Avaliacão da importância da coloracão de Perls na rotina de mielogramas de pacientes com anemia associada a uma ou mais citopenias em sangue periférico / Evaluation of the importance of Perls stain in the routine testing of myelograms of patients with anemia associated with one or more peripheral blood cytopenias

As síndromes mielodisplásicas (SMD) são um grupo heterogêneo de doencas malignas das células-tronco hematopoéticas, classificadas segundo a Organizacão Mundial da Saúde (OMS) em: anemia refratária, anemia refratária com sideroblastos em anel, citopenia refratária com displasia de multilinhagens, anemia refratária com excesso de blastos, síndrome mielodisplásica inclassificável e sindrome mielodisplásica associada com anormalidade isolada do cromossomo 5q(del). Na anemia refratária com sideroblastos em anel observam-se hiperplasia e displasia eritróide com presenca de 15 por cento ou mais de sideroblastos em anel. Utilizamos neste estudo a coloracão de Perls em esfregacos de medula óssea de pacientes com idade superior a 40 anos e que apresentavam uma ou mais citopenias no sangue periférico associada a anemia. Por tratar-se de técnica de manejo fácil e ágil sugerimos seu emprego em esfregacos de aspirado de medula óssea de pacientes que apresentem os achados laboratoriais acima, pois, dentre os casos analisados 18,7 por cento apresentavam mais que 10 grânulos sideróticos circundando a terca parte ou mais do núcleo do precursor eritróide (sideroblasto em anel), sugerindo ao hematologista um possível diagnóstico de Síndrome Mielodisplásica com Sideroblastos em Anel (SMD-ARSA). Importante relatar que a grande maioria destes casos com aumento de sideroblastos em anel não foi encaminhada ao nosso servico, com suspeita de SMD, e em somente um caso foi solicitada a realizacão da coloracão de Perls.

Leucemia promielocítica aguda: caracterizacão de alteracões cromossômicas por citogenética tradicional e molecular ( FISH ) / Acute promyelocytic leukemia: characterization of chromosome abnormalities by classical cytogenetics and FISH

A leucemia promielocítica aguda (LPA) corresponde a 10 por cento -15 por cento das leucemias mielóides agudas (LMA). Este tipo de leucemia (LMA-M3 de acordo com a classificacão FAB) está associado, em cerca de 90 por cento dos casos, à translocacão t(15;17)(q22;q21), que resulta na fusão dos genes PML e RARalfa. A análise citogenética tradicional tem sido utilizada para confirmar o diagnóstico morfológico da LPA. Embora a t(15;17) não seja detectada em outros tipos de leucemia, podem ocorrer resultados "falso-negativos", decorrentes da análise de células que não pertencem ao clone neoplásico, da dificuldade de visualizacão da translocacão ou, até mesmo, da existência de rearranjos crípticos que mascaram a translocacão. Por outro lado, foram descritas alteracões cromossômicas alternativas em pacientes com LPA e, nesses casos, o tratamento com ATRA não é eficaz. No período de julho de 1993 a dezembro de 2002 foram encaminhados para análise citogenética 47 casos com suspeita e/ou diagnóstico clínico-morfológico de LPA. Trinta e quatro pacientes (72,3 por cento) apresentaram a t(15;17), detectada pela citogenética tradicional e/ou molecular. Em seis destes pacientes foram observadas alteracões cromossômicas adicionais ou rearranjos envolvendo um terceiro cromossomo. Em cinco (10 por cento) pacientes com características de LPA, a técnica de FISH não revelou a fusão PML/RARalfa, dado importante para a orientacão do diagnóstico e da conduta terapêutica desses pacientes. O presente trabalho foi realizado com o objetivo de avaliar a importância da análise citogenética tradicional e molecular no diagnóstico de pacientes com LPA.

Mieloma Múltiplo: 50 casos diagnosticados por citometria de fluxo / Multiple Myeloma: 50 cases diagnosed by flow cytometry

O Mieloma Mútiplo é uma doença de evolução heterogênea, na qual a maioria dos pacientes recai muito precocemente após o tratamento. Nesse contexto, o objetivo principal deste trabalho é relatar diferentes estratégias de análise do mieloma por citometria de fluxo e sua importância na associação com citogenética no diagnóstico de doença residual. Entre 2.450 casos de doenças onco-hematológicas estudados, de setembro de 1993 a agosto de 2004, foram diagnosticados 50 (2,0 por cento) Mieloma Múltiplo. Foram feitas análises morfológicas e, até o ano de 2000, as imunofenotipagens foram realizadas no citômetro de fluxo XL-MCL (Coulter) pela estratégia tamanho/complexidade, utilizando os anticorpos monoclonais CD19, CD20, CD38, CD45, CD56, HLA-DR, kappa e lambda de superfície e intracitoplasmáticas. A partir de 2001 passaram-se a utilizar painéis seqüenciais através do histograma CD138/Complexidade e anticorpos monoclonais CD19, CD38, CD56, CD117, kappa e lambda intracitoplasmáticas. Mais recentemente foram incluídos no painel os anticorpos CD45, HLA-DR e CD33. A análise do DNA foi realizada por citometria com auxílio do programa Multicycle em nove amostras, sendo que sete apresentaram população aneuplóide. O cariótipo com banda G foi realizado em 25 casos, e a pesquisa de deleção do 13q por FISH em 15. Alterações cromossômicas foram encontradas em 4 casos, sendo duas deleções de 13q confirmadas por FISH. A mudança na estratégia de gates associada à citogenética e ao estudo da cinética do ciclo do DNA permitem melhor identificação de células plasmáticas anômalas, avaliação do prognóstico e detecção de doença residual.

Quantificação de células CD 34+ em sangue periférico, produto de aférese e cordão umbilical: estudo comparativo de três diferentes metodologias / Quantification of CD34+ cells in peripheral blood, leukapheresis products and cord blood: a comparative study of three different cytometric methodologies

A quantificação das células CD34+ em sangue periférico é utilizada para determinar o melhor momento de iniciar a aférese, enquanto que na leucoaférese e no sangue de cordão umbilical determinam a quantidade de células CD34+ para o transplante de células progenitoras. O objetivo deste trabalho foi comparar três diferentes metodologias de quantificação de células CD34+. Foram utilizados três diferentes tipos de amostras: a) 32 amostras de sangue periférico, coletadas de pacientes estimulados com G-CSF 50 µg/Kg/dose total, sem quimioterapia na mobilização. b) 31 amostras de produto de aférese de pacientes estimulados com o mesmo protocolo de G-CSF. c) 20 amostras de sangue de cordão coletadas em CPDA-1, por punção de veia umbilical. As amostras permaneceram à temperatura ambiente no máximo até 24h da análise. O citômetro de fluxo utilizado foi o Epics XL-MCL (Coulter) com os protocolos de dupla plataforma: ISHAGE e Mulhouse modificado para análise de maior numero de eventos, e o citômetro Imagn 2000 (Biometric Imaging) de plataforma única, conforme técnicas recomendadas. Os anticorpos monoclonais utilizados foram: CD45-FITC, CD34-PE, e isotipo IgG1-PE da Immunotech. As análises estatísticas foram: ANOVA e correlação de teste t de Student. Os resultados não apresentaram diferenças estatisticamente significativas nos três métodos

CD34 cell quantification in peripheral b lood is useful to determinate the best moment to begin apheresis while, when applied in leukapheresis products and umbilical cord blood it is important to establish the total number of CD34+ in stem cell transplantation. We aimed at comparing three different methodologies of CD34+ cell quantification. Three different blood products were analyzed: a) peripheral blood samples from 32 patients collected using EDTA, mobilized without previous chemotherapy and with G-CSF 50 mcg/Kg/total: b) 31 leukapheresis samples obtained using a CS 3000 (Baster) cell separator; c) 20 cord blood samples collected using umbilical venipuncture. All samples were maintained at room temperature and analyzed until 24h after collection by three different methods: double platform protocols ISHAGE, a Mulhouse modified (for analysis of a bigher number of events) applied in a Epics XL flow cytometer (Coulter) and a single platform for a fixed volume cytometer IMAGN 2000 (Biometric Imaging) according to manufacturer instructions. Monoclonal antibodies used were:CD 45-FITC, CD 34-PE and IgC1-PE, isotype control (Immunotech, Marseille, FR). Statistical analysis was made using ANOVA and T Student test. Results showed no statistical differences (p

Anemia ferropriva na mulher em idade fértil / The iron deficiency anemia among women ina reproductive age

Este trabalho é o resultado de um estudo realizado no Centro de Hematologia de Säo Paulo, no período de dezembro de 1995 à julho de 1996 em 32 pacientes, mulheres em idade fértil e portadoras de Anemia Ferropriva. Foram levantados dados quanto à idade, procedência, tempo de presença da anemia, resposta terapêutica, sintomalogia, alimentaçäo, duraçäo e tipo de menstruaçäo, papel do mioma, impacto da menstruaçäo sobre a atividade laborativa, resultado do tratamento e análise dos exames laboratoriais. Os nossos resultados revelam: mulheres com idade média de 40 anos por ocasiäo da primeira consulta no Centro de Hematologia de Säo Paulo, procedentes na maioria do Estado de Säo Paulo, näo havendo diferença na taxa de hemoglobina em relaçäo ao tempo anterior à consulta no Centro de Hematologia de Säo Paulo com anemia. Além do cansaço, fraqueza, sonolência e queda de cabelos presentes em mais de 80 por cento dos casos, chama à atençäo a pica em 40 por cento, das pacientes principalmente com o hábito de comer arroz cru e mastigar gelo. A alimentaçäo era adequada e a menstruaçäo aumentada, tanto em dias de duraçäo como pela presença de coágulos. O mioma estava presente em quase metade dos casos e o ginecologista sugere com freqüência a histerectomia. Em nenhum destes casos foi feito tratamento cirúrgico. A terapêutica com sais de ferro apresentou bons resultados com melhora da sintomatologia. Os exames apresentaram anemia hipocrômica microcítica, e o estudo do metabolismo do ferro, a carência deste elemento. O mais importante foi a resposta terapêutica à medicaçäo com aumento da hemoglobina em 2,0g/dl em 4,9 meses e cifras ao redor de 12,5g/dl em seis meses. Em sete casos, devido às reaçöes adversas ao ferro oral foi administrado ferro endovenoso, com bons resultados. O trabalho permitir concluir que a Anemia Ferropriva grave das mulheres, por menstruaçäo abundante, pode ser controlada clinicamente e seu tratamento deve ser contínuo, e prolongado até a menopausa.

Trombocitopenias: diagnóstico diferencial e evoluçäo / Thrombocytopenia: differential diagnosis and evolution

O objetivo do presente estudo foi constatar a prevalência de trombocitopenia na populaçäo de doenças hematológicas, o diagnóstico diferencial, a conduta terapêutica e a evoluçäo clínica. Foram estudados 191 pacientes adultos, trombocitopênicos atendidos no CHSP, de janeiro a julho de 1997, com estudos retrospectivos e prospectivo, de 65 homens e 126 mulheres. Nestes pacientes, além do hemograma, plaquetas e hemossedimentaçäo, foram realizados exames subsidiários que permitiram determinar a doença básica. Foram excluídos as trombocipenias relacionadas a colagenoses, leucemias agudas e quimioterapia anti neoplásica, além das decorrentes de erro de laboratório ou artefato. Os dados revelam que o diagnóstico de Púrpura Trombocitopênica Idiopática é freqüente; a evoluçäo é crônica e a cura pouco provável, mas o controle permite ao paciente levar vida praticamente normal. Näo se utilizou doses elevadas de prednisona, immunoglobina e esplenectomia. Nos pacientes sem diagnóstico e em acompanhamento, a hipótese mais provável é de que a faixa da normalidade é variável por questäo. A presença de hepatopatia englobando hepatite crônica por vírus B e C chama a atençäo pela sua freqüencia em serviços de hematologia. As doenças hematológicas associadas, habitualmente mielodisplasias, tiveram seu diagnóstico confirmado por mielograma e/ou biópsia de medula óssea. A presença de trombocitopenia em pacientes com vírus da Imunodeficiência Humana na maioria dos casos assintomáticos, obriga a inclusäo do teste para o HIV nos pacientes trombocitopênicos assintomáticos. O trabalho pretende demonstrar, que a trombocitopenia é uma situaçäo freqüente na prática hematológica. Os pacientes evoluem com vida normal na maioria dos casos, dependendo da doença de base, e o controle é relativamente simples na Púrpura Trombocitopênica Idiopática.