Fatores associados com os níveis séricos de zonulina na doença inflamatória intestinal / Factors associated with circulating zonulin in inflammatory bowel disease

ABSTRACT Background: Inflammatory bowel disease (IBD) comprises the spectrum between Crohn's disease (CD) and ulcerative colitis (UC), a condition whose prevalence in countries such as Brazil has increased significantly in recent years. Changes in the intestinal epithelial barrier function and, consequently, an increase in intestinal permeability, have been suggested as important factors in the pathogenesis of different autoimmune conditions, including IBD. Therefore, there is a need for a practical tool to assess gut barrier integrity in these patients. Objective: To study factors associated with serum zonulin levels, a marker of intestinal permeability, in patients with IBD. Methods: This was a cross-sectional observational study that included 117 patients with IBD and 32 healthy controls. Disease activity was assessed by the Simple Clinical Colitis Activity Index (SCCAI) in UC and by the Harvey-Bradshaw Index (HBI) in CD subjects. Zonulin levels were measured by ELISA and inflammatory cytokines by Cytometric Bead Array, using commercially available kits. Results: The mean age of IBD patients was 44.0±15.9 years, 66.7% were female, 57 subjects were diagnosed with CD and 60 with UC. At evaluation, clinical remission was observed in 56.7% of CD patients and in 59.2% of UC subjects. No differences were observed in zonulin levels when comparing IBD patients with the control group (95.28 ng/mL vs 96.61 ng/mL, P=0.573) and when comparing patients with CD to those with UC (79.68 ng/mL vs 106.10 ng/mL, P=0.887). Among IBD group, zonulin concentrations were higher among females, correlated positively with body mass index (BMI) and age; and negatively with hemoglobin and hematocrit. In patients with UC, zonulin correlated negatively with hemoglobin, hematocrit, and albumin; and positively with BMI and SCCAI. Among CD patients, zonulin was positively correlated with age and BMI, but not with HBI. No correlations were observed between zonulin and circulating cytokines in IBD patients. Conclusion: In this cohort mostly comprised of patients in clinical remission, serum zonulin levels were not higher in patients with IBD than healthy controls, and correlated with variables not linked to baseline disease, such as sex, age and BMI. However, zonulin correlated with clinical and laboratory parameters of disease severity and activity among subjects with UC, but not among patients with CD. These findings indicate a potential role for zonulin as a biomarker in IBD, particularly in UC.

RESUMO Contexto: A doença inflamatória intestinal (DII) compreende o espectro entre a doença de Crohn (DC) e a colite ulcerativa, condição esta cuja prevalência em países como o Brasil vem aumentando significativamente nos últimos anos. Alterações na função da barreira epitelial intestinal e, consequentemente, um aumento da permeabilidade intestinal, têm sido sugeridos como fatores importantes envolvidos na patogênese de diferentes condições autoimunes, dentre elas, a DII. Desta forma, existe a necessidade de uma ferramenta prática para avaliar a integridade da barreira epitelial intestinal nestes pacientes. Objetivo: Estudar os fatores associados com os níveis séricos de zonulina, um marcador da permeabilidade intestinal, em pacientes com DII. Métodos: Estudo observacional transversal que incluiu 117 pacientes com DII e 32 indivíduos que compuseram o grupo controle. A atividade da doença foi avaliada pelo Simple Cliniical Colitis Activity Index (SCCAI) na colite ulcerativa e pelo índice de Harvey-Bradshaw (IHB) em pacientes com DC. Os níveis de zonulina foram quantificados por ELISA e os níveis das citocinas inflamatórias pelo Cytometric Bead Array, utilizando kits comercialmente disponíveis. Resultados: A média de idade dos pacientes com DII foi de 44,0±15,9 anos, 66,7% eram do sexo feminino, 57 pacientes eram portadores de DC e 60 pacientes eram portadores de colite ulcerativa. No momento da avaliação clínico-laboratorial, 56,7% dos pacientes com DC encontravam-se em remissão clínica e, dentre os pacientes com colite ulcerativa, 59,2% deles assim se encontravam. Não foram observadas diferenças nos níveis séricos de zonulina entre pacientes com DII e grupo controle (95,28 ng/mL vs 96,61 ng/mL; P=0,573), assim como entre pacientes com DC e pacientes com colite ulcerativa (79,68 ng/mL vs 106,10 ng/mL, P=0,887). Dentre os pacientes com DII, as concentrações de zonulina foram mais elevadas no sexo feminino e correlacionaram-se positivamente com o índice de massa corporal (IMC) e com a idade, correlacionando-se negativamente com os níveis de hemoglobina e hematócrito. Nos pacientes com colite ulcerativa, as concentrações de zonulina correlacionaram-se negativamente com os parâmetros hemoglobina, hematócrito e albumina e, positivamente, com o IMC e com o SCCAI. Dentre os pacientes com DC, a zonulina sérica correlacionou-se positivamente com a idade e com o IMC, mas não com o IHB. Não foram observadas correlações entre os níveis de zonulina e as citocinas circulantes nos pacientes com DII. Conclusão: Nesta coorte constituída majoritariamente por pacientes em remissão clínica, os níveis séricos de zonulina não se mostraram aumentados em pacientes com DII em relação a indivíduos controles e correlacionaram-se com variáveis não relacionadas à doença de base, como com o sexo, com a idade e com o IMC. No entanto, os níveis séricos de zonulina correlacionaram-se com parâmetros clínicos e laboratoriais de gravidade e atividade da doença dentre os pacientes com colite ulcerativa, mas não dentre os pacientes com DC. Estes achados indicam um potencial papel da zonulina sérica como um biomarcador na DII, principalmente na colite ulcerativa.

Sistema de agendamento online: uma ferramenta do PEC e-SUS APS para facilitar o acesso à Atenção Primária no Brasil / PEC e-SUS APS online appointment scheduling system: a tool to facilitate access to Primary Care in Brazil

Resumo A existência de barreiras nos serviços de demanda agendada resulta no elevado índice de absenteísmo. O objetivo deste manuscrito é apresentar as principais características do Sistema de Agendamento Online da estratégia e-SUS APS no Brasil. O Sistema de Agendamento Online desenvolvido pelo Laboratório Bridge da Universidade Federal de Santa Catarina, o qual também desenvolve o sistema de Prontuário Eletrônico do Cidadão (PEC e-SUS APS), e permite o agendamento de consultas através do aplicativo Conecte SUS Cidadão. O PEC e-SUS APS possui, entre outros, o módulo de agenda do profissional onde são realizadas as marcações e cancelamentos de consultas, permitindo a visualização de seus horários e disponibilidades. Embora o uso de sistemas de agendamento online seja capaz de fornecer benefícios, infelizmente eles têm sido pouco explorados na APS. Os principais motivos estão relacionados com a falta de informação e capacitação dos profissionais sobre o sistema e os impactos nos serviços prestados pelos estabelecimentos de saúde da APS. A fim de garantir a maior adoção e utilização do Sistema de Agendamento Online, é necessário ampliar a divulgação do sistema de modo a instituí-lo na rotina dos serviços como um instrumento facilitador do acesso à APS.

Abstract Barriers faced by health services providing scheduled care result in high no-show rates. This article describes the main characteristics of an online appointment scheduling system incorporated into the citizens' electronic health record system (PEC e-SUS APS). Developed by the Bridge Laboratory, Federal University of Santa Catarina, which also developed the PEC e-SUS APS, the system allows patients to schedule appointments using the national patient communications hub, Conecte SUS Cidadão. The PEC e-SUS APS includes a professional's agenda module that allows patients to view available time slots and book and cancel appointments. Unfortunately, despite the benefits of online scheduling systems, their potential has been poorly exploited in Brazil. The main reasons for this include lack of information and training of health professionals on how to use the system and its potential benefits for Primary Health Care (PHC) services. Wider dissemination is needed to improve the adoption of the system and promote the routine use of this tool in health services in order to facilitate access to primary health care.

Uma análise sobre o desenvolvimento de tecnologias digitais em saúde para o enfrentamento da COVID-19 no Brasil e no mundo / Un análisis sobre el desarrollo de tecnologías digitales en salud para el combate a la COVID-19 en Brasil y en el mundo / An analysis of the development of digital health technologies to fight COVID-19 in Brazil and the world

A pandemia de coronavírus que atingiu o mundo no final de 2019 segue batendo recordes de novos casos e óbitos relacionados à doença. As orientações para o manejo clínico dos pacientes infectados e a prevenção de novos casos estão centradas nas medidas de controle dos sintomas, hábitos de higiene, isolamento social e diminuição da aglomeração de pessoas. Tal fato forçou uma mudança no modo como os serviços de saúde prestam cuidados, protagonizando a incorporação de novas tecnologias em saúde. Assim, este Ensaio objetiva compilar e analisar algumas experiências de uso das tecnologias digitais em saúde, para minimizar os impactos da COVID-19. Identificou-se o desenvolvimento de soluções tecnológicas de manejo clínico do paciente, diagnóstico por imagem, uso de inteligência artificial para análise de riscos, aplicativos de geolocalização, ferramentas para análise de dados e relatórios, autodiagnóstico e, inclusive, de orientação à tomada de decisão. A grande maioria das iniciativas listadas tem sido eficaz na minimização dos impactos da COVID-19 nos sistemas de saúde, de modo que visa à diminuição da aglomeração de pessoas e assim facilita o acesso aos serviços, bem como contribui para a incorporação de novas práticas e modos de cuidar, em saúde.

La pandemia de coronavirus que afectó al mundo al final de 2019 sigue batiendo récords de nuevos casos y óbitos relacionados con la enfermedad. Las orientaciones para el manejo clínico de los pacientes infectados y la prevención de nuevos casos están centradas en las medidas de control de los síntomas, hábitos de higiene, aislamiento social y disminución de la aglomeración de personas. Tal hecho forzó un cambio en el modo en el que los servicios de salud prestan cuidados, protagonizando la incorporación de nuevas tecnologías en salud. Así, este Ensayo tiene como objetivo compilar y analizar algunas experiencias en el uso de tecnologías digitales en salud, para minimizar los impactos de la COVID-19. Se identificó el desarrollo de soluciones tecnológicas de manejo clínico del paciente, diagnóstico por imagen, uso de inteligencia artificial para análisis de riesgos, aplicaciones de geolocalización, herramientas para el análisis de datos e informes, auto diagnóstico e, inclusive, de orientación para la toma de decisiones. La gran mayoría de las iniciativas listadas se demuestran eficaces en la minimización de los impactos de la COVID-19 en los sistemas de salud, de modo que, tienen como objetivo la disminución de la aglomeración de personas, así facilitan el acceso a los servicios, del mismo modo que contribuyen a la incorporación de nuevas prácticas y modos de cuidar en salud.

The coronavirus pandemic that struck the world in late 2019 continues to break records of new cases and deaths from the disease. Guidelines for clinical management of infected patients and prevention of new cases focus on measures to control symptoms, hygiene habits, social distancing, and decrease in human crowding. This forced a change in the way health services provide care, generating the incorporation of new health technologies. The Essay thus aims to compile and analyze experiences in the use of digital health technologies to minimize the impacts of COVID-19. The authors identified the development of technological solutions for clinical management of patients, imaging diagnosis, use of artificial intelligence for risk analysis, geolocation apps, data analysis and reports, self-diagnosis, and even orientation for decision-making. The great majority of the initiatives listed here prove effective in minimizing the impacts of COVID-19 on health systems and aim to decrease human crowding and thus facilitate access to services, besides contributing to the incorporation of new health practices and modes of care.

e-SUS APS strategy: Case of success on Primary Care informatization in Brazil / Estratégia e-SUS APS: Um Caso de sucesso na informatização da Atenção Primária no Brasil / Estrategia e-SUS APS: Caso de éxito de informatización de Atención Primaria en Brasil

Objectives: To present the main actions of the Brazilian government that led to the successful implementation of the strategy for the computerization of Primary Care, e-SUS APS, throughout the whole country, as well as the difficulties in implementing such a national health information system (NHIS). Methods: Report on the experience of implementing an NHIS in Brazilian Primary Care, identifying the actions taken by the government to mitigate the risks and overcome difficulties. Results: The e-SUS Primary Care strategy (e-SUS APS) initiated the restructuring of the health information system at the national level. This action focused on the effective management of information, considered essential to increase the quality of care. This strategy aims to create different realities of technological infrastructure and allow all cities to interconnect with an NHIS across the country. Since e-SUS AB was implemented, more than 3 billion records of Primary Health Care (PHC) from all regions of the country have been received by the government. Today, even cities with weak technological infrastructure are able to transmit their data to NHIS, which manages all information. Conclusion: The implementation of the new strategy for primary care at almost 100% of Brazilian municipalities has been a success due to a number of factors. However, efforts must be maintained to ensure the success of its implementation.

Objetivos: Apresentar as principais ações do governo brasileiro que levaram ao sucesso da implantação da estratégia da informatização da Atenção Primária, e-SUS APS, em todo o país, bem como as dificuldades para se implantar um sistema nacional de informações em saúde (NHIS). Métodos: Relato da experiência da implantação de um NHIS na Atenção Primária brasileira, identificando as ações adotadas pelo governo para mitigar os riscos e superar as suas dificuldades. Resultados: A estratégia e-SUS Atenção Básica (e-SUS APS) iniciou a reestruturação do sistema de informação em saúde em nível nacional. Essa ação se concentrou no gerenciamento eficaz das informações, considerado como essencial para aumentar a qualidade do atendimento. Essa estratégia foi construída com o intuito de criar diferentes realidades de infraestrutura tecnológica e permitir que todas as cidades se interconectem com um NHIS em todo o país. Desde que o e-SUS APS foi implantado, mais de 3 bilhões de registros de atenção primária à saúde (APS) de todas as regiões do país, foram recebidos pelo governo. Hoje, mesmo cidades com fraca infraestrutura tecnológica são capazes de transmitir seus dados ao NHIS, que gerencia todas as informações. Conclusão: A implantação da nova estratégia para atenção primária em quase 100% do território brasileiro vem sendo um sucesso devido a uma série de fatores. No entanto, os esforços devem ser mantidos para garantir o sucesso de sua implementação.

Objetivos: Presentar las principales acciones del gobierno brasileño que llevaron a la implementación exitosa de la estrategia de informatización de atención primaria, e-SUS APS, en todo el país, así como las dificultades para implementar un sistema nacional de información de salud (NHIS). Métodos: Informe sobre la experiencia de implementar un NHIS en Atención Primaria brasileña, identificando las acciones tomadas por el gobierno para mitigar riesgos y superar sus dificultades. Resultados: La estrategia de atención primaria de e-SUS (e-SUS APS) inició la reestructuración del sistema de información de salud a nivel nacional. Esta acción se centró en el manejo efectivo de la información, considerada esencial para aumentar la calidad de la atención. Esta estrategia fue construida con el objetivo de crear diferentes realidades de infraestructura tecnológica y permitir que todas las ciudades se interconecten con un NHIS en todo el país. Desde que se implementó el e-SUS APS, el gobierno ha recibido más de 3 mil millones de registros de atención primaria de salud (APS) de todas las regiones del país. Hoy, incluso las ciudades con infraestructura tecnológica débil pueden transmitir sus datos a NHIS, que administra toda la información. Conclusión: La implementación de la nueva estrategia de atención primaria en casi 100% del territorio brasileño ha sido un éxito debido a una serie de factores. Sin embargo, se deben mantener los esfuerzos para garantizar el éxito de su implementación.

O carvedilol potencializa o efeito antioxidante das vitaminas E e C na cardiopatia chagásica crônica / Carvedilol enhances the antioxidant effect of vitamins E and C in chronic chagas heart disease

FUNDAMENTO: A doença de Chagas continua a ser uma importante doença endêmica no país, sendo o acometimento cardíaco a sua manifestação mais grave. OBJETIVO: Verificar se o uso concomitante de carvedilol potencializará o efeito antioxidante das vitaminas E e C na atenuação do estresse oxidativo sistêmico na cardiopatia chagásica crônica. MÉTODOS: Foram estudados 42 pacientes com cardiopatia chagásica, agrupados de acordo com a classificação modificada de Los Andes, em quatro grupos: 10 pacientes no grupo IA (eletrocardiograma e ecocardiograma normais: sem envolvimento do coração), 20 pacientes do grupo IB (eletrocardiograma normal e ecocardiograma anormal: ligeiro envolvimento cardíaco), oito pacientes no grupo II (eletrocardiograma e ecocardiograma anormais, sem insuficiência cardíaca: moderado envolvimento cardíaco) e quatro pacientes no grupo III (eletrocardiograma e ecocardiograma anormais com insuficiência cardíaca: grave envolvimento cardíaco). Os marcadores de estresse oxidativo foram medidos no sangue, antes e após um período de seis meses de tratamento com carvedilol e após seis meses de terapia combinada com vitaminas E e C. Os marcadores foram: atividades da superóxido dismutase, catalase, glutationa peroxidase, glutationa S-transferase e redutase, mieloperoxidase e adenosina deaminase, e os níveis de glutationa reduzida, de espécies reativas do ácido tiobarbitúrico, proteína carbonilada, vitamina E e óxido nítrico. RESULTADOS: Após o tratamento com carvedilol, todos os grupos apresentaram diminuições significativas dos níveis de proteína carbonilada e glutationa reduzida, enquanto os níveis de óxido nítrico e atividade da adenosina aumentaram significativamente apenas no grupo menos acometido (IA). Além disso, a maioria das enzimas antioxidantes mostrou atividades diminuídas nos grupos menos acometidos (IA e IB). Com a adição das vitaminas ao carvedilol houve diminuição dos danos em proteínas, nos níveis de glutationa e na maior parte da atividade das enzimas antioxidantes. CONCLUSÕES: A queda dos níveis de estresse oxidativo, verificada pelos marcadores testados, foi mais acentuada quando da associação do fármaco carvedilol com as vitaminas antioxidantes. Os dados sugerem que tanto o carvedilol isoladamente como sua associação com as vitaminas foram eficazes em atenuar o dano oxidativo sistêmico em pacientes com CC, especialmente aqueles menos acometidos, sugerindo a possibilidade de sinergismo entre esses compostos.

BACKGROUND: Chagas disease is still an important endemic disease in Brazil, and the cardiac involvement is its more severe manifestation. OBJECTIVE: To verify whether the concomitant use of carvedilol will enhance the antioxidant effect of vitamins E and C in reducing the systemic oxidative stress in chronic Chagas heart disease. METHODS: A total of 42 patients with Chagas heart disease were studied. They were divided into four groups according to the modified Los Andes classification: 10 patients in group IA (normal electrocardiogram and echocardiogram; no cardiac involvement); 20 patients in group IB (normal electrocardiogram and abnormal echocardiogram; mild cardiac involvement); eight patients in group II (abnormal electrocardiogram and echocardiogram; no heart failure; moderate cardiac involvement); and four patients in group III (abnormal electrocardiogram and echocardiogram with heart failure; severe cardiac involvement). Blood levels of markers of oxidative stress were determined before and after a six-month period of treatment with carvedilol, and six months after combined therapy of carvedilol with vitamins E and C. The markers analyzed were as follows: activities of superoxide dismutase, catalase, glutathione peroxidase, glutathione S-transferase and reductase, myeloperoxidade and adenosine deaminase; and the levels of reduced glutathione, thiobarbituric-acid reactive substances, protein carbonyls, vitamin E, and nitric oxide. RESULTS: After treatment with carvedilol, all groups showed significant decrease in protein carbonyls and reduced glutathione levels, whereas nitric oxide levels and adenosine activity increased significantly only in the less severely affected group (IA). In addition, the activity of most of the antioxidant enzymes was decreased in the less severely affected groups (IA and IB). By combining the vitamins with carvedilol, a reduction in protein damage, in glutathione levels, and in the activity of most of the antioxidant enzymes were observed. CONCLUSIONS: The decrease in oxidative stress levels observed by means of the markers tested was more significant when carvedilol was used in combination with the antioxidant vitamins. The findings suggest that both carvedilol alone and in combination with the vitamins were effective in attenuating the systemic oxidative stress in patients with Chagas heart disease, especially those less severely affected, thus suggesting the possibility of synergism between these compounds.

Carvedilol atenua o estresse oxidativo na cardiopatia chagásica crônica / Carvedilol attenuates oxidative stress in chronic chagasic cardiomyopathy / Carvedilol atenúa el estrés oxidativo en la cardiopatía chagásica crónica

FUNDAMENTO: Há cada vez mais evidências sugerindo que doença de Chagas envolve dano oxidativo e contribui para a progressão da doença cardíaca. OBJETIVO: Avaliar o efeito do carvedilol sobre marcadores de estresse oxidativo na doença de Chagas crônica. MÉTODOS: A população de estudo incluiu 42 pacientes com cardiopatia chagásica e os biomarcadores de estresse oxidativo foram medidos antes e após um período de seis meses de tratamento com carvedilol (37,5 mg/dia). Os pacientes foram considerados de acordo com a classificação de Los Andes, e a atividade da superóxido dismutase, catalase, glutationa peroxidase, S-transferase e redutase, mieloperoxidase e adenosina deaminase; e os níveis de glutationa reduzida, de espécies reativas do ácido tiobarbitúrico, proteína carbonil, vitamina E e óxido nítrico foram medidos no sangue. RESULTADOS: Após o tratamento com carvedilol, todos os grupos apresentaram reduções significativas nos níveis de proteína carbonil e glutationa reduzida, enquanto os níveis de óxido nítrico e atividade da adenosina aumentaram significativamente somente no grupo IA. Além disso, a maioria das enzimas antioxidantes apresentou diminuição de suas atividades, nos grupos IA e IB. CONCLUSÃO: Os dados sugerem que o tratamento com carvedilol foi eficaz na atenuação do dano oxidativo, um efeito que pode ser particularmente importante em doença de Chagas crônica com cardiopatia.

BACKGROUND: There is increasing evidence suggesting that Chagas disease involves oxidative damage and contributes to heart disease progression. OBJECTIVE: To evaluate the effect of carvedilol on oxidative stress markers in chronic Chagas disease. METHODS: The study population included 42 patients with Chagas cardiomyopathy and oxidative stress biomarkers were measured before and after a period of six months of treatment with carvedilol (37.5 mg/day). Patients were considered according to the Los Andes classification and the activity of superoxide dismutase, catalase, glutathione peroxidase, S-transferase and reductase, myeloperoxidase and adenosine deaminase; levels of reduced glutathione, thiobarbituric acid reactive species, carbonyl protein, vitamin E and nitric oxide were measured in blood. RESULTS: After treatment with carvedilol, all groups showed significant reductions in levels of carbonyl protein and reduced glutathione, whereas the levels of nitric oxide and adenosine activity increased significantly only in group IA. Moreover, most of the antioxidant enzymes showed decrease in activity in groups IA and IB. CONCLUSION: The data suggest that treatment with carvedilol was effective in attenuating oxidative damage, an effect that may be particularly important in patients with chronic Chagas' disease cardiomyopathy.

FUNDAMENTO: Hay cada vez más evidencias sugiriendo que la enfermedad de Chagas envuelve daño oxidativo y contribuye a la progresión de la enfermedad cardíaca. OBJETIVO: Evaluar el efecto del carvedilol sobre marcadores de estrés oxidativo en la enfermedad de Chagas crónica. MÉTODOS: La población de estudio incluyó 42 pacientes con cardiopatía chagásica y los biomarcadores de estrés oxidativo fueron medidos antes y después de un período de seis meses de tratamiento con carvedilol (37,5 mg/día). Los pacientes fueron considerados de acuerdo con la clasificación de Los Andes, y la actividad de la superóxido dismutasa, catalasa, glutatión peroxidasa, S-transferasa y reductasa, mieloperoxidasa y adenosina deaminasa; y los niveles de glutatión reducida, de especies reactivas del ácido tiobarbitúrico, proteína carbonil, vitamina E y óxido nítrico fueron medidos en la sangre. RESULTADOS: Después del tratamiento con carvedilol, todos los grupos presentaron reducciones significativas en los niveles de proteína carbonil y glutatión reducida, mientras que los niveles de óxido nítrico y actividad de la adenosina aumentaron significativamente solamente en el grupo IA. Además de eso, la mayoría de las enzimas antioxidantes presentó disminución de sus actividades, en los grupos IA e IB. CONCLUSIONES: Los datos sugieren que el tratamiento con carvedilol fue eficaz en la atenuación del daño oxidativo, un efecto que puede ser particularmente importante en enfermedad de Chagas crónica con cardiopatía.

Drug resistance of Mycobacterium tuberculosis strains in southern Brazil / Estudo da resistência de cepas de Mycobacterium tuberculosis aos antimicrobianos no sul do Brasil

INTRODUCTION: The aim of this work was to evaluate the prevalence of Mycobacterium tuberculosis (MT) strains with mutations that could result in resistance to the main drugs used in treatment in a region with one of the highest numbers of tuberculosis (TB) cases in southern Brazil. METHODS: Deoxyribonucleic acid (DNA) from 120 sputum samples from different patients suspicious of pulmonary tuberculosis who attended the Municipal Public Laboratory for Mycobacterium sp. diagnosis was directly amplified and analyzed by PCR-SSCP. The DNA was amplified in known hotspot mutation regions of the genes rpoB, ahpC, embB, katG, inhA, and pncA. RESULTS: The percentage of samples positive by culture was 9.2 percent (11/120); 5 percent (6/120) were positive by bacilloscopy and MT-PCR, and DNA fragments of the aforementioned resistance genes could be amplified from seven (7) of the eleven (11) samples with positive results, either by culture or PCR/bacilloscopy. All presented a SSCP pattern similar to a native, nonresistant genotype, with the ATCC strain 25177 as control, except for one sample (0.01 percent), which presented a SSCP profile demonstrating mutation at the embB gene. CONCLUSIONS: These results are consistent with the empirical observations by physicians treating TB patients in our region of a low occurrence of cases that are refractory to conventional treatment schemes, in contrast to other parts of the country. Continued surveillance, especially molecular, is essential to detect and monitor the outbreak of MT-resistant strains.

INTRODUÇÃO: O objetivo deste trabalho foi avaliar a prevalência de cepas de Mycobacterium tuberculosis (MT) com mutações que podem resultar em resistência às principais drogas utilizadas no tratamento em uma das regiões com o maior número de casos de tuberculose (TB) no Sul do Brasil. MÉTODOS: O ácido desoxiribonucleico (DNA) de 120 amostras de escarro de diferentes pacientes com suspeita de TB pulmonar que procuraram o serviço público de saúde do município sede da região para o diagnóstico de MT foi diretamente amplificado e analisado por PCR-SSCP. Foram amplificadas regiões conhecidas onde ocorrem a maioria das mutações nos genes rpoB, ahpC, embB, katG, inhA, and pncA. RESULTADOS: Nove virgula dois por cento (11/120) das amostras apresentaram resultado positivo por cultura, 5 por cento (6/120) foi positiva por bacilscopia e PCR para MT, e os fragmentos dos genes mencionados puderam ser amplificados em sete (7) dos onze (11) casos com resultado positivo, seja por cultura ou PCR/baciloscopia. Todos estes casos apresentaram um padrão de SSCP similar ao genótipo nativo, não resistente, por comparação com a cepa controle ATCC 25177, com exceção de uma amostra (0,01 por cento), que apresentou um padrão de SSCP mutante no gene embB. CONCLUSÕES: Estes resultados são consistentes com as observações empíricas por parte dos clínicos que tratam os pacientes com TB na região, de uma baixa ocorrência de casos refratários ao tratamento convencional, em contraste com outras partes do país. Porém, a vigilância contínua, especialmente molecular, é essencial para identificar e monitorar o aparecimento de cepas de MT resistentes.

Methotrexate inhibits integrin adhesion molecules in the mouse model of pleurisy induced by carrageenan

The aim of this work was to analyze the effect of methotrexate (MTX) upon leukocyte migration and expression of adhesion molecules CD11a/CD18 in the lung, 4 and 48 h after inflammation induction by carrageenan in mice. The results showed that MTX significantly decreased leukocyte influx and CD11a expression in the lung at 4 and 48 h of pleurisy (P < 0.01). MTX also inhibited CD18 expression at 4 h but not 48 h of pleurisy (P < 0.01). These results proved that MTX at the studied doses had important anti-inflammatory properties, acting primarily on leukocyte migration from the pleural cavity to the lung via inhibition of CD11a/CD18 expression in the mouse model of inflammation.

O modelo experimental da pleurisia induzida pela carragenina, em camundongos é caracterizado pelo aumento da migração de leucócitos às custas de neutrófilos 4 h após a indução da inflamação pela carragenina na cavidade pleural de camundongos.. Após 48 h da indução da inflamação ocorre aumento de leucócitos do tipo mononucleares. O objetivo deste trabalho foi avaliar o efeito do metotrexato (MTX) sobre a migração de leucócitos, e a expressão de moléculas de adesão (CD11a/CD18), no pulmão 4 e 48 h após a inflamação induzida pela carragenina.Os resultados demonstraram que o MTX inibiu significativamente o influxo de leucócitos e a expressão de CD11a no pulmão 4 h e 48 h após a inflamação induzida pela carragenina (P < 0.01). O MTX inibiu a expressão de CD18 no pulmão 48 h após, mas não 4 h após esta resposta inflamatória (P < 0.01). Estes resultados demonstram que o MTX, nas doses estudadas, possui importante efeito antiinflamatório agindo principalmente sobre o influxo de leucócitos da cavidade pleural para os pulmões, via inibição da expressão de moléculas de adesão do tipo CD11a/CD18, no modelo da pleurisia induzida pela carragenina, em camundongos.