Diagnosis to detect porcine transmissible gastroenteritis virus (TGEV) by optical and transmission electron microscopy techniques / Diagnóstico para detectar el virus de la gastroenteritis porcina transmisible por técnicas de microscopía óptica y electrónica de transmisión

The porcine transmissible gastroenteritis is a highly severe contagious disease, caused by virus of the Coronaviridae family, genus Coronavirus. Its epizootic shape can reach a rate of up to 100 percent mortality in piglets under two weeks of age as a result of severe dehydration. In this study fragments of small intestine and stool samples were collected from 75 autopsied pigs from properties. The samples of the fragments were frozen and sent to the Laboratory of Electron Microscopy, Instituto Biológico, SP, Brazil, for histological and transmission electron microscopic analyses. According to histological H&E technique, atrophy, villous necrosis and destruction of the enterocytes were observed in 35 (46.6 percent) out of the 75 fragments of the small intestine samples. On the immunohistochemistry technique 19 (25.3 percent) fragments were positively stained with DAB in the Ag-Ac reaction (MabTGEV). In 19 (25.3 percent) positive samples analyzed by in situ hybridization, a brown stain of enterocytes was observed, mainly in the epithelial cells of the villi. By the negative staining technique, we visualized enveloped, pleomorphic coronavirus particles, with typical radial projections resembling solar corona, with 140 nm diameter in 21 samples (28 percent) of the small intestine fragments and in 16 (21.3 percent) stool samples. In the ultrathin sections of 21 (28 percent) samples of small intestine, complete coronavirus particles with 80 nm diameter were seen among the microvilli and in the cytoplasm of epithelial cells. Immature particles with 60 nm diameter, budding from cell membrane and from a rough endoplasmic reticulum and also inside the vacuoles were visualized. In 19 (25.3 percent)...

La gastroenteritis transmisible porcina se caracteriza por ser una enfermedad altamente contagiosa y aguda, causada por virus de la familia Coronaviridae, género Coronavirus. Su forma epizoótica puede alcanzar una tasa de hasta 100 percent de mortalidad en lechones con menos de dos semanas de edad, como resultado de deshidratación severa. En este trabajo se recogieron 75 fragmentos de intestino delgado y muestras de heces de 75 cerdos autopsiados. Las muestras se congelaron y se enviaron al Laboratorio de Microscopía Electrónica, del Instituto Biológico, SP, Brasil, para el análisis histológico y por microscopía electrónica de transmisión. Por la técnica histológica de H&E fue observado atrofia y necrosis de la vellosidades además de la destrucción de los enterocitos en 35 (46,6 ppor ciento) de las 75 muestras de fragmentos del intestino delgado. Por inmunohistoquímica 19 (25,3 por ciento) de los fragmentos se tiñeron positivamente por el DAB en la reacción Ag-Ac (MabTGEV). En 19 (25,3 por ciento) muestras positivas mediante hibridación in situ, se observó tinción marrón de los enterocitos, principalmente en las células epiteliales de las vellosidades. Por la técnica de coloración negativa, se observaron partículas de coronavirus, encapsuladas, pleomórficas con proyecciones radiales típicas, en forma de corona solar, midiendo alrededor de 140 nm de diámetro en 21 (28 por ciento) muestras de fragmentos del intestino delgado y en 16 (21,3 por ciento muestras de heces. En cortes ultra finos de 21 (28 por ciento) fragmentos de intestino delgado fueron visualizadas partículas de coronavirus completas con 80 nm de diámetro entre las microvellosidades y en el citoplasma de las células epiteliales y partículas inmaduras de 60 nm de diámetro brotando de las membranas celulares y del retículo endoplasmático rugoso y en el interior de las vacuolas. En 19 (25,3 por ciento)...

Situação epidemiológica da brucelose bovina no Estado do Tocantins / Epidemiological situation of bovine brucellosis in the State of Tocantins, Brazil

Realizou-se um estudo para caracterizar a situação epidemiológica da brucelose bovina no Estado do Tocantins, entre fevereiro de 2002 e agosto de 2003. O Estado foi dividido em seis áreas com características produtivas homogêneas (circuitos produtores). Para cada área, foi calculada uma amostragem simples aleatória de 300 propriedades, com o objetivo de estimar a prevalência de focos de brucelose além da prevalência de fêmeas bovinas adultas soropositivas. Para isso, foram amostradas de 10 a 15 vacas com idade superior a dois anos em cada propriedade. Um total de 20.908 soros foi obtido de 1.842 propriedades. A prevalência de focos de brucelose foi de 21,2 por cento [19,3-23,1 por cento] e a prevalência de fêmeas bovinas adultas soropositivas de 4,4 por cento [3,6-5,3 por cento] para o Estado. Quando se considerou o circuito produtor, observou-se que os circuitos 1, 2, 3 e 5 tiveram prevalência de focos significativamente maior que os circuitos 4 e 6. Os resultados da prevalência nos circuitos 1, 2, 3 e 5 foram de: 16,0 por cento [12,1-20,6 por cento], 37,6 por cento [32,1-43,4 por cento], 26,4 por cento [21,5-31,7 por cento] e 29,3 por cento [24,3-34,7 por cento], respectivamente. Nos circuitos 4 e 6, foram de 5,8 por cento [3,5-9,1 por cento] e 8,6 por cento [5,7-12,2 por cento], respectivamente. Em cada propriedade, foi aplicado um questionário epidemiológico, com o objetivo de avaliar o grau de associação de possíveis fatores de risco com a doença. Os fatores de risco (odds ratio, OR) associados à condição de foco de brucelose foram: rebanho com mais de 120 vacas (OR= 2,0) e abate de reprodutores na propriedade (OR= 1,52). Vacinação contra brucelose (OR= 0,37), presença de piquete de parição (OR= 0,72) e exploração de leite (OR= 0,63) apresentaram-se como fatores de proteção.

A study was carried out to characterize the epidemiological situation of brucellosis in the State of Tocantins from February 2002 to August 2003. The State was divided into six regions with a homogeneous productive system. For each region, a simple random sample was calculated to estimate the prevalence both in farms and cows older than two-year. To achieve this, from 10 to 15 adult cows (older than two-year) were sampled. A total of 20,908 sera from 1,842 farms were obtained. For the whole State of Tocantins, the prevalence of positive farms (or farms with at least one positive animal) was 21.2 percent [19.3-23.1 percent]. When the production regions were considered, the prevalences for the regions 1, 2, 3, and 5 were: 16.0 percent [12.1-20.6 percent], 37.6 percent [32.1-43.4 percent], 26.4 percent [21.5-31.7 percent], and 29.3 percent [24.3-34.7 percent], respectively. In the regions 4 and 6, the prevalences were 5.8 percent [3.5-9.1 percent] and 8.6 percent [5.7-12.2 percent], respectively. In each visited farm, a questionnaire was applied, in order to evaluate the association between with possible risk factors and the brucellosis. The risk factors (odds ratio, OR) associated with the infected herds were number of cows above 120 (OR= 2.0) and slaughtering of breeding animals in the farm (OR= 1.52). Vaccinating against brucellosis (OR= 0.37), presence of birth pen (OR= 0.72), and dairy farm (OR= 0.63) presented as protective factors.

Isolation and identification of bovine tuberculosis in a Brazilian herd (São Paulo)

Mycobacterium was verified in animals from a Brazilian dairy herd, a total of 42 samples from 30 cows were submitted to culture and the isolated strains were analyzed by two polymerase chain reaction (PCR), the first specific for species belonging to the Mycobacterium complex (MTBC) and the other for differentiating M. tuberculosis from M. bovis. Twenty seven samples (64.3 percent) from 18 animals (60 percent) were positive for mycobacteria by culture, including samples from 15 retrofaryngeal lymphnodes (55.5 percent), 9 prescapular lymphnodes (33.3 percent), 2 lungs (7.4 percent), and 1 liver (3.7 percent). All isolated colonies were confirmed by PCR to contain MTBC organisms, and were identified as M. bovis by the same methodology.