Standardisation of Western blotting to detect HTLV-1 antibodies synthesised in the central nervous system of HAM/TSP patients

Intrathecal synthesis of human T-lymphotropic virus type 1 (HTLV-1) antibodies (Abs) represents conclusive evidence of a specific immune response in the central nervous system of HTLV-1 associated myelopathy/tropical spastic paraparesis (HAM/TSP) patients. Western blotting (WB) for HTLV Abs in serum is a confirmatory test for HTLV-1 infection. The aim of this study was to standardise the Western blot to demonstrate the intrathecal pattern of Abs against HTLV-1 proteins in HAM/TSP patients. Paired cerebrospinal fluid (CSF) and serum samples were selected from 20 patients with definite HAM/TSP, 19 HTLV-1 seronegative patients and two HTLV-1 patients without definite HAM/TSP. The presence of reactive bands of greater intensity in the CSF compared to serum (or bands in only the CSF) indicated the intrathecal synthesis of anti-HTLV-1 Abs. All definite HAM/TSP patients presented with an intrathecal synthesis of anti-HTLV-1 Abs; these Abs were not detected in the control patients. The most frequent intrathecal targets of anti-HTLV-1 Abs were GD21, rgp46-I and p24 and, to a lesser extent, p19, p26, p28, p32, p36, p53 gp21 and gp46. The intrathecal immune response against env (GD21 and rgp46-I) and gag (p24) proteins represents the most important humoral pattern in HAM/TSP. This response may be used as a diagnostic marker, considering the frequent association of intrathecal anti-HTLV-1 Ab synthesis with HAM/TSP and the pathogenesis of this neurological disease.

Evaluation of rapid tests for human immunodeficiency virus as a tool to detect recent seroconversion

The identification of recent HIV infection is important for epidemiological studies and to monitor the epidemic. The objective of this study was to evaluate two rapid tests that are easily available to the Brazilian scientific community for using as markers of recent HIV infection. The Rapid Test - HIV-1/2 Bio-Manguinhos (Bio-Manguinhos/Fiocruz, Brazil) and the Rapid Check HIV 1&2 (NDI-UFES, Center for Infectious Diseases, Universidade Federal do Espírito Santo) were tested, using 489 samples with HIV positive serology, from blood donors, previously classified as recent or long-term infection by serological testing algorithm for recent HIV seroconversion (STARHS) or LS-HIV Vitros assay methods. The samples were diluted prior to testing (1:50 and 1:100 for the Rapid Test - HIV-1/2 Bio-Manguinhos, and 1:500 and 1:600 for the Rapid Check HIV 1&2). Negative samples were considered recent infection, whereas those showing any color intensity were associated with long-term infection. The best dilutions were 1:100 for HIV-1/2 Bio-Manguinhos test (Kappa = 0.840; overall agreement = 0.93), and 1:500 for the Rapid Check HIV 1&2 (Kappa = 0.867; overall agreement = 0.94). The results suggest that both rapid tests can be used to detect recent seroconversion.

Triagem neonatal para hemoglobinopatias no Rio de Janeiro, Brasil / Neonatal screening for hemoglobinopathies in Rio de Janeiro, Brazil

OBJETIVO: Descrever os principais resultados do programa de triagem neonatal para a doença falciforme do Estado do Rio de Janeiro em 15 meses de funcionamento (agosto de 2000 a novembro de 2001). MÉTODOS: A partir de agosto de 2000, amostras de sangue passaram a ser coletadas de todos os recém-nascidos atendidos em postos de atençäo básica à saúde no Estado para triagem neonatal da doença falciforme. Essas amostras säo submetidas a cromatografia líquida de alta resoluçäo. Se o cromatograma resultante for compatível com a doença falciforme, a criança e seus pais säo encaminhados para confirmaçäo diagnóstica e tratamento. RESULTADOS: De agosto de 2000 a novembro de 2001, 99 260 recém nascidos participaram da triagem. Houve um caso de homozigose para Hb C. Um em cada 27 recém-nascidos triados pelo programa apresentou o traço falciforme (Hb AS). A doença falciforme foi constatada em 83 casos (um caso novo para cada 1 196 nascimentos): 62 Hb S, 18 Hb SC, 3 Hb SD. Uma criança näo compareceu para confirmaçäo diagnóstica. As 82 crianças acompanhadas apresentaram 15 intercorrências (infecçöes de vias aéreas superiores, febre, seqüestro esplênico, síndrome mäo-pé e crises de vaso-oclusäo), motivando sete internaçöes. Houve necessidade de transfusäo sangüínea em 15 crianças, mas nenhuma tornou-se alo-imunizada. Os demais bebês estäo evoluindo satisfatoriamente com o uso de penicilina profilática. CONCLUSÖES: Nossos dados evidenciam a importância do diagnóstico precoce da doença falciforme, de forma a prevenir e evitar as freqüentes complicaçöes infecciosas enfrentadas por esses pacientes

HTLV-I/HTLV-II / HTLV-I/HTLV-II

O presente volume é uma atualizaçäo sobre os vírus linfotrópicos humanos I e II (HTLV-I/II) e aborda aspectos da biologia, epidemiologia, diagnóstico e aconselhamento de doadores positivos.

Estudos sorologicos anti HTLV-I em hemopatias: experiencia no Rio de Janeiro / Seroepidemiological studies in hematological disorders HTLV-I: an experience in Rio de Janeiro

Estudos sorologicos realizados em diversos estados brasileiros, ja demonstraram que, entre individuos politransfundidos e/ou com promiscuidade sexual, existe uma alta prevalencia de anticorpos anti-HTLV-I .A infecçao por HTLV-I e seu papel na patogenese de doenças como leucemias de celulas T perifericas ( LLTA), e paraparesia espastica tropical (TST), tem sido exaustivamente estudados no Japao e EUA. Nos analisamos 402 casos de pacientes portadores de hemopatias e/ou doenças correlatas, enviados para diagnosticos e tratamento no IEHASC e no INCa. Atraves de metodologia multidisciplinar, que inclui tecnicas sorologicas como aglutinaçao de particulas (AP), testes imunoenzimaticos (ELISA), e utilizando tambem peptideo sintetico (LIA), alem de Imunofluorescencia indireta (IFi), nos estabelecemos a soroprevalencia de anticorpos anti-HTLV-I em portadores de linfomas ( n=88), leucemias agudas (n=110), leucemias cronicas T e B (n=81), doença de Hodgkin (n=18), linfomas de celulas T cutaneos (n=52) e outras patologias (n=31). A faixa etaria variou de 2-80 anos (mediana = 43); com leve predominio do sexo masculino (1,3: 1,0) e com variaçoes de raças brancas, mestiças e negras (7:2:1). Nossos resultados globais monstraram uma soroprevalencia de 12,1%, com 49 individuos HTLV-I+. Quando avaliamos os grupos de patologia as doenças linfoproliferativas demonstraram um alto indice de positividade, com soroprevalencia de 16% entre 243 casos estudados. Nos concluimos que e necessario estabelecer uma abordagem sorologica de rotina no diagnostico das leucemias e linfomas com o objetivo de aprimorar estudos epidemiologicos da verdadeira incidencia de retrovirus no Brasil.