Resultados preliminares del perfeccionamiento del DAVIH-AgP24 con el empleo del sistema de amplificación biotina-tiramina/estreptavidina-peroxidasa / Preliminary results of DAVIH-AgP24 with the biotin-tiramyne/streptavidine-peroxidase amplification system

Se modificó el ELISA DAVIH-Ag P24 con la introducción de la disociación por calor de las muestras de plasma y el empleo de un sistema de amplificación biotina-tiramina/estreptavidina-peroxidasa, para incrementar su sensibilidad. Se determinó la repetibilidad interensayo en el DAVIH-Ag P24 amplificado. Se evaluaron 32 muestras de plasma de individuos infectados por el VIH-1 en 3 categorías clínicas (caso SIDA, asintomßticos y con infecciones oportunistas menores). En la determinación de la repetibilidad interensayo se obtuvo un coeficiente de variación entre 4 y 10,3 por ciento. Con el DAVIH-Ag P24 amplificado se incrementó el nivel de detección de P 24 hasta 0,5 pg/mL. El DAVIH-Ag P24 amplificado alcanzó 66 por ciento de sensibilidad, mientras que el DAVIH-Ag P24 obtuvo 31 por ciento. Este estudio preliminar permitió demostrar que la incorporación de las nuevas modificaciones al sistema DAVIH-Ag P24 amplificado logró aumentar los niveles de detección de P24 y ganar en sensibilidad.

ELISA DAVIH-Ag p24 was modified by introducing heat dissociation of plasma samples and a tyramine/streptavidine-peroxidase amplification system, with the objective of increasing sensitivity. Between-assay repeatability was determined in amplified DAVIH-Ag p24. Thirty two plasma samples from HIV-1-infected individuals classified in three clinical categories (AIDS case, asymptomatic and minor opportunistic infections) were evaluated. The variation coefficient ranged 4-10.3 percent in between-assay repeatability. With the amplified DAVIH-p24 Ag, the p24 antigen detection level increased to 0.5 pg/mL. Amplified DAVIH-p24 Ag reached 66 percent sensitivity whereas standard DAVIH-p24 Ag sensitivity rate was 31 percent. This preliminary study proved that the introduction of new modifications in amplified DAVIH-p24 Ag managed to increase the p24 antigen detection levels and to gain sensitivity.

Diseño y evaluación del sistema DAVIH VIH-2 / Design and evaluation of DAVIH VIH-2

Se expusieron los resultados del diseño y la evaluación del diagnosticador DAVIH VIH-2, sistema ELISA indirecto diseñado para el pesquisaje de anticuerpos al VIH-2, que utiliza en su fase sólida un péptido sintético de la proteína de envoltura gp36 del VIH-2. La evaluación del desempeño del sistema se realizó utilizando paneles de referencia de la OMS y se determinó que la sensibilidad fue 100 por ciento, la especificidad 99,81 por ciento, la eficacia 99,81 por ciento y la concordancia muy buena (índice kappa= 0,978). Las muestras de suero de 959 personas con resultados indeterminados o negativos a la confirmación de anticuerpos al VIH-1 (DAVIH-Blot) se evaluaron en el sistema DAVIH VIH-2. Resultaron reactivas al sistema 24 muestras, confirmßndose la presencia de anticuerpos al VIH-2 en 6 de ellas. Estos resultados permitieron sugerir la introducción de este diagnosticador en el algoritmo de diagnóstico de la infección por VIH en Cuba.

The results of the design and evaluation of DAVIH VIH-2 diagnosing system, an indirect Elisa for screening of HIV-2 antibodies, which uses a HIV-2 glycoprotein gp36 synthetic peptide in its solid phase, were exposed. In the system evaluation using WHO reference panels, 100 percent sensitivity, 99,81 percent specificity, 99,81percent efficacy and very good concordance level (kappa = 0.978) were attained. Serum samples of 959 individuals with undetermined or negative results to the HIV-1 antibodies confirmation (DAVIH blot) were evaluated by the DAVIH VIH-2 system. Twenty four samples were reactive, six of which had confirmed HIV-2 antibodies. These results allowed recommending the introduction of this diagnostic kit in the HIV infection diagnosing algorithm in Cuba.

Actividad biológica de Ricinus communis sobre mosca doméstica (Musca domestica)

Se evaluó el efecto insecticida de una lectina obtenida a partir de Ricinus communis (higuereta), sobre una población de mosca doméstica procedente de San José de las Lajas. Los ensayos se realizaron con adultos y larvas. Se observó mayor mortalidad a medida que aumentó el tiempo de exposición frente al extracto, la DL50 a las 72 h de exposición fue de 353,4 p.p.m.; además, se apreció una disminución altamente significativa en el desarrollo pupal en presencia del extracto lo que pone de manifiesto su actividad insecticida.

The insecticide effect of a lectin obtained from Riccinus communis (castor-oil plant) on a population of houseflies from San José de Las Lajas was evaluated. Assays were performed with adults and larvas. Mortality was higher as the time f exposure to the extract increased. DL50 was of 353.4 p.p.m. after 72 hours of exposure. It was observed a remarkedly significant reduction of the pupal development in the presence of the extract, which shows its insecticide activity.

Mecanismos de resistencia a organofosforados, carbamatos y piretroides en Culex quinquefasciatus (Diptera: Culicidae) / Resistance mechanisms to organophosphorous, carbamate and pyrethroid insecticides in Culex quinquefasciatus (Diptera: Culicidae)

Se estudiaron los mecanismos de resistencia en 3 poblaciones de Culex quinquefasciatus Say, 1823, de los municipios San José de Las Lajas, La Lisa y la Habana Vieja durante 1991. Se realizaron pruebas con insecticidas organofosforados, carbamatos y piretroides, se observó un mayor factor de resistencia a malatión (16,4 - 25,4) y clorpirifós (11,0 - 17,0), que a primifós metil (4,6 - 8,1) y al carbamato propoxur (1,8 - 2,7); mientras que el sinergista butoxido de piperonil suprimió la resistencia a cipermetrina en Quibú y Habana Vieja. Se observó una mayor frecuencia del mecanismos de las esterasas (0,66-0,89 que del mecanismo de la acetilcolinesterasa (0,20-0,24)

Desarrollo de una técnica de ELISA para detectar anticuerpos monoclonales de ratón / Development of an ELISA technique to detect mouse monoclonal antibodies

Se describe una técnica de ELISA que permite el pesquizaje masivo y rápido de sobrenadantes de cultivos de hibridomas secretores de anticuerpos monoclonales. Se preparan microplacas de 96 pocillos (poliestireno) recubiertos con solución que contiene 5 *g/mL de antisuero de conejo antiinmunoglobulinas de ratón, que se emplean como soporte. Se utilizan 150 *L de una dilución 1:5 de cada muestra en estudio y como segundo anticuerpo se emplea un antisuero de carnero antiinmunoglobulinas de ratón conjugado con peroxidasa. La peroxidasa enlazada se cuantifica mediante el uso de un sistema peroxidasa-H2 O2-dihidrocloruro de 0-fenilendiamina y lectura en el espectrofotómetro vertical a 492 nm. Como controles positivos se incluyen diluciones de suero normal de ratón y anticuerpos monoclonales purificados (OKT11) y como controles negativos, sobrenadantes de cultivos de células no secretoras de inmunoglobulinas. La técnica permite la detección de inmunoglobulinas de ratón en concentraciones entre 5 y 175 *g/mL