Sporotrichoid leishmaniasis: a cross-sectional clinical, epidemiological and laboratory study in Rio de Janeiro State, Brazil

ABSTRACT Background Atypical presentations of cutaneous leishmaniasis include sporotrichoid leishmaniasis (SL), which is clinically described as a primary ulcer combined with lymphangitis and nodules and/or ulcerated lesions along its pathway. Aims To assess the differences between patients with sporotrichoid leishmaniasis and typical cutaneous leishmaniasis (CL). Methods From January 2004 to December 2010, 23 cases of SL (4.7%) were detected among 494 CL patients diagnosed at a reference center for the disease in Rio de Janeiro State, Brazil. These 23 cases were compared with the remaining 471 patients presenting CL. Results SL predominated in female patients (60.9%, p = 0.024), with older age (p = 0.032) and with lesions in upper limbs (52.2%, p = 0.028). CL affected more men (64.5%), at younger age, and with a higher number of lesions exclusively in lower limbs (34.8%). Conclusions Differences in clinical and epidemiological presentation were found between SL patients as compared to CL ones, in a region with a known predominance of Leishmania (Viannia) braziliensis. The results are similar to the features of most of the sporotrichosis patients as described in literature, making the differential diagnosis between ATL and sporotrichosis more important in overlapping areas for both diseases, like in Rio de Janeiro State.

Use of elisa employing homologous and heterologous antigens for the detection of IgG and subclasses (IgG1 and IgG2) in the diagnosis of Canine visceral leishmaniasis / A utilização do ELISA empregando antígenos homólogos e heterólogos para a detecção de IgG e subclasses (IgG1 e IgG2) no diagnóstico de Leishmaniose visceral canina

Indirect immunofluorescence is the method recommended for the diagnosis of visceral leishmanisis in dogs, however, the accuracy of this technique is low and its use on a large scale is limited. Since ELISA does not present these limitations, this technique might be an option for the detection of IgG or specific IgG1 and IgG2 subclasses. Canine ehrlichiosis is an important differential diagnosis of American Visceral Leishmaniasis (AVL). The present study compared ELISA using Leishmania chagasi and Leishmania braziliensis antigen for the detection of anti-Leishmania IgG and subclasses in serum samples from 37 dogs naturally infected with L. chagasi (AVL) and in samples from four dogs co-infected with L. braziliensis and L. chagasi (CI). The occurrence of cross-reactivity was investigated in control serum samples of 17 healthy dogs (HC) and 35 infected with Ehrlichia canis (EC). The mean optical density obtained for the detection of IgG was significantly higher when L. chagasi antigen was used, and was also higher in subgroup VLs (symptomatic) compared to subgroup Vla (asymptomatic). The correlation between IgG and IgG1 was low. The present results suggest that IgG ELISA using homologous antigen yields the best results, permitting the diagnosis of asymptomatic L. chagasi infection and the discrimination between cases of AVL and ehrlichiosis in dogs.

A imunofluorescência indireta é o método recomendado para o diagnóstico de leishmaniose visceral em cães, entretanto, a acurácia dessa técnica é baixa e seu uso em grande escala é limitado. Uma vez que o ELISA não apresenta essas limitações, essa técnica poderia ser uma opção para a detecção de IgG ou subclasses IgG1 e IgG2 específicas. A ehrlichiose canina é um importante diagnóstico diferencial de Leishmaniose Visceral Americana (LVA). O presente estudo comparou o ELISA usando antígenos de Leishmania chagasi e Leishmania braziliensis para a detecção de IgG e subclasses anti-Leishmania em amostras de soro de 37 cães naturalmente infectados com L. chagasi (LVA) e em amostras de quatro cães co-infectados (CI). A ocorrência de reatividade cruzada foi investigada em amostras de soro controle de 17 animais saudáveis (HC) e 35 de infectados por Ehrlichia canis (EC). A média de densidade óptica obtida para a detecção de IgG foi significantemente maior quando o antígeno de L. chagasi foi usado e também mais elevada no subgrupo LVs (sintomático) quando comparado ao subgrupo LVa (assintomático). A correlação entre IgG e IgG1 foi baixa. O presente resultado sugere que ELISA IgG empregando antígeno homólogo, produz os melhores resultados, permitindo o diagnóstico de infecção assintomática por L. chagasi e a discriminação entre casos de LVA e ehrlichiose em cães.

Seroprevalence and risk factors for canine visceral leishmaniasis in the endemic area of Dias D'Ávila, State of Bahia, Brazil / Soroprevalência e fatores de risco para leishmaniose visceral canina na área endêmica de Dias D'Ávila, Estado da Bahia, Brasil

INTRODUCTION: Visceral leishmaniasis (VL) is an important zoonosis in relation to public health systems. Dogs are the main domestic reservoir. This study aimed to investigate occurrences of canine VL in Dias D'Ávila, State of Bahia, Brazil. METHODS: The prevalence was evaluated by means of clinical and laboratory tests on a population of 312 domestic dogs from 23 localities in this municipality, using indirect immunofluorescence and immunoenzymatic assays. RESULTS: Among the animals examined, 3.2 percent and 6.7 percent showed signs of VL, confirmed by indirect immunofluorescence and immunoenzymatic assays, respectively, with a distribution of 29.9 percent (24 dogs) in the rural zone and 4.9 percent (288 dogs) in the urban zone (p = 0.001). The clinical evaluation on seropositive dogs showed both asymptomatic animals (2.4 percent) and symptomatic animals (47.6 percent), along with other abnormalities (e.g. normocytic and normochromic anemia, with leukocytosis and thrombocytopenia). Observations relating to phenotypic characteristics (e.g. sex, age, breed and hair) did not present statistical significance, although high seropositivity among male, short-haired and mixed-breed dogs was observed. CONCLUSIONS: The findings showed that VL was a predominantly rural zoonosis and that close contact between poultry and domestic dogs significantly increased the risk of canine infection in this region.

INTRODUÇÃO: A leishmaniose visceral (LV) é uma importante zoonose para os sistemas de saúde pública, sendo os cães o principal reservatório doméstico. Este estudo teve como objetivo investigar a ocorrência de LV canina (LVC) em Dias D'Ávila, Estado da Bahia, Brasil. MÉTODOS: A prevalência foi avaliada através de exames clínicos e laboratoriais em uma população de 312 cães domésticos de 23 localidades da cidade, utilizando-se imunofluorescência indireta e ensaio imunoenzimático. RESULTADOS: Dentre os animais examinados, 3.2 por cento e 6.7 por cento apresentaram sinais de LV, confirmados por imunofluorescência indireta e ensaio imunoenzimático, respectivamente, com distribuição de 29.9 por cento (24 cães) na zona rural e 4.9 por cento (288 cães) na área urbana (p=0,001). A avaliação clínica de cães soropositivos apresentou animais assintomáticos (2,4 por cento) e sintomáticos (47,6 por cento), além de outras alterações (e.g., anemia normocítica e normocrômica, com leucocitose e trombocitopenia). Observações relativas a características fenotípicas (e.g. sexo, idade, raça e pelo) não apresentaram significância estatística, embora uma soropositividade alta entre machos, animais de pelo curto e de raça indefinida tenha sido observada. CONCLUSÕES: Os achados indicam que a LV é uma zoonose predominantemente rural e que o convívio de aves e cães domésticos aumenta significativamente o risco da infecção canina na região.

Canine visceral leishmaniasis: study of methods for the detection of IgG in serum and eluate samples / Leishmaniose visceral canina: avaliação de métodos para detecção de IgG em amostras de soro e eluato

The Brazilian Ministry of Health recommends the culling and euthanasia of dogs with a positive serological test for canine visceral leishmaniasis (CVL). In the Municipality of Rio de Janeiro, the technique used for the diagnosis of CVL is the indirect fluorescent antibody test (IFAT), using blood samples eluted on filter paper (eluate). A dog survey was conducted over a period of one year in the region of Carapiá, in order to evaluate the diagnosis of CVL in this region. All animals underwent clinical examination, and blood samples (serum and eluate) were collected for analysis by enzyme immunoassay (ELISA) and IFAT. A skin biopsy was obtained for parasitological examination (culture). A total of 305 animals were studied and Leishmania chagasi was isolated from nine animals. Sensitivity and specificity were 100 percent and 96.6 percent for ELISA, respectively, 100 percent and 65.5 percent for IFAT (cut-off at a 1:40 dilution), 100 percent and 83.4 percent for IFAT (cut-off at a 1:80 dilution), and 22.2 percent and 97.0 percent for eluate IFAT. In conclusion, ELISA was the best tool for the diagnosis of CVL among the serological techniques tested. The present results suggest the need for a better evaluation of filter paper IFAT as the only diagnostic method for CVL in the Municipality of Rio de Janeiro.

O Ministério da Saúde recomenda a eutanásia de cães sororreatores como controle da leishmaniose visceral canina (LVC). No Município do Rio de Janeiro, a técnica utilizada para o diagnóstico da LVC é o teste de imunofluorescência indireta (IFI), utilizando amostras de sangue eluídas em papel de filtro (eluato). Um levantamento, durante um ano, foi conduzido na região de Carapiá, a fim de avaliar o diagnóstico da LVC nesta região. Todos os animais foram submetidos a exame clínico e coleta de sangue (soro e eluato) para realização do ensaio imunoenzimático (ELISA) e imunofluorescência indireta (IFI). Biópsia de pele foi obtida para o exame parasitológico (cultura). Foram avaliados 305 (89,4 por cento) animais de uma população de 341 cães e Leishmania chagasi foi isolada de nove animais. A sensibilidade e especificidade do ELISA foram de 100 por cento e 96,6 por cento, na IFI (ponto de corte 1:40) de 100 por cento e 65,5 por cento, na IFI (ponto de corte 1:80) de 100 por cento e 83,4 por cento e na IFI (eluato) de 22,2 por cento e 97,0 por cento, respectivamente. A partir dos resultados obtidos podemos concluir que entre as técnicas sorológicas empregadas, o teste de ELISA apresentou-se como a melhor ferramenta para o diagnóstico da LVC. Os resultados sugerem a necessidade de uma melhor avaliação do teste de IFI realizada com eluato, como único método de diagnóstico para LVC no município do Rio de Janeiro.

Visceral leishmaniasis in Rio de Janeiro, Brazil: eco-epidemiological aspects and control / Leishmaniose visceral no Rio de Janeiro, Brasil: aspectos eco-epidemiológicos e controle

From 1977 (index case) to 2006, 87 cases of visceral leishmaniasis were confirmed in the municipality of Rio de Janeiro, Brazil, in periurban areas on the continental and coastal slopes of the Pedra Branca massif and the continental slopes of the Gericinó massif. The majority (65.5 percent) of the patients were more than five years old, predominantly males (61.5 percent), but without any difference between the sexes below the age of 14 years. The overall fatality rate was 10.4 percent. Two cases of visceral leishmaniasis/human immunodeficiency virus coinfection were detected. Leishmania chagasi was isolated from human and canine cases. The associations between the presence of phlebotomines and human and canine migrations, disorderly occupation involving degradation of environmental preservation areas and poor socioeconomic conditions may have created a favorable setting for the establishment and propagation of the disease. Close epidemiological surveillance associated with traditional control measures and others (active case researches, land clearing and health education), reduced the incidence of human cases from 2.8 per 100,000 inhabitants in 1981 to less than 0.01 per 100,000 since 1997. The canine infection rates decreased from 4.6 percent in 1984 to 1.6 percent in 2008. Lutzomyia longipalpis was not detected in some locations where human and canine cases occurred. In the years 2007 and 2008, no new human cases were reported, but there is a persistent and worrisome residual canine seroprevalence.

Entre 1977 (caso índice) e 2006 foram confirmados 87 casos de leishmaniose visceral no Município do Rio de Janeiro, oriundos de áreas peri-urbanas das vertentes continentais e litorâneas do Maciço da Pedra Branca e das vertentes continentais do Maciço do Gericinó. A maioria (65,5 por cento) dos pacientes tinha mais de 5 anos de idade, prevalecendo o sexo masculino (61,5 por cento), sem diferença de freqüência entre os sexos até os 14 anos. A letalidade foi de 10,4 por cento. Houve dois casos de co-infecção por leishmaniose visceral/vírus da imunodeficiência. Leishmania chagasi foi isolada de casos humanos e caninos. Presença de flebotomíneos associada a migrações humanas e caninas, ocupação desordenada degradando áreas de preservação ambiental e baixas condições socioeconômicas podem ter criado o contexto propício à instalação e à propagação da endemia. Vigilância epidemiológica estreita com as medidas tradicionais de controle e outras - busca ativa de pacientes, limpeza de terrenos e educação em saúde -, reduziram a incidência de casos humanos de 2,8 por 100 mil habitantes em 1981 para menos de 0,01 por 100 mil a partir de 1997. As taxas de infecção canina decresceram de 4,6 por cento em 1984 para 1,6 por cento em 2008. Lutzomyia longipalpis não foi detectada em algumas localidades onde ocorreram casos humanos e caninos. Em 2007 e 2008, nenhum novo caso da doença humana foi notificado, mas permanece uma preocupante prevalência sorológica residual canina.

Leishmaniose visceral canina em Maricá, Estado do Rio de Janeiro: relato do primeiro caso autóctone / Canine visceral leishmaniasis in Maricá, State of Rio de Janeiro: first report of an autochthonous case

Leishmaniose visceral é uma zoonose de importância em Saúde Pública, onde os cães representam um dos maiores problemas. Este trabalho visa relatar o primeiro caso autóctone da leishmaniose visceral canina no município de Maricá, fornecendo elementos relacionados à distribuição geográfica de Leishmania (Leishmania) chagasi no Estado do Rio de Janeiro.

Visceral leishmaniasis is a zoonosis of public health importance, and dogs represent one of the main problems. This paper describes the first autochthonous case of canine visceral leishmaniasis in the municipality of Maricá. It provides new facts regarding the geographical distribution of Leishmania (Leishmania) chagasi in the State of Rio de Janeiro.

First encounter of subclinical human Leishmania (Viannia) infection in State of Rio Grande do Sul, Brazil

The objective of the present study was to evaluate the specificity of the Montenegro skin test (MST) in an area in Brazil, state of Grande do Sul State (RS), which was considered to be non-endemic for leishmaniasis. Sixty subjects presented a positive MST and were reevaluated by clinical examination, serology and polymerase chain reaction (PCR) of peripheral blood for the detection of subclinical Leishmania infection. None of the subjects presented clinical signs or symptoms of current leishmaniasis or a history of the disease.Leishmania (Viannia) DNA was detected in blood by PCR and hybridization in one subject. The PCR skin test-positive individual remained asymptomatic throughout the study. Clinical examination showed no scars suggestive of past cutaneous leishmaniasis. Human subclinical infection with Leishmania (Viannia) in RS was confirmed by PCR. This is the first report of subclinical infection with this parasite in the human population of this area.

Prevalência da infecção canina em áreas endêmicas de leishmaniose tegumentar americana, do município de Paracambi, Estado do Rio de Janeiro, no período entre 1992 e 1993 / Prevalence of canine infection from endemic areas of American cutaneous leishmaniasis in Paracambi District, Rio de Janeiro State, between 1992 and 1993

No município de Paracambi, Estado do Rio de Janeiro, foi realizado um inquérito epidemiológico sobre a leishmaniose tegumentar americana na população canina residente em áreas endêmicas rural e semiurbana. Foram cadastrados 179 cães e 138 (77,1 por cento) foram examinados, segundo seus aspectos clínicos e desenvolvimento de hipersensibilidade tardia ao antígeno Imunoleish® e respostas sorológicas à reação de imunofluorescência indireta e ao ensaio imunoenzimático. Dos 9 (6,5. por cento) animais portadores de lesões/cicatrizes suspeitas, 66,7 por cento foram causadas por Leishmania sp; 44,4 por cento produziram infecção em hamsters e apresentaram crescimento em meio de cultura, compatíveis com o comportamento de Leishmania do complexo braziliensis. A caracterização molecular (análises isoenzimáticas e do perfil de restrição do KDNA) identificou 2 amostras como similares à Leishmania (Viannia) braziliensis. A prevalência da infecção canina observada através do teste cutâneo, RIFI e ELISA foi, respectivamente, 10,1 por cento, 16,7 por cento e 27,8 por cento. A presença das formas clínica/subclínica da LTA na população canina associada à infecção humana sugere que o cão pode atuar como possível fonte de infecção, assim como na disseminação da doença.