um ambiente hipóxico em frascos de cultura de células.