Prevalence of chimerism after non-myeloablative hematopoietic stem cell transplantation / Prevalência do quimerismo após transplante de células hematopoiéticas não-mieloablativo

Context and objective: Non-myeloablative hematopoietic stem cell transplantation (NMA-HSCT) is performed in onco-hematological patients who cannot tolerate ablative conditioning because of older age or comorbidities. This approach does not completely eliminate host cells and initially results in mixed chimerism. Long-term persistence of mixed chimerism results in graft rejection and relapse. Involvement of graft-versus-host disease is concomitant with complete chimerism and graft-versus-tumor effect. The aim of this study was to evaluate the prevalence of chimerism in onco-hematological patients who underwent NMA-HSCT. Desingn and setting: Observational clinical study on chimerism status after human leukocyte antigen-identical NMA-HSCT at the Discipline of Hematology and Hemotherapy of Universidade Federal de São Paulo. Methods: We sequentially analyzed the amplification of APO-B, D1S80, DxS52, FVW, 33.6, YNZ-2 and H-ras primers using variable number of tandem repeats (VNTR) on 17 pairs and fluorescent in situ hybridization (FISH) with the XY probe and SRY primer on 13 sex-unmatched pairs. RESULTS: The informativeness of the primers using VNTR was 60 percent for APO-B, 75 percent D1S80, 36 percent DxS52, 14 percent FVW, 40 percent YNZ-22 and 16 percent H-ras. The SRY primer was informative in female receptors with male donors. The XY-FISH method was informative in 100 percent of the sex-unmatched pairs. Conclusion: These methods were sensitive and informative. In VNTR, the association of APO-B with D1S80 showed 88 percent informativeness. The quantitative FISH method was more sensitive, but had the disadvantage of only being used for sex-unmatched pairs.

Contexto e objetivo: O transplante de células hematopoiéticas não-mieloablativo é realizado em pacientes com doenças onco-hematológicas que não suportam condicionamentos ablativos devido à elevada idade ou ao acometimento por comorbidades. Esta abordagem não elimina completamente as células do hospedeiro, resultando, inicialmente, em quimerismo misto. A persistência do quimerismo misto na evolução de longo prazo resulta na rejeição ao enxerto e recaída. O acometimento pela doença do enxerto contra hospedeiro é concomitante ao quimerismo completo e ao efeito enxerto versus tumor. O objetivo deste estudo foi avaliar a prevalência do quimerismo em doenças onco-hematológicas tratadas com o transplante não-mieloablativo de células hematopoiéticas. Tipo de estudo e local: Estudo clínico observacional do estado de quimerismo após transplante antígenos leucocitários humanos-idêntico não-mieloabaltivo realizado na Disciplina de Hematologia e Hemoterapia da Universidade Federal de São Paulo. Métodos: Analisamos sequencialmente a amplificação dos primers APO-B, D1S80, DxS52, FVW, 33,6, YNZ-22, H-ras pelo VNTR (variable number of tandem repeats) em 17 pares e FISH (fluorescent in situ hybridization) pela sonda XY e do primer SRY em 13 pares de não relacionados a sexo. Resultado: A informatividade dos primers pelo VNTR foi de 60 por cento para APO-B; 75 por cento D1S80; 36 por cento DxS52; 14 por cento FVW; 40 por cento YNZ-22 e 16 por cento H-ras. O primer SRY foi informativo em receptores femininos com doadores masculinos. O método XY-FISH foi informativo em 100 por cento dos pares de não relacionado a sexo. Conclusão: Estes métodos foram sensíveis e informativos. No VNTR, a associação do APO-B com D1S80 mostrou 88 por cento de informatividade. O FISH, método quantitativo, foi mais sensível, porém com desvantagem de ser usado somente nos pares não relacionados a sexo.

Uso da análise de Fish para diagnóstico em 11 pacientes com síndrome de Williams-Beuren / Use of Fish analysis to diagnosis approach of 11 Brazilian patients with Williams-Beuren syndrome

A síndrome de Williams-Beuren (SWB) é uma rara síndrome de deleçäo de genes contíguos que feta múltiplos sistemas. A doença é causada por uma deleçäo submicroscópica na regiäo 7q11.23, que é detectada pela análise de Fish em 90-95 por cento dos pacientes. Relatamos o estudo clínico e a análise citogenética por Fish realizados em 11 pacientes (6M:5F), todos esporádicos. Fácies típicos de "duende", atraso de desenvolvimento/retardo mental, anomalias dentárias e esqueléticas estavam presentes em todos os pacientes; anomalias oculares em dez (91 por cento); cardiopatias congênitas em oito (73 por cento), sendo metade, estenose supravalvar aórtica; baixa estatura em seis (54 por cento); hipercalcemia transitória em quatro (36 por cento); hérnia inguinal em três (27 por cento) e anomalias renais em dois (18 por cento). Analisanmos a hemizigosidade do gene da elastina por Fish, utilizando a sonda LSI Williams Syndrome Region DNA Fish (Vysis) nas células interfásicas e metafásicas. O paciente sem deleçäo apreentava fácies e comportamento tópico, exceto cardiopatia. A análise pelo Fish do locus da elastina é um teste útil para confirmaçäo diagnóstica da SWB, o que auxilia no seguimento clínico adequado e na prevençäo das complicaçöes

Hemorrhagic and thrombotic complications in patients with myeloproliferative diseases

Objective: To correlate the incidence of hemorrhage and thrombosis to bleeding time (BT) and platelet aggregation in 27 consecutive patients with myeloproliferative diseases (MPD). Design: Retrospective study. Setting: Public tertiary referral center. Patients: Eighteen patients with chronic myelogenous leukemia (CML), 5 with polycytemia vera (PV), 2 with essential thrombocytemia (ET) and 2 with idiopathic myelofibrosis (MF). Duke's BT and epinephrine-induced platelet aggregation were performed on the patients and on 10 healthy individuals. Results: Eleven patients presented symptoms (41 percent): 9 with hemorrhage (33 percent) and 5 with thrombosis (19 percent). There were less symptomatic patients in the CML group (28 percent) than in the other MPD (67 percent), without statistical significance (Fisher, p=0.06). Duke's BT was longer in symptomatic patients (Mann-Whitney, p<0.05). Platelet aggregation was abnormal in 7 patients (26 percent) and 71 percent of them were symptomatic (Fisher, p=0.07) Conclusions: The high incidence of bleeding and thrombosis in patients with MPD was related to prolonged BT, but not to platelet aggregation abnormalities.