ABSTRACT
La leishmaniosis es una enfermedad parasitaria con varias formas clínicas, desde lesiones cutáneas leves hasta enfermedades fatales con comprometimiento visceral. Existen varias técnicas moleculares como por ejemplo la reacción en cadena de la polimerasa (PCR) que amplifica diferentes secuencias blanco, una de ellas es la región SLME (spliced leader miniexon), el producto se corta con enzimas de restricción (PCR-RFLP), permitiendo la identificación de las especies de Leishmania. Este trabajo fue realizado con el objetivo de caracterizar las cepas de Leishmania, empleando una PCR-RFLP de la región SLME, aisladas de humanos y caninos, provenientes de distintas zonas del país. Se analizaron 12 aislados de humanos y 40 de caninos debidamente codificados. Se empleó un par de cebadores para la región SLME, los productos amplificados fueron cortados con las enzimas Hae III y Nco I (RFLP) y los patrones de bandas analizados. Se detectó en un primer paso la presencia de parásitos del subgénero Viannia en 7 aislados de humanos y correspondientes al subgénero Leishmania en 5 aislados de humanos y 40 de caninos. La RFLP según los patrones de bandas permitió identificar a L. braziliensis en aislados de leishmaniosis tegumentaria y L. chagasi en los casos de leishmaniosis visceral. Es importante resaltar que este trabajo es el primero en el país en realizar la caracterización molecular a nivel de especies de Leishmania y los hallazgos descritos tienen una implicación a nivel epidemiológico, contribuyendo con las estrategias de vigilancia y control de la enfermedad. Adicionalmente, se sugiere el uso de otros marcadores genéticos para identificar genotipos o perfiles genéticos diferentes, entre cepas de estas especies
Subject(s)
Parasitic Diseases , LeishmaniaABSTRACT
La inmunofluorescencia indirecta con antígeno crudo de Leishmania constituye una técnicaserológica convencional que para el diagnóstico de leishmaniosis presenta una sensibilidadmoderada, entre el 70 y el 80%. Son muy raros los trabajos que en la literatura reportan su usopara el seguimiento serológico post-tratamiento de los pacientes, aunque la experiencia que engeneral se tiene en áreas endémicas consiste en que la mayoría de los casos clínicamente curadospresentan una disminución importante de los títulos serológicos con el avance del tiempo. Estetrabajo tiene por objetivo describir el cuadro clínico y los valores de la reacción serológica enpacientes con leishmaniosis cutánea antes y después de su tratamiento. Para este trabajo ha sidoestudiado el comportamiento clínico y serológico de un grupo de 32 pacientes con leishmaniosiscutánea, en un brote de la enfermedad producido en 1998 en el distrito de Capiibary,Departamento de San Pedro. De los pacientes evaluados hasta 18 o 24 meses post-tratamientotodos excepto uno manifestaron curación de sus lesiones. La gran mayoría de los sujetos hanmostrado disminución de los títulos serológicos, hasta la negativización. Se concluye que elseguimiento serológico arroja valores que coinciden con la clínica de los pacientes, por lo tantoamerita que sea llevado a cabo complementariamente con la inspección clínica. Al no contar en esteestudio con casos de reactivación cutánea o mucosa, no se puede concluir acerca del valorpredictivo de la serología para estos casos
Subject(s)
Leishmania , Leishmaniasis, Cutaneous , Fluorescent Antibody Technique, IndirectABSTRACT
La leishmaniasis tegumentaria es una zoonosis endémica de zonas tropicales y subtropicales del mundo, de difícil diagnóstico laboratorial. En áreas endémicas se realiza el diagnóstico de presunción basado en la presentación clínica y la reactividad a la prueba cutánea de la leishmanina. Sin embargo, un diagnóstico definitivo de la enfermedad requiere la combinación de diferentes métodos, entre los cuales la inmunofluorescencia indirecta (IFI) es uno de los más utilizados. Para determinar la sensibilidad de la IFI, se sometió un total de 95 pacientes con lesiones comprobadas de leishmaniasis a las pruebas de leishmanina, biopsia histopatológica, cultivo e IFI. En 80 pacientes se logró el diagnóstico parasitológico a través de la histopatología y/o el cultivo. De ellos, 58 muestras (72,5%) dieron reacción positiva en la IFI para Leishmania, aunque 12 de ellas (21%) también mostraron serología positiva para enfermedad de Chagas. La sensibilidad de la IFI para los casos de leishmaniasis mucosa solamente fue 81,3% (n=16). Se concluye que la IFI es un método de moderada sensibilidad para el diagnóstico de leishmaniasis tegumentaria.
Tegumentary leishmaniasis is an endemic zoonosis of tropical and subtropical areas of the world. Diagnosis of this illness is difficult even using laboratorial methods. In endemics areas a presumptive diagnosis is carried out based on the clinical presentation and reactivity to the skin test. However, a definitive diagnosis of the illness requires the combination of different methods, such as the indirect immunofluorescence assay (IIF), one of the most used methods. In order to determine the sensitivity of the IIF, a total of 95 patients with proven lesions of leishmaniasis were subjected to skin test, histopathology, culture and IIF. Parasitological diagnosis was achieved in 80 patients through histopathology and/or culture. Fiftyeight samples of them (72.5%) gave positive reaction by the IIF although 12 of them (21%) also showed positive serology for Chagas disease. The sensitivity of the IIF for mucosal leishmaniasis only was 81.3% (n=16). We concluded that IIF has moderate sensitivity for the diagnosis of tegumentary leishmaniasis.
Subject(s)
Leishmaniasis , Diagnosis , Fluorescent Antibody Technique, IndirectABSTRACT
En el año 1990, el Instituto de Investigaciones en Ciencia de la Salud y la Asociación de Bioquímicos del Paraguay, realizaron un diagnóstico de la magnitud de la confiabilidad de los resultados emitidos por los laboratorios en Química Clínica, a través de una evaluación serológica, de precisión en el 37 por ciento (60/163) de los laboratorios registrados en la Asociación de Bioquímicos, el Ministerio de Salud Pública y firmas comerciales de ventas de reactivos; de exactitud en el 24 por ciento (39/163) de los laboratorios registrados, y un cuestionario sobre los factores que influyen en los resultados emitidos por los laboratorios. Los que remitieron sus resultados, en cuanto a su ubicación geográfica, 40//fueron de la capital del país (44/110) y del interior del país 30 por ciento (16/53). En cuanto a dependencia administrativa, 49 por ciento (17/35) fueron laboratorios públicos y 34 por ciento (43/128) privados. No se dispone de mayor información que permita caracterizar a los laboratorios que no remitieron sus resultados, debido al caracter anónimo de la encuesta. En cuanto a la evaluación de precisión, los coeficientes de variación se encontraban alejados de los publicados internacionalmente en un porcentaje que oscila entre el 38 y 84 por ciento, en todos los analitos estudiados. Y el 4l por ciento de los laboratorios tuvieron rendimiento insatisfactorio, utilizando el criterio del Colegio de Patólogos Americanos (CAP), en la evaluación serológica de exactitud. Este estudio revela la situación de la exactitud y precisión de los resultados emitidos en bioquímica clínica de los laboratorios que respondieron nuestra encuentra, que si bien no son representativos de la población total de los laboratorios existentes en el país, representa a aquellos que tuvieron mayor interés en participar. Por lo tanto, se ve la necesidad urgente de implementar Programas Educativos en Control de Calidad en los laboratorios de nuestro país