Diseño y producción de diversas proteínas fusión de la nicotinamida/ nicotinato mononucleotido adenilil transferasa (NMNAT) de Plasmodium falciparum / Design and production of various fusion proteins of the nicotinamide/ nicotinate mononucleotide adenilil transferase (NMNAT) of Plasmodium falciparum / Desenho e produção de várias proteínas fusão da nicotinamida/nicotinato mononucleotido adenilil transferasa (NMNAT) do Plasmodium falciparum

Resumen Las proteínas recombinantes se han convertido en herramientas útiles en la investigación bioquímica. Sin embargo, durante su producción, aparecen cuerpos de inclusión (IB), debido, por un lado, a la alta expresión de proteína producida a partir de los vectores usados que poseen promotores de alta eficiencia y, por otro lado, a características propias de la proteína. Ahora bien, la nicotinamida/nicotinato mononucleótido adenililtransferasa (NMNAT) es una proteína central en la biosíntesis del NAD(H)+, molécula esencial en el metabolismo celular, y ha sido estudiada en parásitos protozoos. Para el estudio de la NMNAT de estos parásitos se ha recurrido a la expresión de su versión recombinante en E. coli, obteniéndose gran cantidad de proteína como IB. Con el fin de aumentar la solubilidad de la proteína, se clonó la secuencia codificante de la NMNAT de Plasmodium falciparum en diferentes vectores de expresión, se indujo la expresión de la proteína recombinante en E. coli BL21 (DE3) y se analizó la solubilidad. La proteína fusión con mayor solubilidad fue purificada y evaluada enzimáticamente. La adición de la etiqueta MBP (proteína de unión a maltosa) a la PfNMNAT incrementó su solubilidad y permitió obtener una proteína funcional con una alta pureza.

Abstract Recombinant proteins have become useful tools in biochemistry research. During their production, however, inclusion bodies (IB) appear, on the one hand, due to the high expression rate from the recombinant plasmids, which have high efficiency promoters, and, on the other hand, intrinsic characteristics of the expressed protein. Furhtermore, the nicotinamide/nicotinate mononucleotide adenilyl transferase (NMNAT) is a central protein in NAD(H)+biosynthesis, an essential cofactor in cell metabolism, and in protozoon parasite has been studied. To study the NMNAT protein of these parasites, their recombinant version in E. coli has been expressed, getting a great quantity of IB as a by-product. To increase the solubility of the protein, the coding sequence of the NMNAT enzyme of Plasmodium falciparum was cloned in different expression plasmids which were subsequently transformed into E. coli BL21 (DE3) expression strain. The solubility of the recombinant proteins was assessed and the one with the highest presence in the soluble fraction was subsequently purified and its enzyme activity was determined. The recombinant protein with a MBP (maltose-binding protein) tag showed an increased solubility and purity.

Resumo As proteínas recombinantes tem convertido em ferramentas úteis na investigação bioquímica. Um problema frequente durante a sua produção é a aparição de corpos de inclusão (IB), devida principalmente à elevada expressão da proteína produzida a partir dos vectores utilizados que têm promotores de elevada eficiência; bem como características das próprias proteínas. Além disso, a nicotinamida/nicotinato mononucleótido adenililtransferasa é uma proteína central na biossíntese do NAD(H)+, molécula essencial no metabolismo celular, e tem sido estudada em protozoários parasitos. Para o estudo da NMNAT destes parasitos, foi realizada a expressão da sua versão recombinante em E. coli, e foi obtido uma grande quantidade de proteína em forma de IB. Com a finalidade de aumentar a quantidade de proteína na fração solúvel, a sequência codificadora para NMNAT de Plasmodium falciparum foi clonada em diferentes vectores de expressão, foi induzida a expressão da proteína recombinante em E. coli BL21(DE3) e foi analisada a solubilidade. A proteína fusão com maior solubilidade foi purificada e avaliada enzimáticamente. A adição da etiqueta MBP (proteína de união a maltosa) à PfNMNAT incrementou a solubilidade da proteína e permitiu obter uma proteína funcional com una alta pureza. espécie de planta.

Evaluación de la utilización del duckweed como alternativa de pos-tratamiento de aguas residuales domesticas en efluentes de lagunas de oxidación / Evaluation of the use of duckweed as an alternative for post-treatment of domestic wastewater effluent from oxidation ponds

En el presente estudio se trabajó a escala de laboratorio un sistema de pos-tratamiento de agua residual doméstica en reactores tipo batch con el fin de evaluar la potencialidad del duckweed para remover materia orgánica, nutrientes y coliformes, utilizando como sustrato aguas residuales provenientes de las lagunas de oxidación del sistema de tratamiento de aguas residuales del Municipio de Valledupar. Las lemnáceas que sirvieron como inóculo para desarrollar la investigación fueron tomadas de jagüeyes ubicados a las afueras de Valledupar. En esta investigación se analizaron los siguientes parámetros: demanda química de oxígeno, nitrógeno total kjeldalh, fósforo, coliformes, conteo de frondas, determinación de la biomasa.

Hernia de Bochdalek: caso clínico / Bochdalek hernia: clinical case

La Hernia Diafragmática es la penetración de una o más visceras abdominales en el tórax, a trvés de un orificio normal o anormal del diafragma. Se han descrito 4 formas diferentes de hernias diafragmáticas congénitas: Hernia de Hiato, Hernia paraesofágica, Hernia de Morgagni-Larrey y Hernia de Bochdalek, así como también se han descrito Hernias diafragmáticas post-traumáticas. La Hernia de Bochdalek (posterolateral) es el resultado de un defecto diafragmático congénito en la parte costal posterior del diafragma, en la región de las costillas X y XI. Es una patología frecuente en el recién nacido y rara en el adulto. En la revisión de la literatura mundial encontramos 100 casos reportados en el adulto. Suele haber una comunicación libre entre las cavidades torácica y abdominal. Este defecto es más frecuente (90 por ciento) en el lado izquierdo, aunque puede producirse en el lado derecho, donde el hígado a menudo impide su diagnóstico. Es dos veces más frecuente en el varón. Presentamos el caso de una paciente femenina de 76 años, quién ingresó con dificultad para respirar y dolor torácico, desde hace (04) meses, se constata en el hemitórax izquierdo ruidos respiratorios abolidos con ruidos hidroaéreos presentes. Se realizan métodos diagnósticos a través de imágenes y se confirma evidente desplazamiento apical de estructuras retroperitoneales, riñón y asas intestinales hacia el hemitórax izquierdo. Se le realizó toracotomía izquierda, posterolateral, nefrectomía izquierda y afrontamiento de defecto diafragmático. Se realiza la revisión de dicha patología.

Identificación de factores de riesgo más frecuentes en embarazadas cuyos partos fueron atendidos desde enero hasta diciembre 2006: en el Hospital Rural Tipo 1 Coloncito estado Táchira / Identification of risk factors more common in pregnant women whose births were attended from January to December 2006 in the Rural Hospital type 1 Coloncito Tachira

El control pre-natal (CPN) es el conjunto de acciones y procedimientos destinados a la prevención, diagnóstico y tratamiento de los factores que puedan condicionar morbimortalidad materna y perinatal. La mayoría de los modelos de CPN actualmente en uso en el mundo no han sido sometidos a una evaluación científica rigurosa para determinar su efectividad. En los países en desarrollo la implementación de los programas de CPN ha sido deficiente, con visitas clínicas irregulares, con largos tiempos de espera y mala respuesta en el cuidado de las mujeres, lo cual no constituye una excepción en nuestro país ni en el caso específico de nuestro estado y del centro asistencial tomado para el estudio. Debido a la gran preocupación que esta situación representa, surge la necesidad de realizar una rigurosa revisión de las historias clínicas de las madres cuyos partos fueron atendidos en esta institución en el 2006, así como buscar respaldo en bibliografías, manuales y publicaciones para identificar los factores de riesgo (FR) más frecuentes en dichas madres y proponer estrategias sencillas de prevención, detección temprana y manejo de los mismos, entendiendo que de nosotros como personal de salud depende hacer el embarazo un estado fisiológico femenino y no una enfermedad de nueve meses.

Prevalencia del retardo del crecimiento intrauterino en pacientes atendidos en el Hospital Tipo I de Coloncito Estado Táchira en el período entre enero-diciembre 2006 / Prevalence of the intrauterine growth retardation in patients attention at the Hospital of Type I Coloncito Táchira state in the period january-december 2006

El presente es un trabajo cuyo objeto fue caracterizar el Retardo del Crecimiento Intrauterino "RCIU" en pacientes atendidos en el Hospital tipo I de Coloncito entre enero-diciembre 2006, determinando su prevalencia, el tipo más frecuente y los factores de riesgo maternos existentes. Mediante un diseño descriptivo con abordaje longitudinal retrospectivo, con el 100 por ciento de la muestra que representó 362 historias. Se obtuvo que el RCIU tiene una prevalencia de 4,7 por ciento y que de éstos el 82,34 por ciento fue de tipo simétrico; además el factor de riesgo materno que destacó fue el mal control prenatal "CPN" con 42,54 por ciento. Demostrándose así que el RCIU de tipo simétrico tiene una alta prevalencia en nuestra zona y por tal motivo se recomienda buscar medidas para reforzar el CPN, y así recibir el diagnóstico y tratamiento oportuno.

Malformaciones congénitas inducidas por metotrexato / Congenital malformations induced by methotrexate

El metotrexato es un antimetabolito del ácido fólico que interfiere en la síntesis del ADN y es utilizado en patologías oncológicas, reumatológicas, dermatológicas y gineco-obstétricas. Su uso durante el primer trimestre de gestación puede provocar malformaciones fetales pesquisables en la evaluación ultrasónica prenatal; el conjunto de estas malformaciones congénitas asociadas al uso de metotrexato han recibido el nombre de síndrome aminopterina / metotrexato. Este síndrome se caracteriza por malformaciones evolutivas del Sistema Nervioso Central, anormalidades esqueléticas y a largo plazo, de manera inconstante, retraso mental. Presentamos dos casos clínicos ilustrativos de este síndrome, en conjunto con el Servicio de Obstetricia y Ginecología del Hospital San Juan de Dios del Servicio de Salud Metropolitano Occidente. En Chile la magnitud de este síndrome es desconocida y el aborto no es social ni legalmente aceptado, por lo que adquiere importancia conocer esta patología y sus consecuencias por parte del equipo de salud.

Screening de aneuploidías: presencia de hueso nasal entre las 11-14 semanas: una técnica del nuevo milenio / Screening for aneuploids: presence of nasal bone between weeks 11 and 14: a technique for the new millenium

El screening de aneupliodías antenatal durante el primer trimestre ha evolucionado radicalmente durante los últimos años, asociando métodos tanto bioquímicos como ecográficos. El screening bioquímico al utilizar Pregnancy-associated plasma protein-A (PAPP-A) y la subunidad _-HCG libre presenta una sensibilidad para trisomía 21 de un 40 por ciento y 35 por ciento respectivamente. Sin embargo presenta una tasa de falsos positivos de 5 por ciento. En la búsqueda de mejorar la sensibilidad y disminuir la tasa de falsos positivos han aparecido nuevas técnicas ecográficas. La medición de la translucencia retronucal entre las semanas 11 y 14, mejoró la sensibilidad a un 77 por ciento como marcador único, manteniendo la tasa de falsos positivos. Una nueva técnica es la presencia de hueso nasal entre las semanas 11 y 14, avalada por estudios anatomo-radiológicos. Esta técnica tiene una sensibilidad 60 a 80 por ciento para trisomía 21, con una tasa de falsos positivos de 0.25 a 2,8 por ciento y con la consiguiente disminución de procedimientos invasivos. La técnica es aplicable tanto vía abdominal como transvaginal con una rápida curva de aprendizaje.

Síndrome de brida amniótica y complejo "limb-body-wall": a propósito de un caso clínico / Amniotic brida syndrome and limb-body-wall complex: reviewing a clinical case

Se presenta un caso de síndrome de Brida amniótica que es una malformación congénita caracterizada por la formación de bandas fibrosas derivadas del amnios y que comprimen y estrangulan partes fetales especialmente cráneoencefálicas y de las extremidades. La etiopatogenia es desconocida y se descarta la participación de factores genéticos. Las formas menores son susceptibles de fetocopia y compatibles con la sobrevida. Las formas severas son incompatibles con la vida.

Sonohisterografía: experiencia en la Unidad de Ultrasonografía del Hospital San Juan de Dios / Hysterosonography: experience in the ultrasonography unit of the San Juan de Dios Hospital

Se presenta la experiencia inicial reunida en nuestro Servicio con la técnica denominada sonohisterografía que consiste en la visualización de la cavidad endometrial por ultrasonido al distenderla con una solución fisiológica mientras se realiza una ultrasonografía transvaginal. Esto permite la detección de pólipos, miomas o de cualquier otro tumor en relación con la cavidad uterina, constituyendo una forma de aproximación diagnóstica en casos de metrorragias, algias pelvianas, estudios de infertilidad, etc. Se estudian 20 pacientes que se sometieron a esta técnica por los diagnósticos de metrorragia postmenopausia, pólipo endometrial, mioma submucoso, hematometra, DIU incrustado y malformación uterina. Encontramos una alta concordancia entre los hallazgos hidrosonogrßficos, histeroscópicos y el diagnóstico histológico, lo que valida esta técnica poco invasiva como de gran utilidad para el diagnóstico de las patologías mensionadas.

Experiencia del uso del doppler de arteria cerebral media fetal en el manejo de madres con enfermedad hemolítica sensibilizadas / Experience in the use of doppler for fetal middle artery in the management of sensitized mothers with hemolytic disease

La enfermedad hemolítica perinatal se caracteriza por la aparición de anticuerpos contra la membrana del glóbulo rojo fetal lo que lleva a anemia fetal. La medición con Doppler del peak sistólico de la arteria cerebral media (ACM) se correlaciona directamente con el grado de anemia fetal y por lo tanto con la gravedad de la enfermedad hemolítica. Se realizó un seguimiento de 20 pacientes Rh (-) sensibilizadas, atendidas en el Servicio de Ginecología del Hospital San Juan de Dios con mediciones seriadas del peak sistólico de la ACM. El 100 por ciento de los valores observados para el peak sistólico de la ACM estuvieron en rango normal para la edad gestacional, incluso en aquellos fetos y recién nacidos que necesitaron recambio sanguíneo y fototerapia postparto, lo que se contrapone con lo descrito en la literatura. Posibles causas de este hallazgo pueden ser: mala toma del peak sistólico, curva demasiado exigente para los casos estudiados y muestra demasiado pequeña. Se requiere seguimiento més largo y una muestra més numerosa. Se realizará un seguimiento con un grupo mayor de pacientes.

Rabdomioma cardíaco y esclerosis tuberosa: diagnóstico prenatal / Rhabdomyoma cardiac and tuberous sclerosis: prenatal diagnosis

Se presenta un caso de diagnóstico y manejo prenatal de tumor intracardíaco catalogado por clínica y ultrasonografía como rabdomioma cardíaco. Se estudió una paciente embarazada de 37 semanas con un tumor cardíaco ecogénico, multifocal, que evolucionó in útero sin arritmia ni falla cardíaca. El parto se resolvió por vía vaginal a las 39 semanas y en la evolución del recién nacido se confirmó por tomografía computada (TC) y fondo de ojo el diagnóstico de esclerosis tuberosa. Se realiza revisión del tema destacando la conducta frente al parto según las condiciones de la función cardíaca fetal y el riesgo de esclerosis tuberosa en su evolución post natal.

Ultrasonografía en las complicaciones postoperatorias en ginecología y obstetricia / Ultrasonography in the postoperative complications in gynecology and obstetrics

Se analizan la utilidad y técnicas del ultrasonido en el estudio de los hematomas postquirúrgicos en pacientes gíneco-obstétricas tanto de cirugía abdominal y vaginal. La vía de abordaje puede incluir el ultrasonido de pared abdominal, trans-abdominal, transvaginal o transperineal. Se pueden distinguir colecciones subcutáneas, subaponeuróticas, prevesicales, de cúpula vaginal y perineales; el ultrasonido tiene un alto rendimiento en el diagnóstico, localización y necesidades de drenaje de estas colecciones. Debido a su alta sensibilidad el ultrasonido se debe utilizar para la evaluación de la paciente que presenta complicaciones en el postoperatorio, especialmente en la fiebre de origen no precisado.

Aneuplodias: diagnóstico y manejo perinatal / Aneuplodies: diagnosis and perinatal approach

El manejo multidisciplinario ante la sospecha ultrassonográfica prenatal de aneuplodía, tiene la ventaja de poder ofrecer estudio citogenético en casos seleccionados; de establecer diagnóstico definitivo y de permitir un manejo adecuado de los embarazos, con apoyo psicológico a los padres y de evitar intervenciones innecesarias tanto a la madre como al recién nacido

Experiencia preliminar en el uso del doppler de arteria cerebral media fetal en madres RH negativas sensibilizadas / Preliminar experience in the use of doppler of fetal medial cerebral artery in alloinmumized mothers to negative rhesus factor

Se presentan 4 pacientes aloinmunizadas al factor Rh, en las cuales se efectuó seguimiento con ultrasonido Doppler color midiendo el flujo máximo de la arteria cerebral media con el propósito de evaluar anemia fetal, técnica de menor riesgo que la amniocentesis. Los 4 casos presentaron valores normales, lo que correlacionó con un buen resultado perinatal. Es necesario aumentar la casuística para poder validar el método

Torsión anexial: aproximación diagnóstica por imágenes / Adnexal torsion: imaging diagnostic approximation

La torsión de los anexos uterinos es una condición quirúrgica poco frecuente causada por la rotación parcial o completa del pedículo ovárico sobre su eje, produciendo congestion y necrosis del ovario. El cuadro clínico es a menudo confuso, lo que retrasa el diagnóstico y tratamiento oportuno. Exámenes de imágenes son un importante elemento de apoyo, principalmente la ultrasonografía convencional y Doppler color dadas sus ventajas de rapidez, disponibilidad, bajo costo y no invasividad. El signo sonográfico característico de esta entidad es la presencia de múltiples folículos ubicados en la periferia de un ovario agrandado en forma unilateral. La ultrasonografía Doppler color es específico pero poco sensible donde la ausencia de flujo indica oclusión venosa y arterial completa, pero su presencia no excluye el diagnóstico. La tomografía axial computada y la resonancia nuclear magnética usualmente no son requeridas, pero se han descrito algunos hallazgos que pueden ayudar a un correcto diagnóstico

Diagnóstico prenatal de situs inversus totalis / Prenatal diagnose of situs inversus totalis

Se presenta un caso clínico de diagnóstico prenatal por ultrasonografía de Situs Inversus completop en la Unidad de ultrasonografía del Hospital San Juan de Dios con su confirmación post natal por radiología y ultrasonografía. Es de notar la baja incidencia de esta patología y la importancia del diagnóstico prenatal por las posibles múltiples malformaciones asociadas

Diagnóstico prenatal y manejo perinatal de defectos nefrourológicos / Prenatal diagnosis and perinatal management of nephrourologic abnormalities

Los defectos nefrourológicos tienen una alta frecuencia en el examen ultrasonográfico prenatal. Los defectos mayores de riñones o vejiga son vistos en aproximadamente 2 a 3 por 1000 embarazos, sobre 2 por ciento de los fetos tiene un diagnóstico menos grave. Los defectos nefrourológicos pueden ser únicos o formar parte de un síndrome genético. El objetivo de este trabajo es presentar la experiencia recopilada durante cinco años en diagnóstico prenatal y manejo perinatal de defectos nefrourológicos. Nuestro servicio cuenta con un equipo de ultrasonografistas que realizan exámenes a pacientes del área del Servicio de Salud Metropolitano Occidente; se cuenta además con la participación de un grupo multidisciplinario de médicos compuesto por neonatólogos, genetistas y cirujanos infantiles con los cuales se revisan los casos y se discute él diagnóstico, pronóstico y tratamiento perinatal de nuestras pacientes

Tumor ovárico fetal: diagnóstico ultrasonográfico y manejo perinatal / Fetal ovarian cyst: ultrasound diagnosis and perinatal management

Las lesiones ováricas fetales son de baja incidencia, siendo su diagnóstico prenatal de importancia, ya que permite orientar al clínico respecto a la probable etiología y decidir su manejo perinatal. En la siguiente publicación se revisan cuatro casos de lesiones ováricas con diagnóstico prenatal y el resultado del seguimiento postnatal de cada una de ellas

Diagnóstico ultrasonográfico antenatal de quiste del colédoco y su manejo perinatal / Prenatal ultrasonographic diagnosis of choledochal cyst and perinatal management

Se presentan dos casos de dilatación quística de la vía biliar fetal diagnosticados antenatalmente mediante ultrasonografía, además de su correlación posnatal y manejo quirúrgico, en el Servicio de Obstetricia Ginecología del Hospital San Juan de Dios. Es de notar que estas malformaciones son de muy escasas incidencia. Además, el diagnóstico prenatal muchas veces es difícil y se engloba bajo el diagnóstico de quiste abdominal fetal

Diagnóstico y manejo perinatal de trisomia 18 / Diagnosis and perinatal management of trisomy 18

El síndrome de Edwards es un cuadro de baja frecuencia y muy mal pronóstico, por lo cual el diagnóstico prenatal es indispensable para tomar una conducta adecuada. Presentamos 9 casos en los cuales se sospechó este diagnóstico por ultrasonido con confirmación pre o postnatal. Destacan por su frecuencia la presencia de retardo de crecimiento intrauterino, polihidramnios y el signo de mano traslapada. La trisomía 18 tiene una mortalidad perinatal de 89 por ciento con un 78 por ciento de partos vaginales