Caracterização da distribuição da galectina-3 no timo de camundongos diabéticos não-obesos (NOD) / Characterization of galectin-3 distribution in non-obese diabetic (nod) mouse thymus

A galectina-3 pertence a uma família de lectinas endógenas que se ligam a -galactosídeos presentes na superfície celular e em glicoproteínas de matriz extracelular (ECM). No timo,essa lectina está envolvida com funções biológicas como adesão celular, migração e apoptose.Trabalhos recentes relacionaram a galectina-3 com o diabetes mellitus insulino-dependente.Essa doença é caracterizada pela destruição de células -pancreáticas mediada principalmente por linfócitos T autorreativos. Os camundongos NOD representam um modelo adequado para estudar o diabetes autoimune, pois desenvolvem a doença espontaneamente de modo similar aos humanos. Nosso grupo descreveu a presença de importantes alterações no timo destes animais como o desenvolvimento de espaços perivasculares (PVS) gigantes, caracterizados pela retenção de células T e B entremeadas por uma rede de ECM, associado a uma deficiência na expressão do receptor de fibronectina VLA-5. Com base nestes dados, o presente trabalho teve o objetivo principal: caracterizar as células que expressam galectina-3 no timo, verificando sua interação com células e moléculas de ECM presentes nos PVS. Notamos um aumento significativo da colocalização da galectina-3 com células epiteliais e dendríticas corticais e medulares no timo dos camundongos NOD, em relação às células de camundongos BALB/c...

Galectin-3 belongs to a family of endogenous lectins which bind to -galactosides presentedon the cell surface and extracellular matrix (ECM) glycoproteins. In the thymus, this lectin isinvolved in biological functions such as cell adhesion, migration and apoptosis. Recent papersrelated galectin-3 to insulin-dependent diabetes mellitus. This disease is characterized bypancreatic -cell destruction mediated by autoreactive T lymphocytes. NOD mice represent asuitable model to study diabetes, as they develop the disease in a similar way as humans. Ourgroup described important thymic alterations in these mice such as the development of giantperivascular spaces (PVS), characterized by the retention of T and B cells, intermingled withan ECM network and associated with a defect in the expression of the fibronectin receptorVLA-5. Based on these results, the present work has the main objective: to characterizegalectin-3-positive cells in the NOD mouse thymus, verifying its interaction with cells andECM molecules present in PVS. We noticed a significant enhancement of galectin-3colocalization with cortical and medullary epithelial and dendritic cells in NOD mice, inrelation to BALB/c cells. The quantitative analysis revealed a reduction of colocalization ofgalectin-3 with fibronectin and laminin, suggesting an accumulation of this lectin insidethymic microenvironmental cells...

Expressão e possível papel funcional da galectina-3 no timo de camundongos diabéticos não-obesos (NOD) / Expression and possible functional role of galectin-3 in the thymus of non-obese diabetic mice (NOD)

A galectina-3 pertence à família de lectinas endógenas que se ligam a beta-galactosídeos presentes na superfície celular e glicoproteínas de matriz extracelular. Está envolvida em múltiplas funções biológicas como crescimento celular, adesão, proliferação e apoptose. Além disso, a galectina-3 é encontrada em diversos tecidos e órgãos, sendo altamente conservadas nas espécies animais. Trabalhos recentes relacionaram a galectina-3 com doenças autoimunes com a diabetes mellitus insulino-dependente. Esta doença é caracterizada pela destruição de células beta-pancreáticas pelas células T autorreatives e por autoanticorpos. Camundongos NOD representam um modelo adequado para estudar a diabetes autoimune, pois desenvolvem a doença espontaneamente de modo similar aos humanos. Dados prévios do nosso grupo mostraram importantes alterações no timo destes animais como o desenvolvimento de espaços perivasculares gigantes, entremeados por uma rede de matriz extracelular, sugerindo uma deficiência na saída destas células maduras deste órgão. Este defeito é associado com uma baixa expressão do receptor de fibronectina VLA-5. Considerando que a galectina-3 é uma proteína expressa no timo e recentemente relacionada com a patogênese da diabetes tipo 1, o objetivo deste estudo foi avaliar a expressão de galectina-3 e o possível papel funcional desta lectina no timo de camundongos NOD. Para atender este objetivo analisamos a expressão de galectina-3 no timo destes animais por imunohistoquímica, a ligação de galectina-3 nos timócitos por citometria de fluxo, a capacidade migratória dos timócitos em presença de galectina-3 e fibronectina em sistema de câmaras de Transwell, além da saída dos timócitos do timo influenciados pela galectina-3. Nós observamos um aumento significativos de células positivas para a galectina-3 no timo de camundongos NOD, principalmente na medula. Além disso, observamos um aumento significativo da ligação de galectina-3 em CD4 CD8 (duplo-negativo) e uma diminuição em CD8 simples positivo, quando comparado com timócitos BALB/c. De modo interessante, verificamos que timócitos de NOD tratados com galectina-3 migram menos comparados aos timócitos controles. Este resultado nos levou a formular a hipótese de que a migração sob estímulo da galectina-3 era dependente de VLA-5. Ensaios de bloqueio com anticorpo anti-VLA-5 mostraram que timócitos migram menos na presença da lectina quando seu receptor VLA-5 era bloqueado, confirmando nossa hipótese. Por fim, observamos que a migração transendotelial de timócitos de NOD sob influência de galectina-3 é deficiente, sugerindo que a lectina exerça um papel importante na emigração destas células para a periferia.