Diagnóstico de distrofia muscular de Duchenne mediante análisis del ácido desoxinucleotico y su aplicación en la prevención

Se define una estrategia para la prevención en Cuba de la distrofia muscular de Duchenne (DMD), una de las enfermedades hereditarias letales más frecuentes, y se evalúan la factibilidad de su aplicación y los problemas que pudieran dificultar su implantación al nivel nacional. La estrategia se basa fundamentalmente en la necesidad de detectar las familias afectadas, la definición de las mujeres portadoras o en riesgo de serlo y el estudio molecular de los miembros de interés con anterioridad al ofrecimiento de los servicios de diagnóstico prenatal mediante análisis directo -detección de deleciones en el gen DMD mediante reacción en cadena de la polimerasa (PCR) o análisis indirecto- empleo de los marcadores denominados polimorfismos en la longitud de los fragmentos de restricción (RFLPs) en análisis de ligamento. Se concluye en que la aplicación de esta estrategia es factible y conveniente, pues permite ofrecer el diagnóstico prenatal al 75 % de las mujeres portadoras. Su eficiencia en la prevención del nacimiento de nuevos enfermos DMD se demuestra en 2 diagnósticos prenatales realizados, uno de los cuales detectó un embarazo afectado que fue interrumpido por solicitud de los padres.

A strategy is defined for the prevention in Cuba of the Duchenne's muscular dystrophy (DMD), one of the most frequent lethal hereditary diseases, and the feasibility of its application, and the troubles that might difficult its implantation at a national level, are evaluated. This strategy is mainly based on the need of detecting the affected families, the definition of the carrier women, or the women at risk of being carriers, and the molecular study of the members of interest with anteriority to the offering of prenatal diagnosis services by direct analysis -detection of DMD gen deletions by (PCR) polymerase chain reaction, or indirect analysis-, use of the markers called polymorphisms in the length of the restriction fragments (RFLPs) in ligament analysis. It is concluded that the application of this strategy is feasible and convenient, since it allows offtering a prenatal diagnosis to the 75 % of the carrier women. Its efficiency in the prevention of births of new DMD ill newborns is showed in two prenatal diagnosis, one of which detected an affected pregnancy, interrupted due to the parents'solicitude.

Diagnóstico molecular del Síndrome X Frágil en un grupo control y miembros de 3 familias afectadas

El síndrome X frágil constituye la forma de retraso mental hereditario más frecuente con una incidencia de 1 en 1 500 varones y de 1 en 2 500 hembras; es causado por mutaciones que aumentan el tamaño de un fragmento de ácido desoxinucleótico (DNA) específico en la región Xq 27.3 del cromosoma X. Se presenta el resultado en la introducción y aplicación de la sonda molecular StB12.3 en un grupo control y en miembros afectados de 3 familias. Se exponen las radiografías de los Southern blot que exhiben los patrones diagnósticos posibles a obtener. Esta metodología es mucho más directa, eficiente y confiable para el diagnóstico y prevención de esta forma de retraso mental.

The fragile X syndrome is the most frequent form of hereditary mental retardation, with an incidence of 1 in 1 500 males, and 1 in 2 500 females; it is caused by mutations that increase the size of a fragment of specific desoxinucleotic acid (DNA) in the Xq 27.3 region of the X chromosome. The outcome in the introduction and application of the StB12.3 molecular probe in a control group and in affected members of three families, is presented. The x-rays of the Southern blot that show the diagnosis patterns possible to obtain, are exposed. This methodology is more direct, effective and reliable for the diagnosis and prevention of this form of mental retardation.

Disgenesia gonadal pura con cariotipo 46, XY/45, X/46, XX / Pure gonadal dysgenesis with karyotype 46, XY/45, X/46, XX

Presentamos una paciente con fenotipo femenino sin malformaciones turnerianas, amenorrea primaria, talla normal, infantilismo sexual, hipoplasia de genitales internos y streak gónadas, en la que se hizo el diagnóstico de disgenesia gonadal pura. Su fórmula cromosómica fue 46,XY/45,X/46,XX. No hemos encontrado en la literatura ninguna observación de disgenesia gonadal pura con este cariotipo. Se hace una breve revisión bibliográfica del tema

Trisomia parcial 10 q en la leucemia no linfoblastica aguda (LNLA-M1) / Partial trisomy 10 q in acute non-lymphoblastic leukemia (ANLL-M1)

Se estudió un paciente del sexo masculino de 16 años de edad proveniente del Servicio de Hematología. El análisis cromosómico con técnicas de bandas GTG (10) se realizó en preparaciones directas de médula ósea y en cultivos a corto plazo. Se utilizó 1 mL de material medular extraido por punción de cresta iliaca, al cual se le añadió medio de cultivo RPMI 1640 (Gibco), 10 % de suero fetal bovino (Gibco)-liquemine (Roche). Posteriormente las células se encubaron a 37-C con colcemid 0,05 */mL (Gibco) durante 30 min (en las preparaciones directas), y 1 hora (en los cultivos a corto plazo). El análisis citogenético mostró la presencia de 3 líneas celulares con un rango cromosómico entre 46 y 48 cromosomas. Además, aparecen reordenamiemtos estructurales complejos, representativos de 3 clones celulares, indicadores todos de mal pronóstico, lo cual se confirmó en la evaluación del paciente

Micrométodo para el estudio citogenético de poblaciones celulares in vitro / Micromethod for the cytogenetic study of cell populatios in vitro

Se comprobó la aplicación del micrométodo citogenético para el estudio cromosómico de poblaciones celulares hematopoyéticas, originalmente desarrollado por Amenomori et al. (1985) en cultivos de metilcelulosa y se demostró la ampliación de la aplicación del método en células no hematopoyéticas en suspensión y adherentes a partir de cultivos líquidos. Se obtuvo un número óptimo de metafases analizables en los estudios de: a) células progenitoras hematopoyéticas de médula ósea, en cultivo, de una paciente con leucemia mieloide crónica en crisis blástica, que dió como resultado las alteraciones cromosómicas 47XX,+ 8,t (9,22), i (17 q), comunes en esta fase de la enfermedad; b) células de sangre periférica, en cultivo, de una paciente con trasplante de médula ósea, en el que se comprobó con el gonosoma Y, la implantación de las células del donante a los 21 días de trasplantada; c) 3 líneas celulares K-562, SKO-007 y GL-G, con lo que se logró la caracterización citogenética de todas con la consiguiente determinación del número modal en cada una de ellas y la presencia de cromosomas marcadores

Cultivo in vitro de células de médula ósea humana en medio semisólido de metilcelulosa / Culture in vitro of human bone marrow cells in methylcellulose semisolid medium

Se cultivaron células de médula ósea humana en metilcelulosa, sobre la base de la técnica de Iscove et al. Se informa que las células se aislaron con un gradiente de densidad Ficoll-Telebrix y se sembraron en placas de 35 mm durante 15 dias. Se señala que como factor estimulador de colonias se utilizaron 0,25 mL de sobrenadantes de células mononucleadas de sangre periférica normal, estimuladas con fitohemaglutinina. Se comprueba la efectividad del método desarrollado en los cultivos de médula de pacientes con diferentes trastornos hematológicos. Se observa la aparición de agregados al quinto día de cultivo. Las colonias identificadas como granulopoyéticas, macrófagas o ambas inclusive se contaron a los 12 días; el número de éstas varió de acuerdo con la enfermedad estudiada