Obtención y caracterización de clones de leshmania para la producción de antígeno / Production and characterization of leshmania clones for antigen production

Objetivos: Producción de leishmanina. Lugar. Intituto Boliviano de Biología de Altura, Facultad de Medicina, UMSA. Diseño. Experimental. Métodos. Una capa nativa (MHOM/BO/89EQ) y una cepa de referencia de OMS (MHOM/BR/75 2903) amsas correspondientes a Leishmania braziliensis braziliensis, fueron clonadas y cultivadas durante 7 días,la recolección de formas promastigotes se realizó en fase exponencial de crecimiento. Luego de fijación de parásitos el antigeno fué evaluado en un test de linfoproliferación con células de paciaentes con leishmania cutanea, In vivo, se realizó en hamsters y ratones, el tamaño de la lesión, desarrollo de metástasis, toxicidad anormal y diametro de induración. Resultados. El diámetro de induración obtenido en hambsters fué de 8 mm, 7.5 mm en ratones con la lesihmanina dae la cepa nativa EQ, con la cepa de refernecia 2903, en hamster fue de 7.6 mm y en ratones 8.25 mm. En pacientes con leishmaniasis se ha obtenido 75.67 por ciento y 76.19 por ciento de positividad en pacients conlesiones cutáneas y lesiones mucosas, respectivamente. La correlación cone l diagnóstico parsitológico es de 97 por ciento.

Ausencia de capacidad tripanocida en macrofagos de apcients chagasicos / absebce of tripanocidal capacity in macrophages of chagasic patients

Pregunta de investigaciòn: ¿Cuàl es el comportamiento de macròfagos de pacientes chagàsicos frente a cutokinas individuales?. Objetivos: Determinar el efecto de IL-2, IL-4 TNF-alpha, IFN-gamma, M-CSF, y GM-CSF en la interacciòn de macaròfagos y Trypanosoma cruzi. Diseño. Experimental en controles y pacientes. Lugar. Instituto Boliviano de Biología de Altura, Faucltad de Meidicina, UMSA. Población. Veinte pacientes chagàsicos con serología positiva para T. cruzi (inmunofluorescencia y ELISA). Diez donadores sanos con relogia negaiva para T. cruzi. Métodos. Células mononucleares periféricos fueron separadas medniante gradiente de densidad (Ficoll Hypaque). Los monocitos fueron recuperados por adhesión en placas de vidrio y cultivados en presencia de parásitos. Luego de 2 hs se eliminaron parásitos libres y se incubaron los cultivos con cytokinas durante 48 hs. Se analizaron no menos de 200 células microscópicamente en cada condición para detrminar multiplicación o desnutrición de parásitos . Resultados. Solamente las células de donadores sanos respnden al estimulo de GM-CSF e IL-4 como se evidencia por una reducción significativa del número de parásitos y porcentaje de células parasitadas.

Characterization of T cell clones from chagasic patients: predominance of CD8 surface phenotype in clones from patients with pathology

Human Chagas' disease, caused by the protozoan Trypanosoma cruzi, is associated with pathological processes whose mechanisms are not known. To address this question, T cell lines were developed from chronic chagasic patients peripheral blood mononuclear cells (PBMC) and cloned. These T cell clones (TCC) were analyzed phenotypically with monoclonal antibodies by the use of a fluorescence microscope. The surface phenotype of the TCC from the asymptomatic patient were predominantly CD4 positive (86 por cento). On the contrary, the surface phenotype CD8 was predominant in the TCC from the patients suffering from cardiomegaly with right bundle branch block (83 por cento), bradycardia with megacolon (75 por cento) and bradycardia (75 por cento). Future studies will be developed in order to identify the antigens eliciting these T cell subpopulations.