Histological markers of degeneration and regeneration of the human intervertebral disk / Marcadores histológicos de degeneração e regeneração do disco intervertebral humano / Marcadores histológicos de la degeneración y regeneración del disco intervertebral humano

ABSTRACT Objective: To define histological scores for intervertebral disc degeneration that would enable the definition of morphological characteristics of disease, besides improving knowledge of the lumbar degenerative disc disease by means of immunohistochemical markers. Methods: Hematoxylin and Eosin, Alcian/PAS, Masson Trichrome and Safranin O/FCF staining was used on the intervertebral disc degeneration sections of patients with lumbar degenerative disc disease. The protein markers defined in immunohistochemistry were cell proliferation (Ki-67) and apoptosis (p53). Results: The study data enabled the determination of Safranin O/FCF stain as the most effective one for evaluating parameters such as area, diameter, and number of chondrocyte clusters. The importance of using stains in association, such as Safranin O/FCF, Masson Trichrome, Alcian/PAS and Hematoxylin and Eosin, was also determined, as they are complementary for the histopathological verification of intervertebral disc degeneration. By expressing proteins using the immunohistochemistry technique, it was possible to consider two stages of disc degeneration: cell proliferation with chondrocyte cluster formation, and induction of apoptosis. Conclusion: This study enabled the histological and immunohistochemical characterization to be determined for lumbar degenerative disc disease, and its degrees of evolution, by determining new disc degeneration scores.

RESUMO Objetivo: Definir escores histológicos de degeneração do disco intervertebral que permitam a identificação de características morfológicas da doença, além de melhorar o conhecimento sobre a discopatia degenerativa lombar por meio de marcadores imuno-histoquímicos. Métodos: As colorações histológicas de hematoxilina e eosina, azul de alcian/PAS, tricrômica de Masson e safranina O/FCF foram utilizadas em cortes de disco intervertebral degenerado de pacientes com discopatia degenerativa lombar. Os marcadores proteicos definidos na imuno-histoquímica permitiram a avaliação da proliferação celular (Ki-67) e da apoptose (p53). Resultados: Os dados do estudo permitiram a determinação da coloração de safranina O/FCF como a mais eficaz para avaliar os parâmetros tais como a área, o diâmetro e o número de agrupamentos de condrócitos. Também se determinou a importância do uso das colorações histológicas de forma associada, como safranina O/FCF, tricrômica de Masson, azul de alcian/PAS e hematoxilina e eosina, uma vez que elas são complementares para a verificação histopatológica da degeneração do disco intervertebral. Pela técnica da expressão de proteínas com técnica imuno-histoquímica, foi possível considerar dois estágios de degeneração do disco: proliferação de células com a formação de agrupamentos de condrócitos, seguida pela indução de apoptose. Conclusão: Este estudo permitiu definir a caracterização histológica e imuno-histoquímica em discopatia degenerativa lombar e seus graus de evolução, determinando novos escores de degeneração discal.

RESUMEN Objetivo: Definir valores histológicos de degeneración del disco intervertebral que permitan la definición de las características morfológicas de la enfermedad y mejorar el conocimiento de la enfermedad degenerativa del disco lumbar mediante marcadores inmunohistoquímicos. Métodos: Las coloraciones histológicas con hematoxilina y eosina, azul alcián/PAS, tricrómico de Masson y safranina O/FCF se utilizaron en secciones de los discos intervertebrales degenerados de pacientes con enfermedad degenerativa del disco lumbar. Los marcadores de proteínas definidos por inmunohistoquímica permitieron la evaluación de la proliferación celular (Ki-67), y la apoptosis (p53) . Resultados: Los datos de la determinación permitieron establecer la tinción con safranina O/FCF como la más eficaz para evaluar parámetros tales como el área, diámetro y número de agrupaciones de condrocitos. Se determinó también la importancia del uso asociado de diversas tinciones, como safranina O/FCF, tricrómico de Masson, azul de alcián/PAS y hematoxilina y eosina, ya que son complementarias para la verificación histopatológica de la degeneración del disco intervertebral. Por la técnica de la expresión de proteína con análisis inmunohistoquímica, fue posible establecer dos etapas de la degeneración del disco: la proliferación de células con la formación de agrupaciones de condrocitos y la inducción de la apoptosis. Conclusión: Este estudio permitió definir la caracterización histológica e inmunohistoquímica en la enfermedad degenerativa del disco lumbar y sus grados de evolución, mediante la determinación de nuevas puntuaciones de degeneración del disco.

Incidência de doença diarreica aguda em Caxias do Sul, Rio Grande do Sul, Brasil, em uma série histórica de 10 anos / Incidence of acute diarrheal disease in Caxias do Sul, Rio Grande do Sul, Brazil, in a 10-year historical series

Objetivos: Avaliar a incidência de doença diarreica aguda registrada em Caxias do Sul, em um período de 10 anos, investigando suas correlações com a vacinação contra rotavírus, com a precipitação pluviométrica e com o número de internações hospitalares. Métodos: Foi realizado um estudo descritivo dos registros de doença diarreica aguda, disponibilizados pelo setor de Vigilância Epidemiológica da Secretaria Municipal de Saúde de Caxias do Sul. Resultados: Entre 2004 e 2013 foram registrados 61.246 casos de doença diarreica aguda, sendo que os maiores números ocorreram em bairros de baixa renda. Durante o período de avaliação foram identificados cinco surtos epidêmicos de doença diarreica aguda, em meses de verão e inverno. Não foram encontradas relações entre doença diarreica aguda e precipitação pluviométrica. O número de internações hospitalares por doença diarreica aguda em crianças de zero a quatro anos decresceu a partir de 2006, coincidindo com o início do programa de vacinação contra rotavírus na rede pública, enquanto que os óbitos de todas as idades sofreram flutuações durante o período estudado. Conclusões: A avaliação da incidência de doença diarreica aguda, por longo período, mostra que houve flutuações ao longo do tempo no número de registros e de óbitos em Caxias do Sul. Este estudo revelou também uma redução no número de internações devidas a doença diarreica aguda no período que sucedeu à introdução do programa de vacinação contra rotavírus na rede pública de saúde.

Aims: To evaluate the incidence of acute diarrheal disease (ADD) recorded over a 10-year period in Caxias do Sul, southern Brazil, and its correlations with the vaccination against rotavirus, with rainfall, and with the number of hospitalizations. Methods: A descriptive study was conducted, analyzing the ADD records obtained from the Epidemiological Surveillance sector of the Local Health Department of Caxias do Sul. Results: A total of 61,246 cases of ADD were recorded between 2004 and 2013, most of which occurred in low-income neighborhoods. There were five outbreaks of ADD in the summer and winter months during the study period. No correlations were found between ADD and rainfall. The number of children aged between zero and four years hospitalized for ADD decreased from 2006 onwards, when vaccination against rotavirus was implemented in the public health network whereas the number of deaths across all age groups fluctuated during the study period. Conclusions: The assessment of the long-term incidence of ADD showed a fluctuation in the number of cases and deaths in Caxias do Sul. In addition, hospitalizations for ADD decreased after the implementation of rotavirus vaccination in the public health network.

Detection of rotavirus and norovirus in the elderly population of Caxias doSul, Rio Grande do Sul, Brazil, from 2010 to 2012 / Detection of rotavirus and norovirus in the elderly population of Caxias doSul, Rio Grande do Sul, Brazil, from 2010 to 2012

Aims: Rotavirus (RV) and norovirus (NoV) are the most common cause of diarrhea in children aged less than five years throughout the world. However, RV and NoV have frequently been overlooked as pathogens in elderly individuals. This study examined the frequency of RV and NoV among elderly patients with complaints of diarrhea in the city of Caxias do Sul, southern Brazil.Methods: Between 2010 and 2012, stool samples from patients aged 60 years or older with acute gastroenteritis treated at a private healthcare center were analyzed, seeking to identify RV and NoV. RV detection was performed by latex agglutination (LA) methods and polyacrylamide gel electrophoresis (PAGE). One third of the samples were further tested for NoV by reverse transcription polymerase chain reaction (RT-PCR).Results: A total of 145 stool samples from patients aged 60 to 105 years were analyzed. RV was detected in 6/145 (4.14%) and 5/125 (4.00%) of the samples by LA and PAGE, respectively. NoV was detected in 6/51 (11.76%). Mixed infection (RV and NoV) was detected in a single sample: 1/51 (1.96%).Conclusions: This study adds further evidence that viral agents are involved in the etiology of gastroenteritis in the elderly, contributing significantly to the understanding of RV and NoV infections in the mature population.

Objetivos: Rotavírus (RV) e norovírus (NoV) são a causa mais comum de diarreia em crianças menores de cinco anos em todo o mundo; entretanto, como patógenos em idosos, esses vírus têm sido pouco investigados. Este estudo examinou a frequência de RV e NoV entre idosos com queixas de diarreia na cidade de Caxias do Sul, no sul do Brasil. Métodos: Entre 2010 e 2012 foram analisadas amostras de fezes de pacientes de umCentro de Atenção à Saúde privado, com idade de 60 anos ou mais, com gastroenterite aguda,buscando-se identificar RV e NoV. A detecção de RV foi realizada pelos métodos Aglutinação em Látex (LA) e Eletroforese em Gel de Poliacrilamida (PAGE). Uma terceira parte das amostras foi ainda testada quanto a NoV por Transcrição Reversa e Reação em Cadeia da Polimerase (RTPCR).Resultados: Ao todo foram analisadas 145 amostras de fezes de pacientes com idade entre 60 e 105 anos. RV foi detectado em 6/145 (4,14%) e 5/125 (4,00%) das amostras por LA e PAGE, respectivamente. NoV foi detectado em 6/51 (11,76%). Infecção mista (RV e NoV) foi detectada em uma única amostra: 1/51 (1,96%). Conclusões: Este estudo acrescenta mais evidências de que agentes virais estão envolvidos na etiologia da gastroenterite em idosos, e contribui para a compreensão das infecções por RV e NoV na população idosa.

Matched case-control study evaluating the frequency of the main agents associated with neonatal diarrhea in piglets / Estudo caso-controle pareado avaliando a frequência dos principais agentes causadores de diarréia neonatal em suínos no Rio Grande do Sul

A case-control study was carried out in litters of 1 to 7-day-old piglets to identify the main infectious agents involved with neonatal diarrhea in pigs. Fecal samples (n=276) from piglets were collected on pig farms in the State of Rio Grande do Sul, Brazil, from May to September 2007. Litters with diarrhea were considered cases (n=129) and normal litters (n=147) controls. The samples were examined by latex agglutination test, PAGE, conventional isolating techniques, ELISA, PCR, and microscopic methods in order to detect rotavirus, bacterial pathogens (Escherichia coli, Clostridium perfringens type A and C, and Clostridium difficile), and parasites (Coccidian and Cryptosporidium spp.). Outbreaks of diarrhea were not observed during sampling. At least one agent was detected in fecal samples on 25 out of 28 farms (89.3 percent) and in 16 farms (57.1 percent) more than one agent was found. The main agents diagnosed were Coccidia (42.86 percent) and rotavirus (39.29 percent). The main agents identified in litters with diarrhea were Clostridium difficile (10.6 percent), Clostridium perfringens type A (8.8 percent) and rotavirus (7.5 percent); in control litters, Clostridium difficile (16.6 percent) and Coccidian (8.5 percent). Beta hemolytic Escherichia coli and Clostridium perfringens type C were not detected. When compared with controls, no agent was significantly associated with diarrhea in case litters. These findings stress the need for caution in the interpretation of laboratorial diagnosis of mild diarrhea in neonatal pigs, as the sole detection of an agent does not necessarily indicate that it is the cause of the problem.

Um estudo de caso-controle em leitegadas de um a sete dias de idade foi realizado com o objetivo de identificar os principais agentes infecciosos envolvidos na diarreia neonatal de leitões. As amostras de fezes (n=276) foram coletadas em granjas de suínos no Estado do Rio Grande do Sul, Brasil, no período de maio a setembro de 2007. Leitegadas com diarreia foram consideradas casos (n=147) e leitegadas normais, controles (n=129). As amostras foram examinadas através do teste de aglutinação em látex, PAGE, cultivo, ELISA, PCR e métodos microscópicos para a excreção dos principais agentes de diarreia: virais (rotavirus), bacterianos (Escherichia coli, Clostridium perfringens tipos A e tipo C e Clostridium difficile) e parasitários (coccídeos e Cryptosporidium spp.). Durante o período do estudo não foram observados surtos e a diarréia, quando presente, apresentou-se leve. Pelo menos um agente foi identificado nas amostras fecais de 25 entre 28 granjas (89,3 por cento) analisadas e em 16 granjas (57,1 por cento) mais de um agente foi detectado. Os principais agentes encontrados nas granjas foram coccídeos (42,86 por cento) e rotavírus (39,29 por cento). Os principais agentes detectados nas leitegadas com diarreia foram Clostridium difficile (10,6 por cento), Clostridium perfringens tipo A (8,8 por cento) e rotavírus (7,5 por cento). Por outro lado, nas leitegadas controle os agentes mais prevalentes foram Clostridium difficile (16,6 por cento) e coccídeos (8,5 por cento). E. coli Beta hemolítica e Clostridium perfringens tipo C não foram detectados. O presente estudo de caso-controle demonstrou que nenhum agente infeccioso esteve associado significativamente com diarreia (p>0.05). Esses achados reforçam a necessidade de que haja cuidado na interpretação de resultados de exames laboratoriais em materiais coletados de leitões com diarreia neonatal leve, pois a detecção isolada de um agente infeccioso não indica necessariamente que o mesmo seja a causa do problema.