Resistencia a penicilina G y oxacilina, de cepas de Staphylococcus aureus aisladas de mastitis bovina subclínica / Penicillin G and oxacillin resistance in Staphylococcus aureus strains isolated from bovine subclinical mastitis

Sixty-eigth out of 530 different S. aureus field strains isolated from subclinical cases of bovine mastitis from Germany (n = 26), Indonesia (n = 16), Mexico (n = 16) and Brazil (n = 10), respectively, were selected to be studied in the present work. The strains were tested phenotypically as well as genotypically for the presence of penicillin G- and oxacillin-resistance. For the primary phenotypical species identification of the 530 S. aureus strains, plasmacoagulase-test and Api 32 Staph system was applied. This was confirmed by molecular detection of the S. aureus specific genes encoding 23 S rRNA, thermostable nuclease (nuc), clumping factor (clfA), coagulase (coa) and protein A region Xr (spa). The selection of the 68 strains was carried out by the random selection of one strain per herd; additionally, only strains with different macrorestriction profiles were included here. Genotypic resistance to semisynthetic penicillins (methicillin/oxacillin) and penicillin G was studied through the identification of mecA- and blaZ-genes, respectively. The mecA gene was detected in only one S. aureus isolate from Brazil, which was not phenotypically resistant against methcillin, as shown by the use of standard disc diffusion method, BBL-Chromoagar and MIC-determination by Vitek II. In contrast penicillin-resistance of strains based on the presence of the blaZ-gene could be observed in 50 (73.5%) of the investigated strains. However, only 40 (58.8%) of these 50 blaZ-positive strains were phenotypically penicillin-resistant. According to the presented data, resistance to semisynthetic penicillins in S. aureus field strains seems to be not a major problem in dairy herds of the investigated countries despite the long-term use of these antibiotics in the field.

De 530 diferentes cepas de S. aureus aisladas de casos de mastitis subclínica bovina, se seleccionaron 68 cepas de S. aureus procedentes de Alemania (n = 26), Indonesia (n = 16), México (n = 16) y Brasil (n = 10), para estudiarlas en la presente investigación. Las cepas fueron analizadas fenotípica y genotípicamente para observar su resistencia a penicilina G y oxacilina. Para una identificación inicial se utilizó el sistema Api 32 Staph y la prueba de coagulasa. El resultado se confirmó por la detección molecular de los genes específicos de S. aureus 23S rRNA, nucleasa termoestable (nuc), factor aglutinante (clfA), coagulasa (coa) y la proteína A (spa) región Xr. La selección primaria de las cepas sospechosas se hizo al azar, seleccionando una cepa por hato; además sólo se incluyeron en el estudio cepas con diferentes perfiles de macrorrestricción. La resistencia genotípica a meticilina y penicilina se estudió mediante la identificación de los genes mecA y blaZ, respectivamente. El gen mecA fue detectado sólo en un aislamiento de S. aureus de Brasil y no fue resistente fenotípicamente a la meticilina, lo cual se demostró mediante los métodos de difusión estándar en discos, el uso del Chromoagar-BBL y la determinación de la concentración mínima inhibitoria (MIC, por sus siglas en inglés) por Vitek II. La detección genotípica de la resistencia de las cepas a la penicilina se basó en la detección del gen blaZ; y se observó en 50 cepas investigadas (73.5%). Sin embargo, sólo 40 cepas (58.8%) fueron fenotípicamente resistentes a la penicilina. Los resultados obtenidos muestran que la resistencia de las cepas aisladas de campo S. aureus a las penicilinas semisintéticas, actualmente no es un problema importante en las vacas lecheras, a pesar del uso extensivo de esas sustancias antibióticas en el campo en los países investigados.

Composición químico-nutricional y de factores antinutricionales en semillas de parota (enterolobium cyclocarpum) / Nutritional-chemical composition and antinutritional factors in seeds of Enterolobium cyclocarpum / Composição químico-nutricional e de fatores antinutricionais em sementes de guanacaste (enterolobium cyclocarpum)

Mediante el análisis químico proximal se determinaron proteínas (PC), grasas (GC), fibras (FC), cenizas, humedad y extracto libre de nitrógeno (ELN) de las semillas de Enterolobium cyclocarpum, y con espectrofotometría se determinaron sus factores antinutricionales. Por el contenido de minerales, carbohidratos y proteínas que posee esta leguminosa, tiene potencial industrial, medicinal y químico, siendo una limitante la presencia de factores antinutricionales tales como glucósidos cianogénicos e inhibidores de tripsina. Mediante hidrólisis enzimática (ß-glucosidasa) se analizó la inhibición de tripsina de un extracto acuoso (NaOH 0,1N) de la muestra y en una solución estándar de tripsina se midió la actividad proteolítica en un sustrato sintético (benzoil-arginina-p-nitroanilida). En las semillas completas se encontró PC 26,13%, GC 2,85%, FC 4,95%, cenizas 2,95% y ELN 63,1%. En las almendras desecadas los valores fueron PC 34,5%, GC 7,6%, ausencia de FC, cenizas 3,3% y ELN 54,6%. Se encontraron 4,82 unidades de inhibidores de tripsina/mg, ausencia de hemaglutininas y 0,76mg de ácido cianhídrico en 100g de semillas. Estos valores correspondientes a los factores antinutricionales descritos no constituyen un riesgo al consumir las semillas, ya que son termolábiles y se eliminan por cocción en agua.

Chemical analyses were performed to quantify the protein (CP), fat (CF), fiber (CF), ash, humidity, nitrogen free extract (NFE) and antinutritional factors in extracts from Enterolobium cyclocarpum seeds. E. cyclocarpum seeds have a great potential in pharmaceutical and chemical industries due to the high content of minerals, carbohydrates and proteins. However, the seeds also contain cyanogenic glycosides such as trypsin inhibitory factor and cyanhidric acid, resulting in antinutritional effects. Trough enzymatic hydrolysis (ß-glycosidase), trypsine inhibition on an aqueous extract of the sample (0.1 N NaOH). By using a standard trypsine solution, the proteolytic activity in a synthetic substrate (benzoyl-arginine-p-nitroanilide) was studied. Analyses of the complete seeds showed; CP 26.13%, CF 2.85%, CF 4.95%, Ash 2.95%, and NFE 63.1%. The dried almonds contained CP 34.5%, CF 7.6%, undetectable fiber, ash 3.3%, and NFE 54.6%. No hemaglutinins were detected, whereas 4.82 units/mg of trypsine inhibition and 0.76 mg/100g of HCN were found. The low concentrations of trypsine inhibitor and HCN will be reduced even more by the heat treatment previous consumption, which makes the seeds suitable for human beings or animals.

Mediante a análise química proximal se determinaram proteínas (PC), gorduras (GC), fibras (FC), cinzas, umidade e extrato livre de nitrogênio (ELN) das sementes de Enterolobium cyclocarpum, e com espectrofotometria se determinaram seus fatores antinutricionais. Pelo conteúdo de minerais, carboidratos e proteínas que possui, esta leguminosa têm potencial industrial, medicinal e químico, sendo uma limitante a presença de fatores antinutricionais tais como glicosídeos cianogênicos e inibidores de tripsina. Mediante hidrólise enzimática (ß-glucosidase) se analisou a inibição de tripsina de um extrato aquoso (NaOH 0,1N) da amostra e em uma solução padrão de tripsina se mediu a atividade proteolítica em um substrato sintético (benzoil-arginina-p-nitroanilida). Nas sementes completas se encontrou PC 26,13%, GC 2,85%, FC 4,95%, cinzas 2,95% e ELN 63,1%. Nas amêndoas dissecadas os valores foram PC 34,5%, GC 7,6%, ausência de FC, cinzas 3,3% e ELN 54.6%. Encontraram-se 4,82 unidades de inibidores de tripsina/mg, ausência de hemaglutininas e 0,76mg de ácido cianídrico em 100g de sementes. Estes valores correspondentes aos fatores antinutricionais descritos não constituem um risco ao consumir as sementes, já que são termolábeis e se eliminam por cozimento em água.

Cicatrización de úlceras venosas con difenilhidantoinato de sodio / Cicatrization of venous ulcers with dyphenilhydantoin sodium

Introducción. Las úlceras venosas de extremidades inferiores muestran una incidencia de 2.5 millones de casos anuales en los Estados Unidos y una prevalencia de 22 por cada 100 personas. Además son recurrentes, incapacitantes y repercuten en forma severa para la deambulacion. Un medicamento utilizado en casos de epilepsia, el Difenilhidantoinato de sodio (DFH-Na), puede favorecer la cicatrización de las úlceras venosas.Material y métodos. Seleccionamos 20 pacientes que presentaron ulceración de la pierna con diagnostico de secuela postflebitica, a 10 de esos pacientes se les aplico diariamente DFH-Na, por vía tópica y por espacio de 2 a 3 meses en las úlceras, previo aseo con agua y jabón. Los diez pacientes restantes correspondieron al grupo testigo que recibió tratamiento convencional (agua y jabón. Se evaluaron parámetros generales en los 20 pacientes (sexo, edad, ocupación, antecedentes sobre anticonceptivos, patologías asociadas, tiempo de aparición de la úlcera, recidivas), así como tomas de biopsias, fotografías y mediciones planimétricas al inicio y final del tratamiento.Resultados. Al final del tratamiento observamos que el 40 por ciento de los pacientes respondió al DFH-Na como inductor de la cicatrización y ninguno al tratamiento ordinario. En el primer grupo se desarrolló tejido de granulación y desplazamiento epitelial hacia las soluciones de continuidad de la piel.Conclusiones. La aplicación tópica del DFH-Na, como recurso farmacológico para la cicatrización de úlceras venosas resulta favorecedor por disminuir el tiempo de curación y disminución en el costo del tratamiento.

Efectos de la enterotoxina de Campylobacter jejuni en intestino delgado, mediante la perfusión de la toxina en yeyuno de ratas adultas / Effect of the Campylobacter jejuni enterotoxin by perfusion al jejunum level in adult rats

Se analizó el mecanismo de acción de la enterotoxina de Campylobacter jejuni en ratas adultas por medio de la técnica de perfusión de la enterotoxina en yeyuno, mediante dos métodos: el estudio de los cambios en los valores de Na, C1, glucosa y osmolaridad y el estudio histopatológico de los tejidos perfundidos. También se realizó la prueba de asa intestinal ligada, para conocer las alteraciones producidas en el intestino por efecto de la enterotoxina. Se utilizaron cuatro cepas de C. jejuni en el estudio; también se incluyó una cepa patogéna de Escherichia coli, productora de enterotoxina (LT). Los cortes histológicos mostraron lesiones en yeyuno causadas por la toxina de C. jejuni y de E. coli, como necrosis de las vellosidades con pérdida de su arquitectura e infiltración de células mononucleares y degeneración mucosa, que caraterizan a una enteritis moderada. Una cepa C. jejuni no toxigénica no causó alteraciones o lesiones compatibles con enteritis. Respecto a los valores de sodio, cloro, glucosa u osmolaridad, existió un leve incremento, producido por efecto de la toxima perfundida; esto fue más nototio en el grupo de E. coli. Sin embargo, los resultados no fueron estadísticamente significativos. En la prueba de asa ligada se observó un efecto positivo (acumulación de líquidos en el asa intestinal) con tres cepas de C. jejuni y la de E. coli; hubo mayor acumulación de líquidos en esta última y fue negativa con una cepa de C. jejuni. Se comprobó que comparativamente la enterotoxina de E. coli causa mayor daño en los tejidos de yeyuno, y en el equilibrio electrolítico de ratas adultas; en cambio, por la ubicación celular de la toxina de C. jejuni, ésta provocó un daño menor de las vellosidades intestinales y en el equilibrio de electrólitos y glucosa.