In situ cellular immune response in non-ulcerated skin lesions due to Leishmania (L) infantum chagasi infection

Skin lesions of patients affected by non-ulcerated cutaneous leishmaniasis (NUCL) caused by L. (L.) infantum chagasi are characterized by lymphohistiocytic inflammatory infiltrate associated with epithelioid granuloma and scarce parasitism. However, the in situ cellular immune response of these patients is unclear. Therefore, the aim of the present study was to characterize the cellular immune response in the skin lesions of patients affected by NUCL. Methods Twenty biopsies were processed by immunohistochemistry using primary antibodies to T lymphocytes (CD4, CD8), NK cells, B lymphocytes, macrophages, nitric oxide synthase and interferon-gamma. Results Immunohistochemistry revealed higher expression of all cellular types and molecules (IFN-γ, iNOS) in the dermis of diseased skin compared to the skin of healthy individuals (p < 0.05). Morphometric analysis performed in the skin lesions sections showed the predominance of CD8+ T lymphocytes in the mononuclear infiltrate, followed by macrophages, mostly iNOS+, a response that could be mediated by IFN-γ. Conclusion Our study improves knowledge of the cellular immune response in non-ulcerated or atypical cutaneous leishmaniasis caused by L. (L.) infantum chagasi in Central America and pointed to the pivotal participation of CD8+ T lymphocytes in the host defense mechanisms against the parasite in patients with NUCL.(AU)

Severe visceral leishmaniasis in children: the relationship between cytokine patterns and clinical features

Introduction The relationship between severe clinical manifestations of visceral leishmaniasis (VL) and immune response profiles has not yet been clarified, despite numerous studies on the subject. This study aimed to investigate the relationship between cytokine profiles and the presence of immunological markers associated with clinical manifestations and, particularly, signs of severity, as defined in a protocol drafted by the Ministry of Health (Brazil). Methods We conducted a prospective, descriptive study between May 2008 and December 2009. This study was based on an assessment of all pediatric patients with VL who were observed in a reference hospital in Maranhão. Results Among 27 children, 55.5% presented with more than one sign of severity or warning sign. Patients without signs of severity or warning signs and patients with only one warning sign had the highest interferon-gamma (IFN-γ) levels, although their interleukin 10 (IL-10) levels were also elevated. In contrast, patients with the features of severe disease had the lowest IFN-γ levels. Three patients who presented with more than two signs of severe disease died; these patients had undetectable interleukin 2 (IL-2) and IFN-γ levels and low IL-10 levels, which varied between 0 and 36.8pg/mL. Conclusions Our results showed that disease severity was associated with low IFN-γ levels and elevated IL-10 levels. However, further studies with larger samples are needed to better characterize the relationship between disease severity and cytokine levels, with the aim of identifying immunological markers of active-disease severity. .

Molecular markess of mucosa harboring gastric adenoass

Context Gastric adenoma is a precursor lesion of the adenocarcinoma. Objective To characterize gastric adenomas according to the mucin immunoexpression and to evaluate the immunoexpression of p53, p16ink4a, BCL-2, cyclin D, Ki-67, in the adenoma and in the gastric mucosa harboring adenoma. Methods Forty gastric specimens from 20 patients were classified as intestinal (MUC2 - goblet cell mucin) or foveolar (MUC5AC - gastric-foveolar mucin) adenomas. Immunohistochemistry was performed using streptavidin-biotin-complex method. Results Twelve (60%) patients were men. The mean age was 67.9 ± 12.9 years-old. Intestinal adenomas were detected in 13 (65%) patients and gastric type in 7 (35%). Low-grade dysplasia was present in 13 (65%) of the adenomas, high-grade in 3 (15%), and adenocarcinoma within the polyp in 4 (20%). Six (30%) patients had synchronous adenocarcinoma. p53 immunoexpression was observed in 6/20 (30%) of adenomas, and in 2/6 (33.3%) of synchronous tumors. There was an association between p53 immunoexpression and intestinal type of adenoma/tumor, P = 0.04. There was no association between p16ink4a, Bcl-2, cyclin D and Ki-67 and adenoma clinicopathological characteristics. Conclusion Immunohistochemistry may be useful to classify the adenomas subtypes and may define the pathway of adenoma to carcinoma sequence. .

Contexto Adenoma gástrico é uma lesão precursora do adenocarcinoma. Objetivo Melhor caracterizar os adenomas de acordo com a imunoexpressão de mucinas e avaliar a imunoexpressão de p53, p16ink4a, BCL-2, cyclin D, Ki-67, nos adenomas e na mucosa gástrica adjacente. Métodos Quarenta espécimes gástricos provenientes de 20 pacientes portadores de adenomas foram classificados como do tipo intestinal (MUC2 – mucina presente nas células caliciformes) ou gástrico (MUC5AC – mucinas de padrão foveolar). Realizou-se imunoistoquímica para p53, p16ink4a, BCL-2, cyclin D e Ki-67 pelo método do complexo da estreptavidina-biotina. Resultados Doze (60%) pacientes eram homens e a média de idade foi de 67,9 ± 12,9 anos. Os adenomas foram classificados como do tipo intestinal em 13 (65%) pacientes e do tipo gástrico em 7 (35%). Displasia (neoplasia intraepitelial) de baixo grau estava presente em 13 (65%), displasia de alto grau em 3 (15%), e adenocarcinoma no pólipo adenomatoso em 4 (20%) pacientes. Observou-se immunoexpressão do p53 em 6/20 (30%) adenomas, e em 2/6 (33,3%) dos tumores sincrônicos. Houve associação entre imunoexpressão do p53 e adenoma/tumor tipo intestinal, P = 0.04. Não houve associação entre imunoexpressão do p16ink4a, Bcl-2, ciclina D e Ki-67 e as características clinicopatológicas dos adenomas. Conclusão Imunoistoquímica pode ser utilizada para caracterizar os subtipos de adenoma e talvez indicar o caminho de carcinogênese. .

Susceptibility of peritoneal macrophage from different species of neotropical primates to Ex vivo Leishmania (L.) infantum chagasi-infection / Susceptibilidade do macrófago peritoneal de diferentes espécies de primatas neotropicais para a infecção ex vivo por Leishmania (L.) infantum chagasi

This study examined the susceptibility of peritoneal macrophage (PM) from the Neotropical primates: Callithrix jacchus, Callithrix penicillata, Saimiri sciureus, Aotus azarae infulatus and Callimico goeldii to ex vivo Leishmania (L.) infantum chagasi-infection, the etiological agent of American visceral leishmaniasis (AVL), as a screening assay for evaluating the potential of these non-human primates as experimental models for studying AVL. The PM-susceptibility to infection was accessed by the PM-infection index (PMI) at 24, 72 h and by the mean of these rates (FPMI), as well as by the TNF-α, IL-12 (Capture ELISA) and Nitric oxide (NO) responses (Griess method). At 24h, the PMI of A. azarae infulatus (128) was higher than those of C. penicillata (83), C. goeldii (78), S. sciureus (77) and C. jacchus (55). At 72h, there was a significant PMI decrease in four monkeys: A. azarae infulatus (128/37), C. penicillata (83/38), S. sciureus (77/38) and C. jacchus (55/12), with exception of C. goeldii (78/54). The FPMI of A. azarae infulatus (82.5) and C. goeldii (66) were higher than C. jacchus (33.5), but not higher than those of C. penicillata (60.5) and S. sciureus (57.5). The TNF-a response was more regular in those four primates which decreased their PMI at 24/72 h: C. jacchus (145/122 pg/mL), C. penicillata (154/130 pg/mL), S. sciureus (164/104 pg/mL) and A. azarae infulatus (154/104 pg/mL), with exception of C. goeldii (38/83 pg/mL). The IL-12 response was mainly prominent in A. infulatus and C. goeldii which presented the highest FPMI and, the NO response was higher in C. goeldii, mainly at 72 h. These findings strongly suggest that these New World primates have developed a resistant innate immune response mechanism capable of controlling the macrophage intracellular growth of L. (L.) i. chagasi-infection, which do not encourage their use as animal model for studying AVL.

Este estudo examinou a susceptibilidade do macrófago peritoneal (PM) dos primatas neotropicais: Callithrix jacchus, Callithrix penicillata, Saimiri sciureus, Aotus azarae infulatus e Callimico goeldii para a infecção ex vivo por Leishmania (L.) infantum chagasi, o agente etiológico da leishmaniose visceral americana (LVA), como método de triagem para avaliar o potencial desses primatas como modelo de estudo da LVA. A susceptibilidade do PM para a infecção foi investigada através do índice de infecção do PM (PMI) a intervalos de 24, 72 horas e, ainda, pela média dessas taxas (FPMI), assim como, pelas respostas do TNF-α, IL-2 (ELISA de captura) e óxido nítrico (NO) (método de Griess). Às 24hs da infecção experimental, o PMI do primata A. azarae infulatus (128) foi maior que aqueles de C. penicillata (83), C. goeldii (78), S. sciureus (77) e C. jacchus (55). Às 72hs, houve uma redução significativa do PMI de quatro primatas: A. azarae infulatus (128/37), C. penicillata (83/38), S. sciureus (77/38) e C. jacchus (55/12), com exceção de C. goeldii (78/54). O FPMI dos primatas A. azarae infulatus (82.5) e C. goeldii (66) foi maior que do primata C. jacchus (33.5), porém, não foi maior que dos primatas C. penicillata (60.5) e S. sciureus (57.5). A resposta do TNF-α foi mais regular nos quatro primatas que reduziram o PMI no intervalo de 24-72hs: C. jacchus (145/122 pg/µL), C. penicillata (154/130 pg/µL), S. sciureus (164/104 pg/µL) e A. azarae infulatus (154/104 pg/µL), com exceção de C. goeldii (38/83 pg/µL). A resposta de IL-12 foi, principalmente, marcante nos primatas A. azarae infulatus e C. goeldii, os quais apresentaram as maiores taxas do FPMI, e a resposta do NO foi maior no primata C. goeldii, em especial no intervalo de 72hs. Estes achados sugerem, fortemente, que estes primatas neotropicais parecem ter desenvolvido mecanismos resistentes de resposta imune inata capaz de controlar o crescimento intracelular da infecção por L. (L.) i. chagasi no macrófago, o que não encoraja o uso destes primatas como modelo de estudo da LVA.

Susceptibility of Cebus apella monkey (Primates: Cebidae) to experimental Leishmania (L.) infantum chagasi-infection / Susceptibilidade do macaco Cebus apella (Primata: Cebidae) à infecção experimental por Leishmania (L.) infantum chagasi

In Amazonian Brazil, the Cebus apella monkey (Primates: Cebidae) has been associated with the enzootic cycle of Leishmania (V.) shawi, a dermotropic parasite causing American cutaneous leishmaniasis (ACL). It has also been successfully used as animal model for studying cutaneous leishmaniasis. In this work, there has been investigated its susceptibility to experimental Leishmania (L.) infantum chagasi-infection, the etiologic agent of American visceral leishmaniasis (AVL). There were used ten C. apella specimens, eight adult and two young, four males and six females, all born and raised in captivity. Two experimental infection protocols were performed: i) six monkeys were inoculated, intra-dermal via (ID), into the base of the tail with 2 x 10(6) promastigotes forms from the stationary phase culture medium; ii) other four monkeys were inoculated with 3 x 10(7) amastigotes forms from the visceral infection of infected hamsters by two different via: a) two by intravenous via (IV) and, b) other two by intra-peritoneal via (IP). The parameters of infection evaluation included: a) clinical: physical exam of abdomen, weigh and body temperature; b) parasitological: needle aspiration of the bone-marrow for searching of amastigotes (Giemsa-stained smears) and promastigotes forms (culture medium); c) immunological: Indirect fluorescence antibody test (IFAT) and, Delayed-type hypersensitivity (DTH). In the six monkeys ID inoculated (promastigotes forms) all parameters of infection evaluation were negative during the 12 months period of follow-up. Among the four monkeys inoculated with amastigotes forms, two IV inoculated showed the parasite in the bone-marrow from the first toward to the sixth month p.i. and following that they cleared the infection, whereas the other two IP inoculated were totally negative. These four monkeys showed specific IgG-antibody response since the third month p.i. (IP: 1/80 and IV: 1/320 IgG) toward to the 12th month (IP: 1/160 and IV: 1/5120). The DTH-conversion occurred in only one IV inoculated monkey with a strong (30 mm) skin reaction. Considering these results, we do not encourage the use of C. apella monkey as animal model for studying the AVL.

Na Amazônia Brasileira, o macaco Cebus apella (Primata: Cebidae) tem sido associado com o ciclo enzoótico da Leishmania (V.) shawi, um parasito dermotrópico causador da Leishmaniose Tegumentar Americana (LTA). Ele tem sido também empregado com sucesso como modelo experimental para estudo da leishmaniose tegumentar. Neste trabalho, foi investigada sua susceptibilidade à infecção experimental por Leishmania (L.) infantum chagasi, o agente etiológico da Leishmaniose Visceral Americana (LVA). Foram usados dez espécimes de C. apella oito adultos e dois jovens, quatro machos e seis fêmeas, todos nascidos e criados em cativeiro. Dois protocolos de infecção experimental foram feitos: i) seis macacos foram inoculados por via intradérmica (ID), na base da cauda com 2x10(6) formas promastigotas em fase estacionária de crescimento; ii) outros quatro macacos foram inoculados com 3x10(7) formas amastigotas de infecção visceral de hamsteres por duas vias diferentes: a) dois por via intravenosa (IV) e, b) outros dois pela via intraperitoneal (IP). A avaliação da infecção incluiu parâmetros: clínico: exame físico do abdômen, peso e temperatura corporal; b) parasitológico: aspirado de medula óssea por agulha para procura de amastigotas (esfregaço corado por Giemsa) e formas promastigotas (meio de cultura); c) imunológico: Reação de Imunofluorescência Indireta (RIFI) e, resposta de hipersensibilidade tardia (DTH). Nos seis macacos inoculados ID (formas promastigotas) todos os parâmetros de avaliação da infecção foram negativos durante o período de 12 meses. Entre os quatro macacos inoculados com formas amastigotas, dois inoculados IV mostraram parasitos na medula óssea do primeiro ao sexto mês p.i. e em seguida houve a resolução da infecção, no entanto os outros dois inoculados IP foram totalmente negativos. Esses quatro macacos apresentaram resposta específica de anticorpo IgG desde o terceiro mês p.i. (IP: 1/80 e IV: 1/320) até o décimo segundo mês (IP: 1/160 e IV: 1/5120). A conversão DTH ocorreu em apenas um macaco inoculado IV com uma forte reação na pele (30 mm). Considerando esses resultados, nós não recomendamos o uso do macaco C. apella como modelo animal para estudo da LVA.

Canine visceral leishmaniasis due to Leishmania (L.) infantum chagasi in Amazonian Brazil: comparison of the parasite density from the skin, lymph node and visceral tissues between symptomatic and asymptomatic, seropositive dogs / Leishmaniose visceral canina causada por Leishmania (L.) infantum chagasi na Amazônia brasileira: comparação da densidade parasitária da pele, linfonodo e vísceras entre cães soropositivos, sintomáticos e assintomáticos

Canine visceral leishmaniasis (CVL) is recognizable by characteristic signs of disease and is highly lethal. The infection, however, may be quite inapparent in some seropositive dogs, and this has raised the polemic question as to whether or not such animals can be a source of infection for Lutzomyia longipalpis, the vector of American visceral leishmaniasis (AVL). In this study we have examined 51 dogs with acute CVL from an AVL area in Pará State, northern Brazil, and compared the parasite density, amastigotes of Leishmania (L.) infantum chagasi, in the skin, lymph node and viscera of symptomatic with that of nine asymptomatic but seropositive dogs (IFAT-IgG). Post-mortem biopsy fragments of these tissues were processed by immunohistochemistry, using a polyclonal antibody against Leishmania sp. The X² and Mann Whitney tests were used to evaluate the means of infected macrophage density (p < 0.05). There was no difference (p > 0.05) in the skin (10.7/mm² x 15.5/mm²) and lymph node (6.3/mm² x 8.3/mm²), between asymptomatic and symptomatic dogs, respectively. It was higher (p < 0.05), however, in the viscera of symptomatic (5.3/mm²) than it was in asymptomatic (1.4/mm²) dogs. These results strongly suggest that asymptomatic or symptomatic L. (L.) i. chagasi-infected dogs can serve as a source of infection, principally considering the highest (p < 0.05) parasite density from skin (10.7/mm² x 15.5/mm²), the place where the vetor L. longipalpis takes its blood meal, compared with those from lymph node (6.3/mm² x 8.3/mm²) and viscera (1.4/mm²x 5.3/mm²).

A leishmaniose visceral canina (LVC) é reconhecida pelas características clínicas da doença e é altamente letal. A infecção, entretanto, pode ser totalmente assintomática em alguns cães soropositivos, o que tem levantado questão polêmica sobre a possibilidade desses animais, serem ou não uma fonte importante da infecção para o flebotomíneo, Lutzomyia longipalpis, o principal vetor da leishmaniose visceral americana (LVA). Neste estudo foram examinados 51 cães com LVC aguda, provenientes de área endêmica de LVA no Estado do Pará, Brasil, e a carga parasitária, formas amastigotas de Leishmania (L.) infantum chagasi, na pele, linfonodo poplíteo e vísceras (fígado e baço) foi comparada com a de nove cães assintomáticos soropositivos (IFAT-IgG). Fragmentos de biópsia desses tecidos obtidos post-mortem foram processados para análise através de imunohistoquímica, usando um anticorpo policlonal contra Leishmania sp. Os testes do Qui-quadrado (X²) e Mann Whitney foram usados para avaliar as médias da densidade de macrófagos infectados (p < 0,05). Os resultados mostraram que não houve diferença (p > 0,05) na densidade de macrófagos infectados da pele (10,7/mm² x 15,5/mm²) e do linfonodo (6,3/mm² x 8,3/mm²) entre cães assintomáticos e sintomáticos. Entretanto, a densidade de macrófagos infectados da víscera de cães sintomáticos (5,3/mm²) foi maior (p < 0,05) que a de cães assintomáticos (1,4/mm²). Estes resultados sugerem, fortemente, que cães naturalmente infectados por L. (L.) i. chagasi, assintomáticos ou sintomáticos, podem servir como fonte de infecção, principalmente, considerando-se que a densidade de macrófagos infectados da pele (10,7/mm² x 15,5/mm²), local onde o flebotomíneo vetor Lu. longipalpis realiza a hematofagia, foi maior (p < 0,05) que as do linfonodo (6,3/mm² x 8.3/mm²) e vísceras (1,4/mm²x 5,3/mm²).

Evaluation of Helicobacter pylory colonization by serologic test (IgG) and dyspepsia in volunteers from the countryside of Monte Negro, in the Brazilian western Amazon region / Avaliação da colonização por Helicobacter pylori através de teste sorológico (IgG) e de dispepsia em voluntários da população rural de Monte Negro (RO), região da Amazônia ocidental

The present study intended to analyze the seroprevalence of Helicobacter pylori, IgG, and its relation to dyspepsia in a population from the western Amazon region. During the "Projeto Bandeira Científica", a University of São Paulo Medical School program, in Monte Negro's rural areas, state of Rondônia, 266 blood samples were collected from volunteers. The material was tested for IgG antibodies anti-Helicobacter pylori by ELISA method and the participants were also interviewed on dyspepsia, hygiene and social aspects. Participants aged between five and 81 years old (34 years on average), 149 (56 percent) were female and 117 (44 percent) male. We found 210 (78.9 percent) positive, 50 (18.8 percent) negative and six (2.3 percent) undetermined samples. Dyspeptic complaints were found in 226 cases (85.2 percent). There was no statistical association between dyspepsia and positive serology for H. pylori. We concluded that the seroprevalence in all age categories is similar to results found in other studies conducted in developing countries, including those from Brazil. On the other hand, the seroprevalence found in Monte Negro was higher than that reported in developed countries. As expected, there was a progressive increase in the positivity for H. pylori in older age groups.

Este trabalho tem por objetivo analisar a soroprevalência do Helicobacter pylori, IgG, em população rural da Amazônia, e sua correlação com queixa dispéptica. No Projeto Bandeira Científica da FMUSP, em Monte Negro - RO, foram coletadas 266 amostras sangüíneas nos assentamentos rurais do município. Foram pesquisados anticorpos da classe IgG dirigidos contra Helicobacter pylori pelo método ELISA e aplicados questionários sobre dispepsia, aspectos sociais e epidemiológicos. Os pacientes tinham idades entre cinco e 81 anos (média de 34 anos); 149 (56 por cento) do sexo feminino e 117 (44 por cento) do sexo masculino. Foram encontradas 210 (78.9 por cento) amostras positivas, 50 negativas (18.8 por cento) e seis indeterminadas (2.3 por cento). A queixa de dispepsia foi encontrada em 226 casos (85.2 por cento). Não houve associação significativa entre os sintomas dispépticos e a soro positividade para H. pylori. Concluímos que a soro prevalência para todas as faixas etárias é comparável com os resultados de outros estudos realizados em países em desenvolvimento, e maior que aquela encontrada nos países desenvolvidos. Houve aumento progressivo da positividade com a idade, como citado na literatura.

Endemic hepatitis b and c virus infection in a brazilian eastern amazon region

CONTEXT: Hepatitis B and hepatitis C infection has been an important cause of morbidity and mortality around the world. However there are few investigations regarding the prevalence and possible risk factors for these diseases in Brazil, particularly in Amazon region, where there are some endemic focus. OBJECTIVES: To determine the prevalence of hepatitis B and hepatitis C in the city of Buriticupu, MA, located in the Brazilian Eastern Amazon region, and try to explore the risk factors for these infections in that area. METHODS: Two hundred forty three subjects (46.5 percent male and 53.5 percent female) were investigated. RESULTS: The prevalence of past or current infection of hepatitis B and C virus was, respectively, 40.74 percent and 5.76 percent. Positivity for HBsAg was found in 2.88 percent of the subjects. The prevalence of current infection or chronic virus carriers found was 2.88 percent (HBsAg). There was a statistically significant relationship between the sera-prevalence of anti-HBc and the distance of the residence from the city center which may reflect an indirect association between the infection and precarious conditions of existence. Individuals with age equal or greater than 60 years were also more likely to be anti-HBc positive which could only reflect that older people have a longer history of exposure to hepatitis B infection. The prevalence of hepatitis C is higher than the worldwide estimate. CONCLUSION: Buriticupu may be considered endemic for hepatitis B and C. Hepatitis B infection could be related to precarious living conditions and old age. Hepatitis C was not associated with the variables investigated in the present investigation.

CONTEXTO: Infecção por hepatites B e C tem sido causa importante de morbimortalidade em todo o mundo. Entretanto, há poucas investigações sobre a prevalência e possíveis fatores de risco relacionados a tais doenças no Brasil, especialmente na região amazônica, onde há algumas regiões endêmicas para tais quadros clínicos. OBJETIVOS: Detectar a prevalência de hepatites B e C na cidade de Buriticupu, MA, localizada na região leste da Amazônia brasileira, e tentar investigar seus fatores de risco nessa área. MÉTODOS: Duzentos e quarenta e três indivíduos (46,5 por cento masculinos e 53,5 por cento femininos) foram investigados. RESULTADOS: A prevalência de hepatite C foi de 5,71 por cento (anti-HCV) e a de hepatite B foi de 40,74 por cento (anti-HBc). A prevalência de indivíduos com infecção atual ou com infecção crônica foi de 2,80 por cento (HBsAg). Houve relação estatisticamente significante entre anti-HBc e a distância da residência dos indivíduos do centro da cidade, o que pode refletir uma associação indireta entre tal quadro infeccioso e condições precárias de existência. Indivíduos com idade igual ou maior a 60 anos também apresentaram maior chance de apresentarem sorologia para anti-HBc, o que pode refletir apenas que pessoas mais velhas apresentam história maior de exposição à infecção. A prevalência de hepatite C é maior do que a mundial estimada. CONCLUSÃO: Buriticupu pode ser considerada endêmica para hepatites B e C. Hepatite B pode estar relacionada com precárias condições de vida e idade avançada. Hepatite C não foi associada com as variáveis investigadas na presente investigação.

American cutaneous leishmaniasis in the Pontal of Paranapanema - SP, Brazil: ecological and entomological aspects / Leishmaniose cutânea americana no Pontal do Paranapanema, SP, Brasil: aspectos ecológicos e entomológicos

American cutaneous leishmaniasis (ACL) occurs in epidemic outbreaks and in sporadic cases with small annual variation in the Pontal of Paranapanema, SP. There is little research on the sandfly fauna of this region. The last outbreaks were related to the Movement of the Landless Workers (MST) and with the ecological tourism in preserved forest of the Parque Estadual do Morro do Diabo (PEMD). AIM: identification of the sandfly fauna within the PEMD, mainly anthropophilic species already incriminated as vectors of ACL, as well as their seasonality, hourly frequency and data of the behavior. M&M: The captures were undertaken with CDC light and Shannon traps from 6:00 pm to 10:00 pm, monthly from May 2000 to December 2001. The temperature and relative humidity data were registered at hourly intervals. RESULTS: The captured species were: Brumptomyia brumpti, Nyssomyia neivai, Nyssomyia whitmani, Pintomyia fischeri and Pintomyia pessoai. The P. pessoai predominated (34.39 percent) and N. neivai was less found (0.74 percent), only being captured in CDC traps. Shannon trap captured more sandflies (63.01 percent) than the CDC traps (36.99 percent). Despite the environmental degradation anthropophilic species, indicates favorable bioecological conditions for persistence of vectors and potential transmission of leishmaniasis.

LCA ocorre em surtos epidêmicos e casos esporádicos com pequena variação anual no Pontal do Paranapanema, SP. Há pouca pesquisa sobre a fauna flebotomínea na região. Os últimos surtos estão relacionados ao MST e turismo ecológico na floresta do Parque Estadual do Morro do Diabo (PEMD). OBJETIVO: identificar a fauna flebotomínea no PEMD, principalmente as espécies antropofílicas já incriminadas como vetores da LCA, também, sua sazonalidade, horários e dados de comportamento. M&M: As capturas foram feitas com armadilhas CDC e Shannon das 18 às 22h, mensalmente de maio de 2000 a dezembro de 2001. Dados de temperatura e umidade relativa foram registrados com intervalo de uma hora. RESULTADOS: As espécies capturadas foram: Brumptomyia brumpti, Nyssomyia neivai, Nyssomyia whitmani, Pintomyia fischeri e Pintomyia pessoai. A P. pessoai predominou (34,39 por cento) e a N. neivai foi a menos encontrada (0,74 por cento), capturada com a CDC. A Shannon capturou mais flebotomíneos (63,01 por cento) que a CDC (36,99 por cento). Apesar da degradação ambiental espécies, antropofílicas foram encontradas, indicando condições bioecológicas para persistência de vetores e potencial transmissão da leishmaniose.

Perspectives on sexual and reproductive health among women in an ancient mining area in Brazil / Perspectiva de la salud sexual y reproductiva en mujeres de una antigua zona minera de Brasil

The purpose of this study was to describe the reproductive profile and frequency of genital infections among women living in the Serra Pelada, a former mining village in the Pará state,Brazil. A descriptive study of women living in the mining area of Serra Pelada was performed in 2004 through interviews that gathered demographics and clinical data, and assessed risk behaviors of 209 randomly-selected women. Blood samples were collected for rapid assay for HIV; specimens were taken for Pap smears and Gram stains. Standard descriptive statistical analyseswere performed and prevalence was calculated to reflect the relative frequency of each disease. Of the 209 participants, the median age was 38 years, with almost 70% having less thanfour years of education and 77% having no income or under 1.9 times the minimum wage of Brazil. About 30% did not have access to health care services during the preceding year. Risk behaviors included: alcohol abuse, 24.4%; illicit drug abuse, 4.3%; being a sex worker, 15.8%; and domestic violence, 17.7%. Abnormal Pap smear was found in 8.6%. Prevalence rates of infection were: HIV, 1.9%; trichomoniasis, 2.9%; bacterial vaginosis, 18.7%; candidiasis, 5.7%;Chlamydial-related cytological changes, 3.3%; and HPV-related cytological changes, 3.8%. Women living in this mining area in Brazil are economically and socially vulnerable to health problems. It is important to point out the importance of concomitant broader strategies that include reducing poverty and empowering women to make improvements regarding their health.

El propósito de este estudio fue describir el perfil reproductivo y la frecuencia de infecciones genitales en mujeres que viven en la población minera Serra Pelada en el Estado de Pará, Brasil. Se realizó un estudio descriptivo de las mujeres que vivían en la zona minera de Serra Pelada en 2004 mediante entrevistas en las que se recabarondatos demográficos y clínicos y se examinaron las conductas de riesgo de 209 mujeres seleccionadas aleatoriamente. Se tomaron muestras de sangre para pruebas rápidas de detección de anticuerpos contra el VIH y muestras de tejido para análisis citológico y tinción de Gram. Se calculó la prevalencia y se utilizaron pruebas estadísticas descriptivas estándares para caracterizar la frecuencia relativa de cada enfermedad. La mediana de la edad de las 209 participantes fue de 38 años; 70% tenía menos de cuatro años de escolaridad y 77% no tenía ingresos o estos eran inferiores a 1,9 veces elsalario mínimo en Brasil. Alrededor de 30% no tuvo acceso a servicios de salud durante el año previo. Entre las conductas de riesgo estaban: consumo de bebidas alcohólicas (24,4%) y de drogas ilícitas (4,3%), ser trabajadora sexual (15,8%) y violencia doméstica (17,7%). Se encontraron resultados anormales a la prueba citológica en8,6% de las participantes. Las prevalencias de infección fueron: 1,9% de VIH, 2,9% de tricomoniasis, 18,7% de vaginosis bacteriana y 5,7% de candidiasis; 3,3% presentó alteracionescitológicas asociadas con la infección por clamidia y 3,8% alteraciones citológicas asociadas con el virus de papiloma humano. Las mujeres de esta zona minera de Brasil son económica y socialmente vulnerables a problemas de salud. Es importante señalar la importancia de estrategias concomitantes más amplias que abarquen la reducción de la pobreza y el empoderamiento de las mujeres para lograr mejoras en su salud.

Dor musculoesquelética na atenção primária à saúde em uma cidade do Vale do Mucuri, nordeste de Minas Gerais / Musculoskeletal pain in primary health care in a town of the Mucuri Valley, northeastern Minas Gerais, Brazil

A dor musculoesquelética é um problema de saúde pública, devido à sua alta prevalência, alto custo e impacto negativo que pode causarna qualidade de vida dos pacientes e também de seus familiares. A dor musculoesquelética é um quadro clínico importante no atendimentoaos pacientes da atenção primária à saúde. Assim, o objetivo do presente estudo foi investigar a freqüência de dor musculoesqueléticacomo razão para consulta médica na atenção primária à saúde, na cidade de Serra dos Aimorés, localizada na região nordeste do estadode Minas Gerais, no Vale do Mucuri, Brasil, e tentar correlacionar tal quadro clínico às variáveis de gênero e idade. Dentre todas asqueixas clínicas referidas como razão para consulta médica, a dor musculoesquelética foi a mais prevalente entre os 1.306 pacientesinvestigados, sendo encontrada em 139 deles (10,64%). A análise estatística dos dados encontrou associação significante entre gêneromasculino e presença de queixa de dor musculoesquelética. Em relação à faixa etária, pôde-se observar um aumento na freqüência dequeixa de dor musculoesquelética, conforme a idade avançava. No entanto, não foi encontrada diferença estatisticamente significante,quando a população, dividida por faixa etária, foi analisada. Tais achados reforçam a importância de adequada avaliação e tratamento dosquadros de dor musculoesquelética pelas equipes da atenção primária à saúde. Importância especial deve ser dada a algumas populaçõesespecíficas, como os idosos. Ademais, há que se atentar também para a diferença existente entre pacientes do sexo masculino e feminino.

Prevalência de lombalgia em garimpeiros de Serra Pelada, Pará / Brasil / Prevalence of low back pain among gold diggers in Serra Pelada, Pará / Brazil

O presente estudo avalia a prevalência de lombalgia em população de garimpeiros de Serra Pelada, localizada no Estado do Pará / Brasil. Considerado como um dos maiores garimpos de ouro na década de 80, havendo em torno de 100.000 pessoas envolvidas na extração do ouro. Atualmente a população local é estimada em 6000 habitantes. Através de uma avaliação médica primária populacional feita em 2002 foi realizado um estudo de corte transversal retrospectivo com a análise de dados obtidos durante esse atendimento. Foram 1.169 atendimentos, 605 do sexo masculino (51,7 por cento), idade média de 41,4 ± 21,2 anos. 47 por cento responderam que trabalham ou trabalharam no garimpo, com tempo médio de 10,9 ± 9,7 anos. A prevalência de lombalgia foi de 13,7 por cento em relação ao geral dos diagnósticos. Quando comparada ao grupo de garimpeiros, a prevalência encontrada foi de 18,2 por cento contra 10,0por cento em relação ao grupo de não garimpeiros (p<0,000), porém não mantendo significância estatística após a regressão logística. Estudos mais detalhados seriam necessários para tentar estabelecer as possíveis relações com dor lombar nesta população, sendo que talvez o rastreamento de antigos garimpeiros pudesse investigar melhor uma possível relação direta laboral do garimpo com lombalgia.

Lombalgia e cefaléia como aspectos importantes da dor crônica na atenção primária à saúde em uma comunidade da região amazônica brasileira / Low back pain and headache as important aspects of chronic pain in primary health care in a community of the Brazilian Amazon region

A dor tem sido descrita como sendo uma experiência sensorial e emocional desagradável que é associada ou descrita em termos de lesão tecidual. Na atenção primária à saúde, a dor crônica atinge altos níveis de prevalência, especialmente devido aos quadros de lombalgia e de cefaléias. O objetivo do presente estudo foi investigar a prevalência de dor crônica na atenção primária à saúde na cidade de Buriticupu, localizada no estado do Maranhão, Brasil. Dentre todos os quadros clínicos, a dor crônica foi o diagnóstico mais prevalente entre os pacientes investigados, sendo encontrada em 539 pacientes (23,02 por cento). Dor músculo-esquelética foi o quadro de dor crônica mais comum, atingindo 250 pacientes (10,62 por cento), sendo que lombalgia foi o diagnóstico mais prevalente entre os quadros de dor músculo-esquelética, sendo encontrada em 120 pacientes (5,12 por cento). Por outro lado, as cefaléias foram o segundo quadro de dor crônica mais comum, depois da dor músculo-esquelética, tendo sido diagnosticada em 212 pacientes (9,05 por cento). Assim, 61,6 por cento dos pacientes com dor crônica apresentavam lombalgia ou cefaléia. Análise estatística univariada encontrou associação entre gênero feminino e cefaléia, entre idade avançada e os principais tipos de dor crônica que foram avaliados neste estudo (músculo-esquelética, lombalgia e cefaléia), e entre índice de massa corpórea e dor músculo-esquelética e lombalgia. Quando a análise multivariada foi conduzida, as associações observadas com gênero feminino e idade avançada não mostraram alterações, mantendo os mesmos padrões de associação. No entanto, o índice de massa corpórea não apresentou mais associação com qualquer tipo de dor crônica.

Protocol for DNA extraction of Cryptosporidium spp. oocysts in fecal samples / Protocolo para extração de DNA de oocistos de Cryptosporidium spp. em amostras fecais

Molecular characterization of Cryptosporidium spp.oocysts in clinical samples is useful for public health since it allows the study of sources of contamination as well as the transmission in different geographical regions. Although widely used in developed countries, in Brazil it is restricted to academic studies, mostly using commercial kits for the extraction of genomic DNA, or in collaboration with external reference centers, rendering the method expensive and limited. The study proposes the application of the modifications recently introduced in the method improving feasibility with lower cost. This method was efficient for clinical samples preserved at -20 °C for up to six years and the low number of oocysts may be overcomed by repetitions of extraction.

A caracterização molecular de oocistos de Cryptosporidium spp. em amostras clínicas é útil à saúde pública, pois permite estudo das fontes de contaminação e a transmissão em determinadas regiões geográficas. Apesar de largamente utilizada em países desenvolvidos, no Brasil está restrita aos estudos acadêmicos, na maioria utilizando kits comerciais para extração do DNA genômico, ou em colaborações com centros de referência externos, o que torna o método caro e limitado. Este estudo propõe a introdução de modificações nos métodos existentes para melhorar a viabilidade e baixar custos. O método proposto foi eficiente em amostras clínicas preservadas a -20 °C por até seis anos e o baixo número de oocistos pode ser contornado por replicadas extrações de DNA.

Adolescência, vida sexual e planejamento reprodutivo de escolares de Serra Pelada, Pará / Adolescence, sexual life and reproductive planning of adolescents of Serra Pelada, Pará

As condições de vida em que um adolescente se desenvolve determinam suas escolhas e influenciam sua vida sexual. O presente estudo visou caracterizar o cotidiano e vida sexual de 108 adolescentes entre 11 e 15 anos de idade, residentes em Serra Pelada, município de Curionópolis, PA, através de análise quantitativa e qualitativa de dados, diferenciando-os quanto ao gênero. Os resultados mostraram a forte presença das relações de gênero em alguns casos. Foi encontrada alguma relação entre religião e vida sexual somente no sexo feminino, em que se observa que 58,5 porcento delas eram adeptas a alguma religião e 66,7 porcento não haviam iniciado a vida sexual aos 12 anos ou menos. Quando questionados se mantinham, ou não, relações sexuais enquanto namoravam, 93,6 porcento das meninas afirmaram que não, enquanto 59,6 porcento dos meninos disseram o mesmo, mostrando que as meninas evitam mais a relação sexual. A grande maioria das meninas afirmou ter feito uso de método para evitar filho na primeira relação, enquanto mais de 50 porcento dos meninos afirmaram o contrário. Essa diferença reflete que a responsabilidade da contracepção é julgada como pertencente ao sexo feminino. Cerca de 70 porcento das meninas afirmam ter a intenção de se casar com a pessoa com quem tem relação sexual atualmente, enquanto 60 porcento dos meninos afirmam o contrário, o que mostra que as meninas se mostram mais receosas quanto a ter filho cedo, em relação aos garotos, e mostram-se mais abertas ao compromisso.

The life conditions in which an adolescent develops determine his choices and influence his sexual life. The present study aimed to characterize the daily activities and sexual life of 108 adolescents aged between 11 and 15 years, living in Serra Pelada, a municipality of Curionópolis, state of Pará, through a quantitative and qualitative data analysis, distinguishing them according to gender. Results showed the strong presence of gender relations in some cases. Some relation was found between religion and sexual life only in the female sex: 58.5% of them followed some religion and 66.7% had not initiated sexual life at the age of 12 or below. When the adolescents were asked whether they had sexual intercourse with their boyfriends or girlfriends, 93.6% of the girls answered they did not, while 59.6% of the boys answered the same, showing that the girls avoid more the sexual intercourse. The great majority of the girls stated they used a contraceptive method in the first intercourse, while more than 50% of the boys said the opposite. This difference reveals that the responsibility for contraception is deemed as belonging to the female sex. Approximately 70% of the girls state they intend to marry the person with whom they are currently having sexual intercourse, while 60% of the boys say the opposite, which shows that the girls are more afraid to have children early, and more open to commitments.

Microsporidiosis in a Brazilian University Hospital: case report

This is the report on a patient with chronic diarrhea caused by microsporidia. He is married, infected with HIV and has low CD4 cell count. The diagnosis was established through stool parasite search using concentration methods and Gram - chromotrope staining technique. Ileum biopsy was also performed in this case. The etiological diagnosis may be established in a clinical laboratory, by chromotrope staining technique in routine microscopic examination of stool specimens.

Este é o relato de caso de doente com diarréia crônica causada por Microsporidia. O doente era homem, casado, infectado com HIV e tinha baixa taxa de linfócitos CD4+. O diagnóstico foi feito em exame de fezes utilizando métodos de concentração e técnica de coloração de Gram-Chromotrope. Biópsia de íleo também foi realizada neste caso. O diagnóstico etiológico pode ser feito em laboratório clínico, por técnicas de coloração baseada em cromotrope na rotina da observação microscópica direta.

Multilocus genotyping of Cryptosporidium hominis associated with diarrhea outbreak in a day care unit in São Paulo

Mundialmente, diferentes espécies de Cryptosporidium estão relacionadas com doenças diarréicas. No Brasil há poucos dados sobre os genótipos das espécies de Cryptosporidium associadas a infecções. OBJETIVO: No presente estudo, caracterizamos, por métodos moleculares, a espécie e o genótipo de Cryptosporidium sp diagnosticado em surto diarréico ocorrido na creche do Hospital das Clínicas, São Paulo, Brasil. MATERIAL E MÉTODOS: Identificação específica e tipagem dos isolados associados ao surto foram feitos a partir do seqüenciamento de fragmentos de DNA amplificados por PCR dos seguintes loci: a região que codifica o SSUrRNA, o gene que codifica uma proteína do envoltório dos oocistos de Cryptosporidium (COWP), e o locus de microsatélite ML1, representado por seqüências repetitiva de três nucleotídeos GAG contendo substituições que diferem entre os genótipos de Cryptosporidium parvum e Cryptosporidium hominis. RESULTADOS: Um total de 29 amostras positivas para Cryptosporidium associadas ao surto diarréico foi analisado com base nos métodos moleculares acima descritos. O estudo revelou a presença do genótipo ML1 de Cryptosporidium hominis. DISCUSSÃO: A análise molecular reforçou a hipótese de que a transmissão de Cryptosporidium hominis durante o surto diarréico ocorreu de pessoa a pessoa através da rota fecal oral. Esta é a primeira vez que ferramentas moleculares são utilizadas para identificação de espécies e genótipos de isolados acusando a presença do genótipo ML1 em pacientes brasileiros.

Further observations on clinical, histopathological, and immunological features of borderline disseminated cutaneous leishmaniasis caused by Leishmania (Leishmania) amazonensis

Leishmania (Leishmania) amazonensis has for some time been considered as the causative agent of two distinct forms of American cutaneous leishmaniasis (ACL): localized cutaneous leishmaniasis (LCL), and anergic diffuse cutaneous leishmaniasis (ADCL). Recently, a new intermediate form of disease, borderline disseminated cutaneous leishmaniasis (BDCL), was introduced into the clinical spectrum of ACL caused by this parasite, and in this paper we record the clinical, histopathological, and immunological features of eight more BDCL patients from Brazilian Amazonia, who acquired the disease in the Pará state, North Brazil. Seven of them had infections of one to two years' evolution and presented with primary skin lesions and the occurrence of metastases at periods varying from six to 12 months following appearance of the first lesion. Primary skin lesions ranged from 1-3 in number, and all had the aspect of an erythematous, infiltrated plaque, variously located on the head, arms or legs. There was lymphatic dissemination of infection, with lymph node enlargement in seven of the cases, and the delayed hypersensitivity skin-test (DTH) was negative in all eight patients prior to their treatment. After that, there was a conversion of DTH to positive in five cases re-examined. The major histopathological feature was a dermal mononuclear infiltration, with a predominance of heavily parasitized and vacuolated macrophages, together with lymphocytes and plasma cells. In one case, with similar histopathology, the patient had acquired his infection seven years previously and he presented with the largest number of disseminated cutaneous lesions. BDCL shows clinical and histopathological features which are different from those of both LCL and ADCL, and there is a good prognosis of cure which is generally not so in the case of frank ADCL.

Retrospective study of the occurrence of Cyclospora cayetanensis at Clinical Hospital of the University of São Paulo Medical School, SP

Cyclospora cayetanensis causa diarréia líquida em países tropicais, viajantes e após ingestão de água e alimentos contaminados. Muito pouco é conhecido sobre sua epidemiologia, aspectos patogênicos e reservatórios. No Brasil, sua prevalência é desconhecida com relato de três surtos. Nós relatamos um estudo retrospectivo de 5.015 amostras fecais provenientes de 4.869 pacientes atendidos no Hospital das Clínicas da Faculdade de Medicina da Universidade de São Paulo, SP, Brasil entre abril de 1996 e janeiro de 2002 com detecção de 14 casos de ciclosporíase e prevalência de 0,3%. Deste total 71,4% eram do sexo feminino com idade média de 38 anos. Dez apresentaram sintomatologia, seis tinham níveis de marcadores imunológicos e cinco imunodeficiência.