Produção de xilanases por fermentação em estado sólido de farelo de trigo utilizando consórcios fúngicos / Production of xylanases by solid state fermentation of wheat bran using fungal consortia

A fim de se agregar valor ao resíduo farelo de trigo gerado em indústrias do setor alimentício avaliou-se, no presente trabalho, o potencial deste subproduto como substrato para produção de enzima xilanase no cultivo em estado sólido, utilizando consórcios fúngicos bem como os fungos Aspergillus oryzae CCT nº 0975 (ATCC9362) eTrichoderma reesei CCT nº 2768 - QM 9414. Para tanto utilizou-se o farelo de trigo, não lavado e não autoclavado, como fonte de carbono e energia na fermentação em estado sólido pelo fungo Aspergillus oryzae que apresentou maior produção do percentual de proteína nas 72 horas de cultivo. Depois de realizado um Delineamento Composto Central Rotacional (DCCR) - planejamento fatorial 23,com três repetições no ponto central e seis pontos axiais - partiu-se para otimização dos fatores que foram considerados significativos no processo: umidade, pH e granulometria. Os fatores foram considerados significativos pela A NOVA com o nível de 95% de confiança e com o resultado otimizado de atividade enzimática de (1.84 ± 0.01) UI/mL utilizando pH 3,3, granulometria de 900,0 µm e umidade de 40%. O caldo enzimático obtido foi considerado eficiente na modificação de tipificação de farinhas de trigo pelo estudo dos parâmetros reológicos do falling number e alveografia sendo estável por cerca de 3 meses

This study aimed to find alternatives for wheat bran disposal destination generated in food industry sector,thus contributing to the reduction of the resultant impact of residue depo-sition in the environment. The poten-tial of the wheat bran as a substrate for xylanase production by solid-state fermentation using fungal con-sortiums as well as Aspergillus ory-zae (ATCC9362) and Trichoderma reesei (2768) was valued. The use of non-washed and non-autoclaved wheat bran as carbon and energy source in solid-state fermentation by A. oryzae fungus showed greater per-centage of produced protein after 72 h of cultivation. The use of a central composite rotatable design(CCRD), 23 factorial planning with three rep-etitions at the central point as well as six axial points, coupled with Sur-face Response Methodology (SRM) allowed to assay the influence of hu-midity, pH, and grain size (indepen-dent variables or factors) on the xy-lanase activity(dependent variable or response) as well as to optimize the best conditions for the enzyme production. The results showed that all factors and their combinations were significant at 95% confidence level. The optimized xylanase activi-ty was (1.84 ± 0.01) UI/mL, obtained at 40% humidity and pH 3.3 with a grain size of 900.0 µm. The produced broth was stable for 3 months and approximately had 50% of the initial xylanase activity at 4°C. SDS-PAGE assay showed that xylanase has 30 kDa molar mass. The obtained en-zymatic broth was efficient to modify wheat flours as shown by the falling number rheologic parameters and alveography assay

Influence of culture medium on the production of eif antigen from Leishmania chagasi in recombinant Escherichia coli

With the advent of recombinant DNA technology, recombinant protein expression has become an important tool in the study of the structure, function and identification of new proteins, especially those with therapeutic functions. Escherichia coli has been the predominant prokaryote used in genetic engineering studies due to the abundance of information about its metabolism. Despite significant advances in molecular biology and immunology of infections, there are as yet no prophylactic drugs capable of preventing visceral leishmaniasis. It is therefore important to identify specific antigens in order to develop vaccines and diagnostic kits against this disease. The objective of this study was to evaluate the influence of culture medium on the production of eIF antigen from Leishmania chagasi in recombinant Escherichia coli. An induction procedure using IPTG was carried out in a series of trials, to observe the influence of culture medium (2xTY, TB) under expression of the recombinant eIF protein. Results showed that recombinant protein expression was associated to growth and that the highest eIF antigen expression was obtained in the 2xTY medium.

Chitosanase production by Paenibacillus ehimensis and its application for chitosan hydrolysis

The chitosanase production by Paenibacillus ehimensis was studied in submerged cultures and the chitosan hydrolysis was evaluated by using these enzymes without purification. The bacterium produced inducibles enzymes after 12 h of growth in a culture medium containing 0.2 percent (w/v) of soluble chitosan as carbon source. The enzyme production was strongly repressed by the presence of glucose. The production started as soon as the available sugars finished in the culture medium. The maximum level of chitosanase activity was 500 U.L-1 at 36°C after 36 h incubation. The crude enzyme was optimally active at pH 6.0 and 55°C and in these conditions, the enzyme presented good stability (6 days). The enzyme without purification was used to hydrolyze the chitosan which resulted chitooligosaccharides between 20 and 30 min of reaction.

A produção de quitosanases pelo Paenibacillus ehimensis foi estudada em culturas submersas e a hidrólise da quitosana foi realizada utilizando essas enzimas sem purificação. As enzimas foram obtidas após 12 horas de crescimento desta bactéria em meio de cultivo contendo 0,2 por cento (p/v) de quitosana solúvel como fonte de carbono. A produção das enzimas foi fortemente reprimida na presença de glicose, sendo obtida após o consumo total dos açúcares disponibilizados no referido meio de cultivo. A máxima atividade quitosanolítica foi obtida após 36 horas de cultivo a 36ºC, atingindo valores de 500 U.L-1. As enzimas utilizadas no extrato bruto apresentaram melhores atividades quando submetidas a condições de pH e temperatura de 6,0 e 55ºC, respectivamente, e nessas condições permaneceram estáveis durante 6 dias. Essas enzimas sem serem submetidas aos processos de purificação foram utilizadas para hidrolisar a quitosana, obtendo os quito-oligossacarídeos entre 20 e 30 minutos de reação.

Kinetic analysis of in vitro production of wild-type Spodoptera frugiperda nucleopolyhedrovirus

In this study, the kinetic behavior of Sf9 and Sf21 cells used in the production of a baculovirus biopesticide to control the pest of corn Spodoptera frugiperda was analyzed. Kinetic variables such as maximum specific growth rate, cell productivity, mean rate of infection, as well as the mean rate of occlusion body production were determined during the infection of these cell-lines with the extracellular virus of the S. frugiperda nucleopolyhedrovirus (SfMNPV). The Sf9 cell-line resulted in better viral production results (5.0 x 10(8) OB/mL) than the Sf21 cell-line (2.5 x 10(8) OB/mL).

Neste trabalho, analisou-se o comportamento cinético das células Sf9 e Sf21 utilizadas na produção de biopesticida para o controle de Spodoptera frugiperda. Variáveis cinéticas, como velocidade específica máxima de crescimento, produtividade em células, velocidade média de infecção e a velocidade média de produção de OB foram determinadas durante a infecção destas linhagens com o vírus extracelular do nucleopoliedrovirus de S. frugiperda. A linhagem Sf9 resultou em melhores resultados de produção do baculovírus (5 x 10(8) OB/mL), quando comparada à linhagem Sf21 (2,5 x 10(8) OB/mL) e outras linhagens da literatura.

Caracterização do soro de queijo visando processo de aproveitamento / Caracterização of the serum of cheese aiming at process of utilization

O queijo é um dos derivados do leite mais produzidos e consumidos em quase todos os países do mundo, tendo na sua produção a eliminação do soro, sendo este soro portador dos mais valiosos nutriente do leite do ponto de vista qualitativo; é composto de lactose, proteínas, gordura, ácido láctico, sais minerais e vitaminas. A superioridade nutricional das proteínas do soro, em relação às outras proteínas para nutrição humana, vem sendo estabelecida através de vários pesquisadores e se deve fundamentalmente ao perfil de aminoácidos presentes no soro que supera as doses diárias mínimas de nutrientes recomendáveis pela FAO/WHO, tanto para crianças como para adultos. Para obter dados mais completos sobre a composição do soro foram analisadas 36 amostras de soro de queijo obtido da fabricação de queijo “Tipo Coalho” proveniente de pequenas queijeiras localizadas na região norte da cidade de Natal/RN. As análises fisico-químicas desse soro revelaram o alto índice protéico (1,78 por cento); cálcio (0,27 por cento); fósforo (0,06 por cento) e gordura (1,05 por cento), que estão sendo lançados no meio ambiente, e poderia ser aproveitado como ingredientes para várias formulações, além de poder ser usado como meio de cultura em processos fermentativos, uma vez que o alto teor de lactose (4,20 por cento) garante sua condição de ser utilizado como fonte de carbono por vários microrganismos. É preciso, portanto, otimizar o uso do soro de queijo, uma vez que é um promissor campo de estudo, de importância social e econômica.

Avaliação das principais características de vinagres comerciais / Evaluation of the principal commercial characteristics of acetic acid

No Brasil, a maior parte da população não dá a devida importância à qualidade dos vinagres, considerando-o apenas como condimento azedo, menosprezando-se assim suas propriedades nutritivas, organolepticas, sanitizantes e até medicinais. Este trabalho foi realizado com o objetivo de avaliar as principais características físico-químicas e microbiológicas de vinagres comercializados em supermercados da cidade de Natal/RN. Oito diferentes marcas, nas variedades álcool, maçã e vinho, foram coletadas e analisadas quanto a acidez volátil em ácido acético e extrato seco, por serem estes parâmetros estabelecidos pelo Ministério da Agricultura e do Abastecimento como referência para controle de qualidade. Nas análises microbiológicas, bactérias mesófilas aeróbias estritas e facultativas viáveis; NMP de coliformes totais estiveram ausentes. A marca denominada F, dentre as analisadas, foi a única que apresentou bolores e leveduras. Os resultados obtidos mostraram que todas as marcas se encontram dentro dos padrões físico-químicos mínimos. Embora a acidez volátil em ácido acético tenha se apresentado acima da declarada nos rótulos, para todas as marcas, sendo que a marca denominada H apresentou valor inferior a indicada no rótulo.

Influência do pH na síntese e liberaçäo de glicoamilase por Aspergillus awamori NRRL 3112 e Aspergillus niger NRRL 337 / Influence of pH on glucoamylase synthesis and secretion by Aspergillus awamori NRRL 3112 and Aspergillus niger NRRL 337

Estudou-se a influência do pH na síntese e liberação da glicoamilase produzida por Aspergillus awamori NRRL 3112 e Aspergillus niger NRRL 337, em meio de cultura à base de farinha de mandioca. Verificou-se que, em valores crescentes de pH, de 3.0 a 6.0, obteve-se uma maior atividade de enzima intracelular, tendo se observado que o fenômeno de retenção de glicoamilase associada às células foi mais acentuado nas cepas com menor capacidade de produção da enzima. Com relação ao Aspergillus niger NRRL 337, verificou-se ainda, a influência da estocagem por longos períodos de tempo na diminuição da produção de glicoamilase.