Botulism in Brazil, 2000-2008: epidemiology, clinical findings and laboratorial diagnosis / Botulismo no Brasil, 2000-2008: epidemiologia, achados clínicos e diagnóstico laboratorial

Botulism is a rare and potentially lethal illness caused by Clostridium botulinum neurotoxin. We describe the findings of a laboratorial investigation of 117 suspected cases of botulism reported to the surveillance system in Brazil from January 2000 to October 2008. Data on the number and type of samples analyzed, type of toxins identified, reporting of the number of botulism cases and transmission sources are discussed. A total of 193 clinical samples and 81 food samples were analyzed for detection and identification of the botulism neurotoxin. Among the clinical samples, 22 (11.4 percent) presented the toxin (nine type A, five type AB and eight with an unidentified type); in food samples, eight (9.9 percent) were positive for the toxin (five type A, one type AB and two with an unidentified type). Of the 38 cases of suspected botulism in Brazil, 27 were confirmed by a mouse bioassay. Laboratorial botulism diagnosis is an important procedure to elucidate cases, especially food-borne botulism, to confirm clinical diagnosis and to identify toxins in food, helping sanitary control measures.

Botulismo é uma doença rara e potencialmente letal, resultante da ação de uma neurotoxina produzida pelo Clostridium botulinum. No presente estudo, estão descritos os resultados da investigação laboratorial de 117 casos suspeitos de botulismo notificados ao sistema de vigilância, ocorridos no Brasil no período de janeiro de 2000 a outubro de 2008. Os dados obtidos sobre as fontes de transmissão, os tipos de toxina identificados e de amostras analisadas serão discutidos. Foram analisadas 193 amostras clínicas e 81 amostras de alimentos para detecção e identificação de neurotoxina botulínica. Entre as amostras clínicas, 22 (11,4 por cento) amostras apresentaram resultado positivo para toxina (nove do tipo A, cinco do tipo AB e em oito o tipo não foi identificado) e entre as amostras de alimentos, oito (9,9 por cento) foram positivas (cinco do tipo A, uma do tipo AB e em duas o tipo não foi identificado). Dos 38 casos considerados positivos para botulismo, 27 foram confirmados pelo bioensaio em camundongo. O diagnóstico laboratorial de botulismo é importante para elucidação dos casos, principalmente de botulismo alimentar, para confirmação dos diagnósticos clínicos e identificação das toxinas nos alimentos, provendo subsídios para as medidas de controle sanitário.

Detecção de Vibrio cholerae O1 em ostras utizando anticorpo monoclonal em ensaio de aglutinação / Use of monoclonal antibody for detecting Vibrio cholerae O1 in oysters by means of agglutination test

O V. cholerae sorogrupo O1 é o agente etiológico da cólera pandêmica, sendo considerado dentre os víbrios patogênicos ao homem, o mais importante. Os sintomas das infecções por esta bactéria variam de diarréia branda a doença grave podendo até levar a óbito. Dentre os alimentos marinhos, as ostras representam uma das principais vias na transmissão de cólera. Os métodos convencionais para detecção do V. cholerae O1 são laboriosos e demorados havendo, portando, a necessidade de implantar métodos rápidos, sensíveis, específicos, simples e de baixo custo. O objetivo deste estudo foi avaliar a técnica de aglutinação de partículas de látex sensibilizadas com anticorpo monoclonal (AcMo) na detecção de V. cholerae O1 em ostras, contaminadas laboratorialmente. A técnica de aglutinação com látex sensibilizado detectou 1,2x102 UFC da bactéria (diluição 1/32). As amostras de ostras utilizadas para contaminação originalmente não continham V. cholerae, mas outras bactérias foram detectadas, tais como: Proteus mirabilis, Pseudomonas spp. e outros víbrios. O presente estudo demonstrou que a detecção de V. cholerae em alimentos foi reduzida para 18 horas, considerando que pela metodologia convencional a análise é finalizada, em média, em 7 dias. O AcMo produzido apresentou uma sensibilidade eespecificidade de 100% para V. cholerae.

Resistência térmica de Salmonella enteritidis, S. Panama e S. Infantis em fórmula láctea infantil reconstituída / Salmonella enteritidis, S. Panama and S. Infantis thermal resistance in reconstituted infant milk formula

O objetivo deste trabalho foi avaliar a resistência térmica de S. Enteritidis, S. Panama e S. Infantis em fórmula láctea infantil em pó reconstituída, experimentalmente contaminada. As amostras de leite reconstituídas foram contaminadas e submetidas às temperaturas de 60º, 70º e 80ºC, em banho de imersão, por 5 minutos. A quantificação de Salmonella spp. foi realizada pela técnica do NMP (Número Mais Provável). Após o tratamento térmico a 60°C, houve um decréscimo na população de S. Enteritidis, S.Panama e S. Infantis de, em média, 5,13; 4,63 e 4,82 ciclos logarítmicos, respectivamente. Com o aquecimento a 70°C as reduções médias foram de 6,42; 5,56 e 6,56 ciclos logarítmicos, respectivamente.A 80º C não se detectou Salmonella spp. nas amostras analisadas. Por meio da análise de comparação múltipla de Tukey observou-se que não houve diferença significativa, com relação à resistência térmica,entre as três cepas de Salmonella estudadas às temperaturas de 60º C e 70ºC. Os resultados do presente estudo demonstraram que os tratamentos térmicos a 60 e 70°C/5 minutos não foram suficientes para eliminar toda população de Salmonella spp. (106 NMP/mL) inoculada na fórmula láctea infantil, demonstrando a importância dos cuidados nas etapas de preparo e manipulação desses alimentos, consideradas como pontos críticos de controle.

Occurrence of Salmonella spp and Escherichia coli O157: H7 in raw meat marketed in São Paulo city, Brazil, and evaluation of its cold tolerance in ground beef

Among foodborne diseases, salmonellosis has been considered one of the major public health problems in many countries worldwide. Escherichia coli O157:H7 has been another important foodborne pathogen due to its increasing incidence as a human disease agent and its association with various kinds of foods, especially those from animal origin. Incidence of Salmonella spp. and E. coli O157:H7 in the raw meat (bovine, swine and chicken) marketed in São Paulo - Brazil was determined in 253 samples. Twenty-three samples (9.1%) were positive for Salmonella spp. Among these, 11 different serovars were identified, and S. Enteritidis was found to be the most prevalent. All the tested samples were negative for E. coli O157:H7. Salmonella Enteritidis (the predominant serovar) and E. coli O157:H7 were also tested for their cold-temperature sensitiveness in ground beef kept under refrigeration (4ºC) for 120 days and under freezing (-18ºC) for up to 90 days. E. coli O157:H7 inoculated into ground beef was more sensible to refrigeration and freezing temperatures than S. Enteritidis, but both maintained viability under freezing condition up to 90 days

Controle de qualidade em laboratório de microbiologia de alimentos e avaliação de desempenho de meios de cultura no isolamento de salmonella ssp / Quality control in food microbiology laboratory and evaluation of performance from the culture medium in the salmonella spp isolation

Os dados de laboratório devem ser reais e confiáveis, pois orientam os sistemas de controle de patógenos aplicáveis em toda a cadeia de produção de alimentos, especialmente para os de incidência e severidade consideráveis. Dentre as bactérias patogênicas de maior interesse à saúde pública estão as do gênero Salmonella, que podem estar presentes nos alimentos em baixos números ou em estado fisiológico de stress, dificultando seu isolamento. Diversos laboratórios de pesquisa têm se preocupado com a validação de métodos analíticos para seu isolamento de detecção, avaliando a eficiência dos meios de enriquecimento e de isolamento seletivo. Com este propósito, foi desenvolvido e avaliado o desempenho de uma mistura de Salmonella Typhimurium e microrganismos competidores/interferentes (E. coli, P.mirabilis, P.aeruginosa, C.freundii e S.aureus), mantidos sob congelamento à (-) 18 C por 30 dias, a fim de referendar e validar a metodologia usada para o isolamento de salmonelas a partir de alimentos. Os resultados diários foram satisfatórios quanto à recuperação da S. Typhimurium utilizada como controle e demonstraram que é possível o preparo prévio da mistura controle. Os testes ecométricos, de seletividade e produtividade e de recupração demonstraram a adequacidade geral dos meios de cultura e tempetaturas usados nas diferentes etapas analíticas. Observou-se que o caldo Rappaport-Vassiliadis modificado apresentou melhor desempenho, por inibir a formação de véu (crescimento invasor) de Proteus nos meios sólidos usados

Botulism: a laboratory investigation on biological and food samples from cases and outbreaks in Brazil (1982-2001)

Laboratory investigation of botulism from 1982 to 2001 confirmed the occurrence of eight positive outbreaks/cases of botulism in Brazil. From those, type A botulism was observed in seven of them. Biological material of one case (serum and feces) was positive in the first step of the bioassay, but the amount of sample was not sufficient for typification. One of the outbreaks that occurred in 2001 was negative for botulinum toxin in samples of serum, gastric washing and feces, collected eight days before the onset of the symptoms in the affected person who was clinically diagnosed as presenting the disease. Other two cases presenting compatible clinical diagnoses presented negative results. However, in those cases, the collection of samples was (1) after antiserum administration or (2) later than eight days of the onset of symptoms. Investigation was performed by mouse bioassay, as described in the Compendium of Methods for the Microbiological Examination of Foods (compiled by American Public Health Association - APHA)11, using specific antiserum from Centers for Disease Control (CDC), USA

O efeito da pimenta do reino preta moída frente a contaminaçäo in vitro com salmonella rubislaw / The effect in vitro of ground black pepper on contamination with salmonella rubislaw

As especiarias e seus derivado têm sido usados no preparo de alimentos há milhares de anos, conferindo-lhes sabor e aroma diferenciados. A açäo inibitória das especiarias e seus extratos nos diferentes microorganismos tem sido relatada. O objetivo deste trabalho foi avaliar a açäo antibacteriana da pimenta do reino preta moída (Piper nigrum L.) e de seu óleo essencial frente a uma cepa de Salmonella Rubislaw. Os efeitos da pimenta e seu óleo adicionados em meios de cultura foram avaliados em dois experimentos. No primeiro foram preparados dois tipos de meio de cultura sólidos, um com 1 por cento de pimenta do reino e o outro com 1 por cento de óleo esencial diluído em etanol, adicionados de caldo tripticase de soja (TSB) e ágar. As semeaduras foram feitas em superfície de diluiçöes decimais (10-1 até 10-7) da cepa de S. Rubislaw, em fase estacionária. Após a incubaçäo a 35 graus C durante 24 a 48h, procedeu-se a contagem das colônias. No segundo experimento, 1mL da diluiçäo 10-3 da mesma cepa, em fase estacionária, foi adicionada a 100mL deTSB com o óleo diluído em etanol, para uma concentraçäo final de 100ug/mL. Após 24h de incubaçäo a 35 graus C foram realizadas contagens padräo em placas. Os resultados obtidos nos experimentos näo demonstraram efeito inibitório da pimenta do reino preta moída e de seu óleo essencial na cepa estudada

Spices and their derivatives have been used in food housekeeping for thousands of years,bringing about differentiated flavor and aroma. Inhibitory action of the spices and their extracts on thedifferent microorganisms has been reported. The objective of this work was to evaluate the antibacterialaction of the ground black pepper (Piper nigrum L.) and of its essential oil on Salmonella Rubislaw strainculture. The effect of the pepper and its oil addition in culture medium was evaluated in two experiments.In the first one two types of solid culture medium had been prepared, one with 1% of ground black pepperand the other with 1% ethanol oil solution, added to broth tripticase soy (TSB) and agar. Sowings ofdilutions (10-1 up to 10-7) of the Salmonella strain, in stationary phase had been made in agar surface. Afterincubation at 35ºC for 24/48h, standard count method was carried out. In a second experiment, 1mL of thesame strain dilution 10-3, in stationary phase, was added to 100ml of TSB with the oil diluted in ethanol, toa final concentration of 100µg/mL. Standard count was carried out after 24h of incubation at 35ºC. Theresults gotten in the experiments had not demonstrated inhibitory effect of the ground black pepper and itsessential oil for the studied strain

Qualidade microbiológica do leite tipo "C" pasteurizado, comercializado em Joäo Pessoa, Paraíba / Microbiological quality of type C pasteurized milk marketed in Joäo Pessoa, Paraíba

Durante o período de março à outubro de 1992, 64 amostras das duas marcas de leite tipo "C" pasteurizado comercializadas em Joäo Pessoa, Paraíba, foram coletadas no comércio varejista e submetidas à contagem padräo de placas de microorganismos mesófilos, psicotróficos (UFC/mL), número mais provável de coliformes totais e fecais (NMP/mL). Os resultados mostraram valores médios de 51 x 1000; 14 x 1000; 52,3; 7,75 e 33 x 1000; 17 x 1000; 20,2; 2,0 respectivamente para bactérias mesófilas e psicrotróficas, coliformes totais e fecais das marcas A e B. O teste näo paramétrico de Mann-Whitney demonstrou que só havia diferença significativa entre as amostras com relaçäo a coliformes totais. Os resultados evidenciaram a ocorrência de nenhuma amostra fora dos padröes estabelecidos pelo Ministério da Saúde (Port. 01/87), para microorganismos mesófilos. Por outro lado, observou-se que 21 (65,63 por cento) e 10 (31,25 por cento) das amostras analisadas para cada marca, apresentam-se contaminadas por coliformes totais e 11 (34,35 por cento) e 02 (6,25 por cento), contaminadas por coliformes fecais. As 9 cepas de bacilos esporulados analisados foram designados nas espécies de Bacillus subtilis var, Bacillus sphaericus.

Estudo da ocorrência de contaminaçäo orgânica no estuário de Cananéia-SP, Brasil, como subsídio para a extraçäo, manejo e cultivo da ostra do mangue Crassostrea brasiliana: avaliaçäo da qualidade da água / Study of the occurence of organic contamination in the Cananéia-Säo Paulo estuary, Brasil, as subsidy for the extraction, handling and cultivation of the oyster of the swamp Crassostrea brasiliana: evaluation of water quality

Foram selecionados quatro pontos de coleta, no litoral sul do Estado de Säo Paulo, na cidade de Cananéia, para avaliar a qualidade da água, como subsídio para a extraçäo, manejo e cultivo de ostras: Porto Cubatäo, mais próximo dos locais de despejo de esgoto; Retiro, o mais distante; Boacica e Itapitangui, os dois pontos próximos à barra dos rios de mesmo nome. Foram coletadas amostras mensais em cada um dos pontos, com variaçöes entre os meses, no período compreendido entre 1995 e 1997. As amostragens foram aleatórias, no que se refere à maré. Os resultados obtidos foram analisados com relaçäo a possíveis variaçöes sazonais e a pluviosidade acumulada no período imediatamente anterior à coleta. Com exceçäo do ponto próximo da descarga de esgoto que apresentou níveis significativos de contaminaçäo durante todo o período avaliado, os demais apresentaram variaçöes sazonais, com tendência à reduçäo nos meses mais frios e menos chuvosos e aumento quando das precipitaçöes pluviométricas, com base nos dados obtidos, recomenda-se que o valor e utilidade do parâmetro de limite de coliformes deve ser discutido e reavaliado para a seleçäo de áreas marinhas com a finalidade de captaçäo, manejo e criaçäo de moluscos bivalves.

Estudo da radiosensibilidade ao 60CO do Vibrio cholerae O1 incorporado em ostras / Radiosensibility of Vibrio cholerae O1 incorporated in oysters, to 60 CO

Objetivo: Avaliar a eficiência da radiaçäo ionizante por 60CO na eliminaçäo de Vibrio cholerae O1, El Tor Ogawa, näo-toxicogênico, incorporados laboratorialmente em ostras vivas da espécie Crassostrea brasiliana. Método: Foram selecionadas amostras de ostras provenientes de Cananéia (litoral sul de Säo Paulo, Brasil), as quais foram contaminadas com Vibrio cholerae e irradiadas com doses de 0,5 kGy e 1,0 kGy. Resultados: Foram observadas diminuiçöes significativas do número inicial do microrganismo indicado: 3,4.107 para 103 e 102, respectivamente. Os valores de D10 correspondentes foram de 0,173 a 0,235. Conclusäo: Adotando-se o fator 6 como nível de segurança, conclui-se que a dose de irradiaçäo de 1,41 kGy é necessária para eliminar números elevados de células viáveis de V. cholerae em ostras. Os experimentos foram realizados com os controles respectivos

Calidad de la miel de abejas y estándares de control: revisión realizada por la comisión internacional de la miel: sugerencias para las normas venezolanas / Quality of bee honey and standard of control: revition realized with International Comition of Honey: suggestions for the venezuelan norm

Los estándares internacionales de la miel de abejas especificados en una Directiva Europea de la Miel y en los Estándares para Miel del Codex Alimentarius, se encuentran en revisión. En este trabajo se discute el conocimiento actual de los diferentes criterios de calidad de la miel. Los borradores de trabajo son los documentos de referencia para la revisión de los estándares y de los métodos sugeridos para determinar los siguientes factores de calidad: humedad, cenizas, acidez, hidroximetilfurfural, azúcares reductores, sacarosa aparente, actividad diastásica y sólidos insolubles en agua. Durante los pasados 30 años se han publicado pocos trabajos sobre contenido de azúcares reductores y cenizas en mieles; siendo los azúcares específicos y la conductividad eléctrica más utilizados. Basados en esta información, se proponen estándares internacionales de la miel basados en la suma del contenido de glucosa y fructosa, de sacarosa y la conductividad eléctrica. Además, se discute el uso de otros factores de calidad de la miel, como actividad de la invertase; prolina y rotación específica; utilizados en numerosos países. Finalmente, se presentan sugerencias para actualizar las normas venezolanas para control de calidad de miel de abejas

Salmonella: determinaçäo de sorotipos e resistência a agentes antimicrobianos de cepas isoladas de carcaças de frango comercializadas na regiäo de Säo José do Rio Preto - SP / Salmonella: serotyping and antimicrobial susceptibility patterns of strains isolated from chickem carcasse samples commercializede in the Säo José do Rio Preto area - SP

De abril de 1995 a dezembro de 1996, foram estudadas 160 amostras de carcaças de frango, comercializadas na Regiäo de Säo José do Rio Preto - SP. Foram determinados os sorotipos e perfis de sensibilidade aos agentes antimicrobianos de todas as cepas de Samonella isoladas. Das carcaças analisadas, 54,38(por cento) estavam contaminadas por Samonella. Foram identificados 18 diferentes sorotipos, dentre os quais Samonella Enteritidis correspondeu a 59,77(por cento). Verificou-se que 13,79 (por cento) das cepas de Samonella apresentaram resistência aos agentes antimicrobianos testados. Os resultados obtidos demonstraram o alto índice de contaminaçäo por Samonella em carne de frango. Considerando o consumo de alimentos de origem animal, principalmente de aves, por um grande número de pessoas, este fato possivelmente tem propiciado a ocorrência de numerosos surtos por S. Entidades na nossa regiäo, nos últimos anos

Observaçöes laboratoriais sobre surtos alimentares de Salmonella sp, ocorridos na Grande Säo Paulo, no periódo de 1994 a 1997 / Laboratorial observation about foodborne salmonellosis outbreaks in Great Säo Paulo city, from 1994 to 1997

As enfermidades transmitidas por alimentos (ETAs) causadas por salmonela säo consideradas um dos mais importantes problemas de Saúde Pública, tanto nos países em desenvolvimento como em países desenvolvidos. Significativos aumento no número de surtos por S. Enterititidis tem sido observado na Grande Säo Paulo desde 1994. Foram relatados no período de outubro de 1994 a junho de 1997, 18 surtos de ETAs causadas por Samonella envolvendo 23 alimentos, sendo que em 13 (72,2 por cento) surtos foram identificados Salmonella Enteritidis. Os alimentos envolvidos foram predominantemente de origem animal, em especial ovos e seus derivados. O método analítico empregado foi uma modificaçäo do descrito no "Compendium of Methods for the Microbiological Examination of Foods", APHA. A relevância e a gravidade deste microrganismo como agente de ETA é discutido neste trabalho

Surtos de enfermidades transmitidas por alimentos causados por Salmonella Enteritidis / Food borne disease outbreaks caused by Salmonella Enteritidis

Säo descritos surtos de salmonelose notificados no período de julho de 1993 a junho de 1997 na regiäo Noroeste do Estado de Säo Paulo, Brasil, tendo em vista os vários surtos de veiculaçäo alimentar ocasionados por Salmonella nessa regiäo. Foram obtidos 19 inquéritos epidemiológicos para análise de dados, 87 amostras de fezes e 38 amostras de alimentos, incluindo 12 de ovos para análise microbiológica. Cepas de Salmonella foram submetidas a sorotipagem, fagotipagem e teste de sensibilidade a 13 agentes antimicrobianos. Foram acometidas 906 pessoas com 295 hospitalizaçöes. Cepas de Salmonella Enteritidis Fagotipo 4 foram isoladas de 80,5 por cento das coproculturas, de todas amostrasd de alimentos e de 41,7 por cento dos ovos. Em 22 (95,7 por cento) surtos a salmonela foi veiculada por alimentos contendo ovos crus ou semicrus. Os testes de sensibilidade a antimicrobianos revelaram sensibilidade à maioria das cepas. Considerando os resultados obtidos, torna-se necessária a implantaçäo e intensificaçäo de medidas de controle na produçäo e armazenamento dos ovos, além da orientaçäo à populaçäo quanto aos risco no consumo inadequado desse alimento

Comparaçäo entre os caldos de enriquecimento "Tryptic soy" com 10 por cento de cloreto de sódio e giolitti-cantoni usados na determinaçäo de estafilococcus coagulase positiva em alimentos / Comparison of Tryptic soy Broth with 10 per cent salt and Giolitti-Cantoni Broth used in determination of coagulase positive staphylococci in foods

Foi comparada a eficiência entre dois meios de cultura: Tryptic Soy Broth com 10 por cento de cloreto de sódio (TSBS) e Giolitti-Cantoni Broth(GC) na detecçäo de Staphylococcus aureus em alimentos näo processados e processados térmicamente; portanto, passíveis de conter células injuriadas pelo calor e/ou pequena quantidade de microorganismos. A técnica utilizada foi a do Número Mais Provável, favorecendo a recuperaçäo do Staphilococcus aureus. O meio GC, além de suas substâncias enriquecedoras, apresenta um sistema inibitório mais acentuado que o TSBS, sendo constituído por cloreto de lítio, telurito de potássio combinado com glicina e condiçäo anaeróbica dada pela adiçäo de vaselina líquida sobre o meio já inoculado. Com essas propriedades o mesmo apresentou maior capacidade de recuperaçäo de S. aureus, como também obteve menor número de falsos positivos, quando comparado com o TSBS