ABSTRACT
La exposición de hembras de sapo Buffo arerarum a aguas del río Reconquista (Provincia de Buenos Aires, Argentina) conduce a la acumulación de zinc (Zn) en sus ovarios. Las hembras tratadas de esta forma son capaces de ovular cuando son inyectadas con macerado de hipófisis, al igual que hembras controles. Los ovocitos obtenidos de hembras tratadas son capaces de fertilizar y desarrollar normalmente hasta el estadío de gástrula, mientras que presentan un 27 por ciento de inhibición del desarrollo embrionario a partir del estadío denominado respuesta muscular. In vivo la microinyección de Zn en ovocitos controles simultáneamente con [U-14C] Glucosa evidenció disminución en la síntesis de glucógeno y en la oxidación de la glucosa a través de la vía de las pentosas. La actividad de la enzima glucosa-6-fosfato deshidrogenasa en ausencia de agregado de Zn fue de 371,8 x 10 -3 U/ml.min. La enzima fue inhibida en vitro por el metal en forma dependiente de la concentración. Utilizando una concentración igual a 1,53mM de Zn, similar a la incorporada en ovario y a la microinyectada en los ensayos con glucosa radiactiva, se alcanzó un 62 por ciento de la máxima inhibición correspondiente a 3mM de Zn (248,7x10-3U/ml.min). Estos resultados concuerdan con un efecto inhibitorio del Zn sobre el desarrollo embrionario, mediado probablemente por una deficiente producción de NADPH, ribosa-5 fosfato y ATP en los ovocitos.
Subject(s)
Animals , Female , Bufonidae , Carbohydrates/metabolism , In Vitro Techniques , Oocytes/drug effects , Ovary/metabolism , Zinc/pharmacology , Argentina , Fetal Development/physiology , Oocytes/physiology , Ovary/embryology , Spectrometry, X-Ray EmissionABSTRACT
A column (CarboPac PA1, Dionex) containing an anion-exchange pellicular resin was used for the separation of phosphoryl-hexoses derived from labeled glucose microinjected into individual frog oocytes or from cultures of Escherichia coli. Intermediates were identified by: a) comparison of retention times with those of authentic commercial compounds; b) the use of internal labeled standards; c) incubation of samples with specific enzymes and noting the disappearance of one radioactive peak and appearance of another at a new retention time