Experiencia en 10 años de aplicación de fibrobroncoscopia en pacientes pediátricos / A ten years experience in flexible bronchoscopy in pediatric patients

Approximately a decade ago, pediatric Flexible Bronchoscopy (FB) was introduced in Chile, after being used for several years in adults. Aim: To describe our clinical experience in FB in a ten years period. Patients and Methods: Records of procedures done between January 1993 and September 2002 at the Pediatric Service of the Catholic University Hospital, were retrospectively reviewed. We evaluated the clinical indications for the procedures in relation to patient's age and the correlation between indications and FB findings. Results: A total of 700 procedures were performed during the period, 59% in men and 53% in patients younger than 1 year. Seventy seven percent of procedures were done in an examination room, using a nasal approach. The main indication was visualization of the airway (49%). The most common clinical diagnosis, in descending order were: atelectasis, stridor and etiologic study of pneumonia by bronchoalveolar lavage (BAL). In children younger than 6 months the most common clinical diagnosis was stridor, followed by atelectasis. The main diagnosis in the whole sample, reached by FB was atelectasis secondary to mucous plug. In children younger than 6 months, the main diagnosis was laryngomalacia. A positive microbial culture was obtained in 43% of patients in whom BAL was done. Complications were uncommon (5%) and mostly mild. In 2.3% of cases, these were severe, such as bronchospasm and need for mechanical ventilation. Severe complications were observed in patients younger than 3 months with severe stridor or in children with cancer, who required FB and BAL. Conclusions: Flexible bronchoscopy is a safe and useful procedure in pediatric patients (Rev Méd Chile 2003; 131: 1266-72).

Purificación parcial de interferón humano tipo alfa para su uttilización en productos farmacéuticos / Partial purification of Hu-IFN-* for pharmaceutical purposes

La purificación parcial del Hu-IFN-* se logra en un solo paso por adsorción y elución sobre ácido silícico. La recuperación de la actividad antiviral es del 80-100 por ciento, con un aumento de la actividad específica de aproximadamente 20-80 veces. El producto obtenido por este método es estable y apropiado para ser utilizado en terapéuticas locales

Estudios sobre la producción de un Interferón recombinante alfa humano expresado bajo el control del promotor lac UV5 de Escherichia coli / Research on production of recombinant alpha human interferon expressed by control of lac UV5 promotor of Escherichia coli

La inserción de un oligonucleótido de 18 pares de bases en el sitio Pvull, ubicado en la región que codifica para el prepéptido del gen de IFN * 2 humano, resultó en un notable incremento en la actividad antiviral producida en E. coli bajo el control de los promotores lac UV5 situado en un plásmido recombinante. El máximo de actividad antiviral específica, cuando se utilizó E. coli HB 101 como célula hospedadora, se produjo en la mitad de la fase exponencial, después de lo cual se observó una marcada caída. Cuando se utilizó E. coli JM 101, que solo permite la síntesis del antiviral en presencia del inductor (IPTG), el máximo se observó una hora y media después de agregado este inductor, cualquiera fuere el punto de la curva de crecimiento. El contenido plasmídico por célula durante el ciclo de crecimiento se mantuvo constante. Cuando se amplificó el número de copias del plásmido por pretratamiento de las bacterias con cloranfenicol, se amplificó la capacidad de síntesis en los puntos iniciales de la curva de crecimiento. La vida media del antiviral en extractos bacterianos crudos fue de 75 minutos a 37-C y 165 minutos a 30-C. La disminución de la temperatura de cultivo de 37-C a 34-C durante la producción, aumentó la velocidad inicial de acumulación del producto, pero el máximo alcanzado en la actividad específica del antiviral no varió

Producción de un polipéptido con actividad antiviral por fusión del gen interferón-alpha 2 humano al gen lacZ del bacteriófago M13mp8 / Production of a polypeptide with antiviral activity by fusion of the alpha 2 IFN gen to the lacZ gen in the M13mp8 bacteriophage

Un gen de IFN-* recientemente aislado en nuestro laboratorio a partir de una librería de ADN crosomal humano, fue genéticamente manipulado in vitro para poder acortar la secuencia señal y mejorar el rendimiento de IFN en cultivos bacterianos. Primero, la secuencia señal fue acortada en una extensión equivalente a nueve codones, usando la enzima de restricción HacIII y la secuencia remanente fue fusionada en fase con el codón iniciador del gen lacZ presente en el bacteriófago M13mp8. Uno de los clones recombinantes fue analizado en detalle. Este clon mostró una alta inestabilidad del inserto y una baja producción de actividad IFN, con un rendimiento similar al obtenido con el gen pre-IFN-*2 completo. El gen fusionado lacZ/IFN-* fue entonces transferido por clonaje mplecular al plásmido pBR322. Uno de los clones obtenidos mostró una buena estabilidad del plásmido híbrido, y aunque el rendimiento de actividad de IFN fue bajo (3x 10 a la 5 unidades/ml de extracto bacteriano crudo) la producción se mantuvo aún después de más de 20 pases. Finalmente, la secuencia señal recombinante presente en este clon fue nuevamente acortada en una extensión equivalente a 4 codones y se encontró que uno de los nuevos clones incrementaba aproximadamente en 20 veces el nivel de producción de actividad IFN. A pesar de que el polipéptido sintetizado constituye un producto de fusión, la actividad biológica antiviral de IFN parece quedar conservada

Isolation and identification of anaerobic contaminants from a machine for producing processed cheese.

Sesenta cepas fueron seleccionadas a partir de seis muestras de queso fundido y tres cultivos de material contaminado de la maquina procesadora. Todos los microorganismos aislados fueron bacilos catalasa (-), anaerobicos estrictos y esporulados con esporas subterminales. El 83% de las cepas fueron Gram (+) correspondiendo al Genero III Clostridium. Un estudio posterior permitio clasificarlas como Clostridium butyricum y Clostridium tyrobutyricum. Las veinte cepas restantes fueron Gram (-). Por su capacidad de reducir su fito se las ubico en el Genero IV Desulfotomaculum