Papel de las citoquininas en la resistencia y patología durante la infección con Trypanosoma cruzi / Role of cytokines in the resistance and pathology during infection with Trypanosoma cruzi

La enfermedad de Chagas se asocia con diversos trastornos inmunológicos. La participación del sistema inmune del huésped infectado en la resistencia a Trypanosoma cruzi es bien conocida, no así su papel patogénico. En esta dinámica, las citoquinas juegan un papel fundamental ya que su actividad determina el inicio, duración y composición de la respuesta inmune. El interferón-gamma (IFN-t) es la citoquina más relacionada con la resistencia a T. cruzi dada su capacidad para activar a los macrófagos cuya actividad tripanocida se correlaciona con la producción de especies reactivas del oxígeno (ROS) y óxido nítrico (NO). Otras citoquinas como las interleuquinas 4 (IL-4) y 10 (IL-10) y el factor de crecimiento y transformación beta (TGF-ß) inhibirían los efectos del IFN-t durante la infección con T. cruzi, ya que desactivan la capacidad tripanocida de macrófagos e inhiben la liberación de NO. Durante la infección con T. cruzi, el factor de necrosis tumoral alfa (TNF-a) se ha asociado tanto a la resistencia como al desarrollo de patología mientras que las interleuquinas 1 (IL-1) y 6 (IL-6) se han relacionado con alteraciones del endotelio vascular responsables del espasmo microvascular observado en la miocardiopatía chagásica. Diversas citoquinas inducen la expresión de moléculas de adhesión que contribuirían al desarrollo de las procesos inflamatorios a través de las interacciones celulares del sistema inmune y de éste con las células blanco de los tejidos. En la infección aguda con distintas cepas de T. cruzi se demostró la expresión de la molécula de adhesión intercelular 1 (ICAM-1) en miocardiocitos y leucocitos inflamatorios en forma paralela a la producción de citoquinas proinflamatorias. Los resultados descriptos en modelos experimentales muestran que la infección con T. cruzi induce la producción de citoquinas cuyas actividades biológicas regulan la resistencia al parásito y posiblemente la patología de la forma crónica de la enfermedad de Chagas. Más aún, el delicado balance entre citoquinas determinaría el curso de la infección ya que los mismos mecanismo involucrados en la resistencia participarían en el desarrollo de patología y la enfermedad se apoyaría en una alteración del equilibrio regulatorio de la respuesta inmune

Bases moleculares e inmunológicas para el desarrollo de una vacuna contra la enfermedad de Chagas / Molecular and immunological bases for the development of a vaccine against Chagas'disease

Diferentes fracciones subcelulares de epimastigotes de T.cruzi fueron ensayadas en su capacidad de inducir protección o agresión en animales experimentales. La fracción flagelar (F) tuvo las mejores propiedades protectoras, sin efectos agresivos sobre los tejidos. Se prepararon varios anticuerpos monoclonales contra esta fracción. Dos de ellos, FCH-F8-1 y 4, mostraron capacidad de neutralizar la infectividad de tripomastigotes sanguíneos, de producir la lisis mediada por complemento de tripomastigotes de cultivo y de reconocer antígenos de la superfície de ambas formas epi y tripomastigotes. El anticuerpo FCH-F8-1, reconoce por inmunoprecipitación, una proteína de 85 kDa en tripomastigotes, mientras que en "blotting" reaccionó con una molécula de 43 kDa, en ambas formas del parásito. El otro anticuerpo, FCH-F8-4 reaccionó por esta última técnica, con varias proteínas de peso molecular entre 50 y 150 kDa, en epimastigotes y sólo con dos (15 y 48 kDa) en tripomastigotes. Ratones inmunizados con antígenos purificados por cromatografia de afinidad usando FCH-F8-4, fueron protegidos contra el desafio de formas infectantes. En una biblioteca de ADNc de epimastigotes de T. cruzi construída en el vector I gt11 se detectaron varios clones, tres con FCH-F8-4 y dos con FCH-F8-1. Dos clones, uno de cada grupo fueron estudiados, y (FCH-F8-1) 1 y (FCH-F8-4) 1. El tamaño de los insertos para ambos fue de 150 pares de bases y utilizados como sondas detectaron ARNm de epimastigotes de 3,5 y 5,0...

Respuesta inmune humoral en bovinos vacunados contra aftovirus. Estudio de la cinética de anticuerpos protectores y neutralizantes / [Humoral immune response in cattle vaccinated against aphthovirus. Study of the kinetics of protective and neutralizing antibodies]

The sera of three groups (I, II and III) of cattle vaccinated every three months with trivalent hydroxysaponinated commercial vaccine against aphthovirus were studied. The only difference between groups I and II was that the former received a revaccination on day 17 after the initial immunization. Groups I and II included sera from animals three months old born from vaccinated mothers. Group III consisted of the sera of adult animals (the mothers of animals in groups I and II). The animals from the three groups were bled monthly during one year. The studies were performed with pooled sera from each group. The presence of protective and neutralizing antibodies was investigated in the gammaglobulin fractions which were then separated into subclasses, by chromatography on DE-cellulose columns, in order to study their biological activity. The immunization of cattle 3 months old with commercial vaccine against aphthovirus resulted in weak primary humoral response; neutralizing antibodies could not be detected. When the animals were restimulated three weeks after the first immunization, neutralizing antibodies appeared although the response did not persist. Nevertheless, five months after the experiment was started both groups I and II showed neutralizing antibodies. (Fig. 1, 2, 3). Persistent immunity to the three virus subtypes was acquired by animals of groups I and II but not before nine months. The kinetics of protective antibodies was similar to that of neutralizing antibodies, but with higher titers. Some bleedings that did not show neutralizing activity, did show significant protective activity (Figs. 4, 5). The investigation of the neutralizing activity of the gammaglobulin subclasses obtained by chromatography revealed that there was not one single subclass responsible for this activity, but that several subclasses were involved. The gammaglobulin subclasses were analyzed by immunoelectrophoresis; proteins with alpha 2 mobility appeared, coincident with early bleedings of high neutralizing titers, although these proteins did not present neutralizing activity (Tables 1, 2). The protective and neutralizing activity was not correlated with the protein concentration of the fractions so that the increase observed may be due to a qualitative change in the antibodies.