Virulence of entomopathogenic nematodes and their symbiotic bacteria, under laboratory conditions, aiming controlling Saccharicoccus sacchari (Cockerell, 1895) (Hemiptera: Pseudococcidae) on sugarcane

Abstract Sugarcane crops Saccharum spp. (Poales: Poaceae) produces different derivatives to the world: sugar, ethanol and bioenergy. Despite the application of pesticides, insect pests still cause economic losses, among these the pink sugarcane mealybug Saccharicoccus sacchari (Cockerell, 1895) (Hemiptera: Pseudococcidae) causing direct and indirect damage to the plant. This study assess the virulence of three entomopathogenic nematodes (EPNs) species and their symbiont bacteria against the pink sugarcane mealybug, under laboratory conditions. Fourteen treatments represented by control (distilled water), Heterorhabditis bacteriophora Poinar, 1976 (HB EN01) (Rhabditida: Heterorhabditidae), Steinernema rarum (Doucet, 1986) (PAM25) and Steinernema carpocapsae Weiser, 1955 (All) (Rhabditida: Steinermatidae) at concentrations of 25, 50, 75 and 100 infective juveniles (IJs)/insect, and the standard chemical product, thiamethoxam, were assayed. In a second experiment, the bacteria Photorhabdus luminescens (Thomas and Poinar, 1979), Xenorhabdus szentirmaii Lengyel, 2005 and Xenorhabdus nematophila (Poinar and Thomas, 1965) (Enterobacterales: Morganellaceae) at 3.0 x 109 cells/ml were assessed for each treatment. Ten replications were stablished, each one counting ten females/mealybugs inside a 10 cm Petri dish, amounting 100 individuals/treatment. All treatments were kept under stable conditions (25±1 ºC, H 70±10%, in the dark). All nematodes species infected S. sacchari. Steinerma rarum (PAM25) provided the highest mortality against the pink sugarcane mealybug (79.25%), followed by H. bacteriophora (HB EN01) (58.25%) and S. carpocapsae (All) (42.50%) (P 0.001). The mortality rate caused by X. szentirmaii, P. luminescens and X. nematophila were 40, 45 and 20%, respectively. Steinerma rarum (PAM25) has conditions to be a potential agent to be incorporate into the integrated pest management in sugarcane.

Resumo A cultura da cana-de-açúcar Saccharum spp. (Poales: Poaceae) produz diferentes derivados para o mundo: açúcar, etanol e bioenergia. Apesar da aplicação de pesticidas, os insetos-praga ainda causam prejuízos econômicos, dentre eles a cochonilha rosada da cana-de-açúcar Saccharicoccus sacchari (Cockerell, 1895) (Hemiptera: Pseudococcidae) causando danos diretos e indiretos à planta. Este estudo avaliou a virulência de três espécies de nematoides entomopatogênicos (NEPs) e suas bactérias simbiontes contra a cochonilha rosada da cana-de-açúcar, em condições de laboratório. Quatorze tratamentos representados pelo controle (água destilada), Heterorhabditis bacteriophora Poinar, 1976 (HB EN01) (Rhabditida: Heterorhabditidae), Steinernema rarum (Doucet, 1986) (PAM25) e Steinernema carpocapsae Weiser, 1955 (All) (Rhabditida: Steinermatidae) nas concentrações de 25, 50, 75 e 100 juvenis infectantes (JIs)/inseto, e o produto químico padrão, tiametoxam, foram testados. Em um segundo experimento, a bactéria Photorhabdus luminescens (Thomas e Poinar, 1979), Xenorhabdus szentirmaii Lengyel, 2005 e Xenorhabdus nematophila (Poinar e Thomas, 1965) (Enterobacterales: Morganellaceae) em 3,0 x 109 células/ml foram avaliadas para cada tratamento. Dez repetições foram estabelecidas, cada uma contendo dez fêmeas/cochonilhas dentro de uma placa de Petri de 10 cm, totalizando 100 indivíduos/tratamento. Todos os tratamentos foram mantidos em condições estáveis (25±1 ºC, U 70±10%, no escuro). Todas as espécies de nematoides infectaram S. sacchari. Steinerma rarum (PAM25) proporcionou a maior mortalidade contra a cochonilha rosada da cana-de-açúcar (79,25%), seguida por H. bacteriophora (HB EN01) (58,25%) e S. carpocapsae (All) (42,50%) (P 0,001). As taxas de mortalidade causada por X. szentirmaii, P. luminescens e X. nematophila foram de 40, 45 e 20%, respectivamente. Steinerma rarum (PAM25) tem condições de ser um agente potencial a ser incorporado ao manejo integrado de pragas da cana-de-açúcar.

Virulence of entomopathogenic nematodes and their symbiotic bacteria, under laboratory conditions, aiming controlling Saccharicoccus sacchari (Cockerell, 1895) (Hemiptera: Pseudococcidae) on sugarcane / Virulência de nematoides entomopatogênicos e suas bactérias simbióticas, sob condições de laboratório, visando controlar Saccharicoccus sacchari (Cockerell, 1895) (Hemiptera: Pseudococcidae) na cana-de-açúcar

Sugarcane crops Saccharum spp. (Poales: Poaceae) produces different derivatives to the world: sugar, ethanol and bioenergy. Despite the application of pesticides, insect pests still cause economic losses, among these the pink sugarcane mealybug Saccharicoccus sacchari (Cockerell, 1895) (Hemiptera: Pseudococcidae) causing direct and indirect damage to the plant. This study assess the virulence of three entomopathogenic nematodes (EPNs) species and their symbiont bacteria against the pink sugarcane mealybug, under laboratory conditions. Fourteen treatments represented by control (distilled water), Heterorhabditis bacteriophora Poinar, 1976 (HB EN01) (Rhabditida: Heterorhabditidae), Steinernema rarum (Doucet, 1986) (PAM25) and Steinernema carpocapsae Weiser, 1955 (All) (Rhabditida: Steinermatidae) at concentrations of 25, 50, 75 and 100 infective juveniles (IJs)/insect, and the standard chemical product, thiamethoxam, were assayed. In a second experiment, the bacteria Photorhabdus luminescens (Thomas and Poinar, 1979), Xenorhabdus szentirmaii Lengyel, 2005 and Xenorhabdus nematophila (Poinar and Thomas, 1965) (Enterobacterales: Morganellaceae) at 3.0 x 109 cells/ml were assessed for each treatment. Ten replications were stablished, each one counting ten females/mealybugs inside a 10 cm Petri dish, amounting 100 individuals/treatment. All treatments were kept under stable conditions (25±1 ºC, H 70±10%, in the dark). All nematodes species infected S. sacchari. Steinerma rarum (PAM25) provided the highest mortality against the pink sugarcane mealybug (79.25%), followed by H. bacteriophora (HB EN01) (58.25%) and S. carpocapsae (All) (42.50%) (P<0.001). The mortality rate caused by X. szentirmaii, P. luminescens and X. nematophila were 40, 45 and 20%, respectively. Steinerma rarum (PAM25) has conditions to be a potential agent to be incorporate into the integrated pest management in sugarcane.

A cultura da cana-de-açúcar Saccharum spp. (Poales: Poaceae) produz diferentes derivados para o mundo: açúcar, etanol e bioenergia. Apesar da aplicação de pesticidas, os insetos-praga ainda causam prejuízos econômicos, dentre eles a cochonilha rosada da cana-de-açúcar Saccharicoccus sacchari (Cockerell, 1895) (Hemiptera: Pseudococcidae) causando danos diretos e indiretos à planta. Este estudo avaliou a virulência de três espécies de nematoides entomopatogênicos (NEPs) e suas bactérias simbiontes contra a cochonilha rosada da cana-de-açúcar, em condições de laboratório. Quatorze tratamentos representados pelo controle (água destilada), Heterorhabditis bacteriophora Poinar, 1976 (HB EN01) (Rhabditida: Heterorhabditidae), Steinernema rarum (Doucet, 1986) (PAM25) e Steinernema carpocapsae Weiser, 1955 (All) (Rhabditida: Steinermatidae) nas concentrações de 25, 50, 75 e 100 juvenis infectantes (JIs)/inseto, e o produto químico padrão, tiametoxam, foram testados. Em um segundo experimento, a bactéria Photorhabdus luminescens (Thomas e Poinar, 1979), Xenorhabdus szentirmaii Lengyel, 2005 e Xenorhabdus nematophila (Poinar e Thomas, 1965) (Enterobacterales: Morganellaceae) em 3,0 x 109 células/ml foram avaliadas para cada tratamento. Dez repetições foram estabelecidas, cada uma contendo dez fêmeas/cochonilhas dentro de uma placa de Petri de 10 cm, totalizando 100 indivíduos/tratamento. Todos os tratamentos foram mantidos em condições estáveis (25±1 ºC, U 70±10%, no escuro). Todas as espécies de nematoides infectaram S. sacchari. Steinerma rarum (PAM25) proporcionou a maior mortalidade contra a cochonilha rosada da cana-de-açúcar (79,25%), seguida por H. bacteriophora (HB EN01) (58,25%) e S. carpocapsae (All) (42,50%) (P<0,001). As taxas de mortalidade causada por X. szentirmaii, P. luminescens e X. nematophila foram de 40, 45 e 20%, respectivamente. Steinerma rarum (PAM25) tem condições de ser um agente potencial a ser incorporado ao manejo integrado de pragas da cana-de-açúcar.

Riboflavin did not provide anti-inflammatory or antioxidant effects in an experimental model of sepsis

We aimed to evaluate whether the administration of riboflavin to septic animals reduces inflammation, oxidative stress, organ dysfunction, and mortality. C57BL/6 mice, 6-8 weeks old, were allocated to the study group (polymicrobial sepsis induced by cecal ligation and puncture (CLP) + antibiotic + iv riboflavin), control (CLP + antibiotic + iv saline), or naïve (non-operated controls). Serum concentrations of alanine aminotransferase (ALT), creatine kinase-MB (CK-MB), urea, and creatinine, and markers of inflammation [interleukin (IL)-6, tumor necrosis factor (TNF)-α, keratinocyte-derived chemokine (KC), and macrophage inflammatory protein (MIP)-2)], and oxidative stress (malondialdehyde (MDA) were measured 12 h after the experiment. Animal survival rates were calculated after 7 days. Means between groups were compared using linear regression models adjusted under the Bayesian approach. No significant difference was observed between control and study groups in serum concentrations of IL-6 (95% credible interval) (-0.35 to 0.44), TNF-α (-15.7 to 99.1), KC (-0.13 to 0.05), MIP-2 (-0.84 to 0.06), MDA (-1.25 to 2.53), or ALT (-6.6 to 11.5). Serum concentrations of CK-MB (-145.1 to -30.1), urea (-114.7 to -15.1), and creatinine (-1.14 to -0.01) were higher in the study group. Survival was similar in both groups (P=0.8). Therefore, the use of riboflavin in mice undergoing sepsis induced by CLP did not reduce inflammation, oxidative stress, organ dysfunction, or mortality compared with placebo.

Genetic variability of populations of the white-eared opossum, Didelphis albiventris Lund 1840 (Didelphimorphia; Didelphidae) in Brazil / Variabilidade genética de populações de gambá de orelha branca, Didelphis albiventris Lund 1840 (Didelphimorphia; Didelphidae) no Brasil

Abstract Didelphis albiventris are found throughout Northeast and Central Brazil to central-southern Uruguay and it was subject of few studies in a population level. Given this, the present study investigated the genetic variability of the species using the mitochondrial molecular marker cytochrome oxidase c subunit I. We analyzed samples from the different biomes within three Brazilian regions: Northeast (Caatinga , Cerrado, and Atlantic Forest), Southeast (Cerrado , Atlantic Forest, Cerrado/Atlantic Forest, and Cerrado/Caatinga ecotones) and South (Pampa and Atlantic Forest). Software BAPs retrieved five distinct demes: dm 1, dm 2, and dm 5 that occurs in South, Northeast and Southeast regions respectively and the dm 3 and dm 4 are wide distributed in Northeast and Southeast. Population analysis performed with AMOVA, haplotype network and Mantel test estimated the veracity of the demes. The FST shows structuring for the five demes, with dm 1 (South region) isolated from the others, however the other analysis showed the Northeast/Southeast demes (dm 2-5) united, diagnosing gene flow between them, mainly at the transitional zones, in areas as far away as areas with similar latitude interval (Southeast vs South) that was not detected gene flow. In the haplotype network, the mutational steps was conclusive in split dm1 from dm 2-5 with 15 mutational steps and the Mantel test was moderated, which is explained by genetic similarity despite the great geographic distances (Northeast/Southeast). Thus, our analysis recognized two different lineages (South and Northeast/Southeast) and indicate that the biomes were not decisive in their isolation. The sharing of demes at the transitional zones and in areas with high latitudinal intervals reflects a recent ancestral polymorphism for D. albiventris. The plasticity in the occupation of the space by this species contributes in its wide dispersion capability, that is, geographical distribution. Our results revealed important implications for the management of D. albiventris in these transitional zones areas where demes were shared.

Resumo Didelphis albiventris é encontrada em todo o Nordeste e região central do Brasil até o centro-sul do Uruguai e foi alvo de poucos estudos em nível populacional. Dessa forma, o presente estudo, investiga a variabilidade genética da espécie usando o marcador molecular citocromo c oxidase subunidade I. Analisou-se amostras de diferentes biomas de três regiões brasileiras: Nordeste (Caatinga, Cerrado e Floresta Atlântica), Sudeste (Cerrado, Floresta Atlântica, ecótonos Cerrado/Floresta Atlântica e Cerrado/Caatinga) e Sul (Pampa e Floresta Atlântica). O software BAPs recuperou cinco demes distintos: dm 1, dm 2 e dm 5, que ocorrem nas regiões Sul, Nordeste e Sudeste, respectivamente, e os dm 3 e dm 4, que são amplamente distribuído no Nordeste e Sudeste. Análises populacionais realizadas com AMOVA, rede de haplótipo e teste de Mantel estimaram a veracidade das demes. O FST mostrou estruturação para as cinco demes, com dm 1 (região Sul) isolada das demais, entretanto as outras análises mostraram as demes Nordeste/Sudeste (dm 2-5) unidos, diagnosticando fluxo gênico entre elas, principalmente em zonas de transição, em áreas tão distante quanto áreas com similar intervalo de latitude (Sudeste e Sul), onde não foram detectado fluxo gênico. Na rede de haplótipo, os passos mutacionais foram conclusivos em separar dm 1 do dm 2-5 com 15 passos mutacionais, e o teste de Mantel foi moderado, o que é explicado pela similaridade genética apesar da grande distância geográfica (Nordeste/Sudeste). Assim, duas linhagens diferentes (Sul e Sudeste/Nordeste) foram encontradas, indicando que os biomas não foram decisivos em seus isolamentos. Os compartilhamentos das demes, em zonas de transição e em áreas com elevados intervalos de latitude, refletem um polimorfismo ancestral recente para D. albiventris. A plasticidade na ocupação do espaço por esta espécie contribui em sua ampla capacidade de dispersão, ou seja, distribuição geográfica. Nossos resultados revelam importantes implicações para o manejo de D. albiventris nessas áreas de zonas de transição, onde as demes são compartilhadas.

Coeficientes alométricos das partes e dos órgãos de codornas de corte mantidas em diferentes ambientes térmicos / Allometric coefficients of the cuts and organs of meat quail kept in different thermal environments

Objetivou-se comparar os coeficientes alométricos (b) que descrevem o crescimento das partes e dos órgãos de codornas de corte mantidas em diferentes ambientes térmicos. Foram utilizadas 300 codornas distribuídas em delineamento inteiramente ao acaso, com dois tratamentos (ambiente climatizado, AC) com temperatura de 26ºC e ambiente sem climatização (ASC, 32oC) e seis repetições de 25 aves. Ajustaram-se equações alométricas em função do peso em jejum (PJ) para as variáveis: peso do peito (PPEI), coxa (PCX), sobrecoxa (PSCX), asa (PASA), coração (PCOR), fígado (PFÍG), moela (PMOE) e intestino (PINT). Para comparar os "b" das partes e dos órgãos das aves mantidas nos diferentes ambientes, realizaram-se testes de paralelismo. Não houve diferença entre os "b" em nenhuma das partes e dos órgãos das codornas mantidos no ambiente AC ou no ASC. Observou-se que os PPEI e os PSCX apresentaram crescimento heterogônico positivo (b>1), os PCX crescimento isogônico (b=1), os PASA e os órgãos crescimento heterogônico negativo (b<1) em relação ao PJ. Os "b" que descrevem o crescimento das partes e dos órgãos de codornas de corte mantidas nos diferentes ambientes não são influenciados. O peso do peito e o da sobrecoxa apresentaram crescimento tardio, a asa e os órgãos (coração, fígado, moela e intestino) crescimento precoce, e o peso da coxa apresentou crescimento proporcional em relação ao peso em jejum.(AU)

This study was carried out to compare the allometric coefficients (b) that describe the cuts and organs' growth of quails kept in different thermal environments. Three hundred meat quails were distributed in a completely randomized design with two treatments (climatized environment (CE) with 26°C of ambient temperature and environment without climatization (EWC, 32°C)) and six replicates of 25 birds. Allometric equations based on weekly fasting weight (WF) for the breast weight (BW), thigh (TW), drumstick (DW), wing (WW), heart (HW), liver (LW) gizzard (GW) and intestine (IW) were performed. To compare the "b" of the cuts and organs parallelism tests were carried out. There was no difference between the "b" in any cuts and organs of quails kept in CE or EWC environments. We observed that the BW and DW showed positive heterogonic growth (b>1), TW isogonic growth (b=1), and WW and organs negative heterogonic growth (b<1) in relation PJ. The "b" that describes the growth of cuts and organs of quails kept in CE or EWC environments are not affected. The breast and drumstick presented late growth, the wing and the organs early growth, and the thigh showed a proportional increase with the fasting weight.(AU)

Effect of cottonseed oil and ferrous sulfate in broiler diets on intestinal morphometry at 42 days of age / Efeito de óleo de semente de algodão e sulfato ferroso em dietas de aves na morfometria intestinal aos 42 dias de idade

The aim of the study was to evaluate the intestinal morphometry of broilers at 42 days of age fed diets containing different levels of cottonseed oil, with and without addition of ferrous sulfate. A total of 560 male Ross chickens were used in a completely randomized design with a 4×2 factorial arrangement and five replications with 14 birds. The cottonseed oil levels tested were 0%, 2%, 4%, and 6%. At 42 days of age, one bird per replicate was collected for morphometric. Analyzed variables were villus height, crypt length and muscle wall thickness. The statistical analysis was performed using SAS, P=0.05. In the duodenum and ileum, there was no significant effect of interaction between the treatments. In the jejunum, only the length of the crypt, the treatment with cottonseed oil 2%, more ferrous sulfate resulted in lower values; however, the same oil content without ferrous sulfate led to a greater length, which was also observed in the treatment with 4% oil plus ferrous sulfate. Inclusion of cottonseed oil in broiler diets at 42 days of age does not impair their intestinal morphology. Supplementation with ferrous sulfate at these levels is unnecessary, since no improvement was observed in the intestinal morphometric.(AU)

O objetivo de estudo foi avaliar a morfometria intestinal de aves aos 42 dias de vida alimentadas com dietas contendo níveis variados de óleo de semente de algodão com e sem adição de sulfato ferroso. Um total de 560 machos de aves Ross foram usadas em estudo randomizado com amostras 4x2 e 5 replicações com 14 aves. Os níveis de óleo de semente de algodão testados foram 0%, 2%, 4%, e 6%. Aos 42 dias de idade, um pássaro por replica foi coletado para morfometria. As variáveis analisadas foram altura de villus, comprimento de cripta, e espessura de parede muscular. A análise estatística foi realizada com SAS, P=0,05. Não houve efeito significativo de interação entre tratamentos no duodeno ou íleo. No jejuno, apenas o comprimento da cripta, no tratamento com óleo de semente de algodão a 2% com mais sulfato ferroso, apresentou valor mais baixo. No entanto, o mesmo valor de óleo sem sulfato ferroso resultou em maior comprimento, resultado percebido também com 4% de óleo. Inclusão de óleo de semente de algodão em dietas de aves aos 42 dias de idade não causa danos à morfologia intestinal. Suplementação com sulfato ferroso não é necessário, já que não houve melhora em morfometria intestinal.

Genetic variability of populations of the white-eared opossum, Didelphis albiventris Lund 1840 (Didelphimorphia; Didelphidae) in Brazil

Abstract Didelphis albiventris are found throughout Northeast and Central Brazil to central-southern Uruguay and it was subject of few studies in a population level. Given this, the present study investigated the genetic variability of the species using the mitochondrial molecular marker cytochrome oxidase c subunit I. We analyzed samples from the different biomes within three Brazilian regions: Northeast (Caatinga , Cerrado, and Atlantic Forest), Southeast (Cerrado , Atlantic Forest, Cerrado/Atlantic Forest, and Cerrado/Caatinga ecotones) and South (Pampa and Atlantic Forest). Software BAPs retrieved five distinct demes: dm 1, dm 2, and dm 5 that occurs in South, Northeast and Southeast regions respectively and the dm 3 and dm 4 are wide distributed in Northeast and Southeast. Population analysis performed with AMOVA, haplotype network and Mantel test estimated the veracity of the demes. The FST shows structuring for the five demes, with dm 1 (South region) isolated from the others, however the other analysis showed the Northeast/Southeast demes (dm 2-5) united, diagnosing gene flow between them, mainly at the transitional zones, in areas as far away as areas with similar latitude interval (Southeast vs South) that was not detected gene flow. In the haplotype network, the mutational steps was conclusive in split dm1 from dm 2-5 with 15 mutational steps and the Mantel test was moderated, which is explained by genetic similarity despite the great geographic distances (Northeast/Southeast). Thus, our analysis recognized two different lineages (South and Northeast/Southeast) and indicate that the biomes were not decisive in their isolation. The sharing of demes at the transitional zones and in areas with high latitudinal intervals reflects a recent ancestral polymorphism for D. albiventris. The plasticity in the occupation of the space by this species contributes in its wide dispersion capability, that is, geographical distribution. Our results revealed important implications for the management of D. albiventris in these transitional zones areas where demes were shared.

Resumo Didelphis albiventris é encontrada em todo o Nordeste e região central do Brasil até o centro-sul do Uruguai e foi alvo de poucos estudos em nível populacional. Dessa forma, o presente estudo, investiga a variabilidade genética da espécie usando o marcador molecular citocromo c oxidase subunidade I. Analisou-se amostras de diferentes biomas de três regiões brasileiras: Nordeste (Caatinga, Cerrado e Floresta Atlântica), Sudeste (Cerrado, Floresta Atlântica, ecótonos Cerrado/Floresta Atlântica e Cerrado/Caatinga) e Sul (Pampa e Floresta Atlântica). O software BAPs recuperou cinco demes distintos: dm 1, dm 2 e dm 5, que ocorrem nas regiões Sul, Nordeste e Sudeste, respectivamente, e os dm 3 e dm 4, que são amplamente distribuído no Nordeste e Sudeste. Análises populacionais realizadas com AMOVA, rede de haplótipo e teste de Mantel estimaram a veracidade das demes. O FST mostrou estruturação para as cinco demes, com dm 1 (região Sul) isolada das demais, entretanto as outras análises mostraram as demes Nordeste/Sudeste (dm 2-5) unidos, diagnosticando fluxo gênico entre elas, principalmente em zonas de transição, em áreas tão distante quanto áreas com similar intervalo de latitude (Sudeste e Sul), onde não foram detectado fluxo gênico. Na rede de haplótipo, os passos mutacionais foram conclusivos em separar dm 1 do dm 2-5 com 15 passos mutacionais, e o teste de Mantel foi moderado, o que é explicado pela similaridade genética apesar da grande distância geográfica (Nordeste/Sudeste). Assim, duas linhagens diferentes (Sul e Sudeste/Nordeste) foram encontradas, indicando que os biomas não foram decisivos em seus isolamentos. Os compartilhamentos das demes, em zonas de transição e em áreas com elevados intervalos de latitude, refletem um polimorfismo ancestral recente para D. albiventris. A plasticidade na ocupação do espaço por esta espécie contribui em sua ampla capacidade de dispersão, ou seja, distribuição geográfica. Nossos resultados revelam importantes implicações para o manejo de D. albiventris nessas áreas de zonas de transição, onde as demes são compartilhadas.

Semen collection and evaluation of captive coatis (Nasua nasua) / Coleta e avaliação de sêmen de coatis (Nasua nasua) mantidos em cativeiro

Semen samples (n=105) were collected through eletroejaculation from six adult male coatis (Nasua nasua) between January 2007 and December 2008 at Universidade Federal de Mato Grosso Zoo, Cuiabá, Brazil. Mean values were: volume (mL); concentration (sperm/mL); total motility (%); progressive sperm motility (scale, 0-5); live spermatozoa (%); acrossome integrity (%); primary defects (%); and secondary defects (%). There was high correlation between total motility and live sperm; total motility and progressive sperm motility; total motility and acrossome integrity; live sperm and progressive motility; live sperm and acrossome integrity and volume and concentration. The method for semen collection was considered safe and efficient. It can be used for the evaluation of breeding potential of coati in captivity and for the establishment of new assisted reproductive technology (ART) for threatened neotropical carnivores species.

Amostras de sêmen (n=105) foram coletadas por eletroejaculação em seis coatis (Nasua nasua) machos adultos entre Janeiro de 2007 a Dezembro de 2008 no Zoológico da Universidade Federal de Mato Grosso, Cuiabá, Brasil. Os valores mensurados foram: volume (mL); concentração (espermatozoides/mL); motilidade (%); vigor (escala: 0-5); espermatozoides vivos (%); acrossomas íntegros (%); defeitos primários (%) e defeitos secundários (%). Houve alta correlação entre motilidade e espermatozoides vivos, motilidade e vigor; motilidade e integridade de acrossoma; espermatozoides vivos e vigor; espermatozoides vivos e integridade de acrossoma; e volume e concentração. O método de colheita de sêmen foi seguro e eficiente podendo ser indicado para avaliação do potencial reprodutivo de coatis mantidos em cativeiro e para o estabelecimento de tecnologias de reprodução assistida (TRA) para espécies de carnívoros neotropicais ameaçadas de extinção.

Expression and purification of the immunogenically active fragment B of the Park Williams 8 Corynebacterium diphtheriae strain toxin

The construction of a hexahistidine-tagged version of the B fragment of diphtheria toxin (DTB) represents an important step in the study of the biological properties of DTB because it will permit the production of pure recombinant DTB (rDTB) in less time and with higher yields than currently available. In the present study, the genomic DNA of the Corynebacterium diphtheriae Park Williams 8 (PW8) vaccine strain was used as a template for PCR amplification of the dtb gene. After amplification, the dtb gene was cloned and expressed in competent Escherichia coli M15™ cells using the expression vector pQE-30™. The lysate obtained from transformed E. coli cells containing the rDTB PW8 was clarified by centrifugation and purified by affinity chromatography. The homogeneity of the purified rDTB PW8 was confirmed by immunoblotting using mouse polyclonal anti-diphtheria toxoid antibodies and the immune response induced in animals with rDTB PW8 was evaluated by ELISA and dermonecrotic neutralization assays. The main result of the present study was an alternative and accessible method for the expression and purification of immunogenically reactive rDTB PW8 using commercially available systems. Data also provided preliminary evidence that rabbits immunized with rDTB PW8 are able to mount a neutralizing response against the challenge with toxigenic C. diphtheriae.

Exigências de lisina digestível para aves de corte da linhagem ISA Label criadas em semiconfinamento / Digestible lysine requirements for ISA Label broilers reared in free-range system

Foram realizados três experimentos para determinar as exigências de lisina digestível para aves da linhagem ISA Label, de ambos os sexos, criadas em semiconfinamento durante as fases: inicial (1 a 28 dias), de crescimento (28 a 56 dias) e final (56 a 84 dias). Em cada experimento, foram utilizadas 480 aves, alojadas em 24 piquetes, cada um contendo abrigo coberto de 3,13m² e área de pastejo de 72,87m². O delineamento experimental utilizado foi o inteiramente ao acaso, em esquema fatorial 4x2 (níveis de lisina e sexo) com três repetições de 20 aves cada. Os níveis de lisina digestível avaliados foram: 0,850; 0,970; 1,090 e 1,210 por cento na fase inicial; 0,750; 0,870; 0,990 e 1,110 por cento na fase de crescimento e 0,640; 0,760; 0,880 e 1,000 por cento na fase final. Foram mensuradas as variáveis de desempenho, característica de carcaça, deposição de proteína e gordura corporal, peso e teor de proteína das penas. Com base nos resultados de desempenho, recomendam-se 1, 041; 1,006 e 0,760 por cento de lisina digestível em rações para aves ISA Label nas fases inicial, de crescimento e final, respectivamente.

Three assays were carried out to determine digestible lysine requirement for ISA Label, both genders, in free-range system on starter (1 to 28 days), growing (28 to 56 days) e finishing phases (56 to 84 days). A total of 480 birds were distributed into 24 pens, each one composed by shelter (3.13m²) and pasture (72.87m²). The experimental design was a completely randomized in factorial arrangement (four levels of lysine and two genders) with three replicates of 20 birds. The digestible lysine levels were 0.85, 0.97, 1.09, and 1.21 percent for starter; 0.75, 0.87, 0.99, and 1.11 percent for growing; and 0.64, 0.76, 0.88, and 1.00 percent for finishing phases. The analyzed parameters were performance, carcass yield, protein and fat deposition, weight, and protein in the feathers. Based on bird performance the estimated digestible lysine level, was 1.041, 1.006, and 0.760 percent for the starter, growing and finishing phases, respectively.

Noninvasive assessment of endothelial function and ST segment changes during exercise testing in coronary artery disease

Endothelial function (EF) plays an important role in the onset and clinical course of atherosclerosis, although its relationship with the presence and extent of coronary artery disease (CAD) has not been well defined. We evaluated EF and the ST segment response to an exercise test in patients with a broad spectrum of CAD defined by coronary angiography. Sixty-two patients submitted to diagnostic catheterization for the evaluation of chest pain or ischemia in a provocative test were divided into three groups according to the presence and severity of atherosclerotic lesions (AL): group 1: normal coronaries (N = 19); group 2: CAD with AL <70 percent (N = 17); group 3: CAD with AL ¡Ý70 percent (N = 26). EF was evaluated by the percentage of flow-mediated dilatation ( percentFMD) in the brachial artery during reactive hyperemia induced by occlusion of the forearm with a pneumatic cuff for 5 min. Fifty-four patients were subjected to an exercise test. Gender and age were not significantly correlated with percentFMD. EF was markedly reduced in both groups with CAD (76.5 and 73.1 percent vs 31.6 percent in group 1) and a higher frequency of ischemic alterations in the ST segment (70.8 percent) was observed in the group with obstructive CAD with AL ¡Ý70 percent during the exercise test. Endothelial dysfunction was observed in patients with CAD, irrespective of the severity of injury. A significantly higher frequency of ischemic alterations in the ST segment was observed in the group with obstructive CAD. EF and exercise ECG differed among the three groups and may provide complementary information for the assessment of CAD.

Ocorrência de Clostridium perfringens em queijos tipo Minas frescal de Ouro Preto (MG) / Occurrence of Clostridium perfringens in Minas-type cheese of Ouro Preto (MG)

Um total de 48 amostras de queijos tipo Minas-frescal foram coletadas no comércio de Ouro Preto (MG), para examinar a ocorrência de Clostridium perfringens. Na contagem direta foi utilizado o ágar triptona sulfito neomicina (TSN), o que resultou em 18,75% de amostras positivas, as quais, apresentaram contagens de 10 a 136 ufc/g. Na determinaçäo do Número Mais Provável (NMP), com enriquecimento em caldo de carne cozida contendo 100 ug/ml de neomicina, a positividade foi de 25% das amostras, e as contagens variaram de 4 a 2000 bac./g.

Estenose congênita da veia cava inferior na região supra-hepática. Correção cirúrgica de um caso / Congenital stenosis of the inferior vena cava in the suprahepatic region. Surgical correction of a case

Menino de 4 anos de idade, portador de estenose congenita da regiao supra-hepatica da veia cava inferior, associada a cirrose hepatica precoce, apresentava hepato e esplenonegalia, ascite e circulacao venosa colateral abdominal como principais sinais clinicos. A angiografia da veia cava inferior mostrou lesao obstrutiva com reducao concentrica por diafragma membranoso. A remocao cirurgica da membrana foi realizada por abordagem da veia cava, atraves de atriotomia direita, com auxilio de circulacao extracorporea. No periodo pos-operatorio, apresentou derrame pericardico seroso importante e ascite recorrente tratados com puncao evacuadora, albumina humana e diureticos. Tres meses apos a operacao, o paciente encontrava-se assintomatico.Destaca-se a importancia de diagnosticar e tratar precocemente esta rara anomalia congenita, que pode provocar lesao hepatica irreversivel

Ocorrencia de bolores e leveduras em sucos de laranja ao natural. / Occurrence of molds and yeasts in natural orange juices

Quantificacao e identificacao de bolores e leveduras que constituem a microbiota aerobia do suco de laranja ao natural oferecido ao consumo publico. Das cem amostras analisadas, todas apresentaram numeros superiores a 10 (2) poe ml se suco, mostrando-se com niveis de bolores e leveduras acima do maximo permitido pelos padroes fixados pela Secretaria de Estado da Saude do Estado de Sao Paulo, Brasil. Os generos Penicillium, Geotrichum, Aspergillus, Aureobasidium, Torulopsis, Candida, Rhodotorula e Saccharomyces foram os mais frequentemente isolados, enquanto que os generos Phoma, Rhizopus, Mucor, Pichia e Kloeckera tambem foram identificados, porem com menor frequencia

Determinacao quantitativa de grupos de bacterias em sucos de laranja ao natural / Quantitative determination of groups of bacteria in natural orange juice

Foi realizada investigacao com a finalidade de se conhecer a microbiota aerobia do suco de laranja ao natural oferecido ao consumo publico, atraves das contagens de bacterias mesofilas e acido-produtoras, e da determinacao do numero mais provavel (NMP) de bacterias coliformes totais e fecais e de estreptococos fecais