Bone marrow fibroblasts in patients with advanced lung cancer

In a previous study we demonstrated that the incidence of fibroblast colony-forming units (CFU-F) was very low in bone marrow primary cultures from the majority of untreated advanced non-small lung cancer patients (LCP) compared to normal controls (NC). For this reason, we studied the ability of bone marrow stromal cells to achieve confluence in primary cultures and their proliferative capacity following four continuous subcultures in consecutive untreated LCP and NC. We also evaluated the production of interleukin-1ß (IL-1ß) and prostaglandin E2 (PGE2) by pure fibroblasts. Bone marrow was obtained from 20 LCP and 20 NC. A CFU-F assay was used to investigate the proliferative and confluence capacity. Levels of IL-1ß and PGE2 in conditioned medium (CM) of pure fibroblast cultures were measured with an ELISA kit and RIA kit, respectively. Only fibroblasts from 6/13 (46 percent) LCP confluent primary cultures had the capacity to proliferate following four subcultures (NC = 100 percent). Levels of spontaneously released IL-1ß were below 10 pg/ml in the CM of LCP, while NC had a mean value of 1,217 + or - 74 pg/ml. In contrast, levels of PGE2 in these CM of LCP were higher (77.5 + or - 23.6 pg/ml) compared to NC (18.5 + or - 0.9 pg/ml). In conclusion, bone marrow fibroblasts from LCP presented a defective proliferative and confluence capacity, and this deficiency may be associated with the alteration of IL-1ß and PGE2 production

Apoptosis y expresión de Bcl-2 y Bax en el endometrio eutópico de pacientes con endometriosis / Apoptosis and Bcl-2 and Bax in normal endometrium of patients with endometriosis

El objetivo de este trabajo es investigar una posible predisposición de las células endometriales de pacientes con endometriosis (EDT), a ser resistentes a la muerte celular programada. Se evaluó apoptosis y expresión de las proteínas Bcl-2 y Bax en 30 cortes de tejido de endometrio eutópico, 14 de mujeres con EDT y 16 de controles (C). Para la determinación de apoptosis, se utilizó el kit Apoptag-Plus basado en la localización y tinción de los extremos 3'-OH de los fragmentos de ADN. Los resultados se expresan como nº de células apoptóticas (CA)/campo a 630x de aumento. Se detectaron CA sólo en el epitelio glandular. Se observó menor cantidad de CA en tejido endometrial proveniente de pacientes con EDT: 2,26 ñ 0,53 vs 9,37 ñ 1,69 en los C (p<0,001). Esta disminución se conservó a lo largo del ciclo menstrual. En la fase proliferativa tardía, los resultados fueron de: 7,08 ñ 0,92 vs 1,9 ñ 0,73 (p<0,05), para las muestras provenientes de mujeres C y pacientes con EDT respectivamente; mientras que en el endometrio secretorio los niveles de apoptosis detectados fueron de 11,6 ñ 1,74 en los C vs 2,7 ñ 0,82 en EDT (p<0,001). No se observaron diferencias significativas de apoptosis en endometrio de acuerdo al grado de la enfermedad. La evolución de los productos de protooncógenes, bcl-2 y bax se realizó utilizando metodologías de inmunohistoquímica. Se halló incrementada la expresión de la proteína antiapoptótica Bcl-2 en el endometrio proliferativo proveniente de pacientes con EDT comparado con el C. La expresión del antagonista de Bcl-2, Bax, aumentó durante la fase secretoria tanto en muestras provenientes de pacientes como de C, y se halló ausente durante la fase proliferativa. De los resultados se desprende que las células endometriales de pacientes con EDT poseen características apoptóticas alteradas que las harían más susceptibles a crecer en un sitio ectópico. Estas no se ven modificadas a lo largo del ciclo menstrual. La proteína Bcl-2 estaría implicada en la protección de la apoptosis de las células endometriales eutópicas de pacientes con EDT durante la fase proliferativa del ciclo menstrual. La proteína Bax estaría involucrada en la regulación de la muerte celular programada que se produce en el endometrio eutópico previo a la menstruación. La resistencia a la muerte celular programada que posee el endometrio eutópico de pacientes con EDT, estaría relacionada con la etiología y/o fisiopatología de la enfermedad

Citoquinas embrionarias y su posible uso como parámetro predictivo en técnicas de IVF / Embryonic cytokines and its possible use as prediction parameter in IVF techniques

El objetivo del presente trabajo fue evaluar los niveles de IL-1 e IL-6 en sobrenadantes de distinto número de embriones humanos de 24 horas en relación con la viabilidad de los embarazos, con el fin de determinar su posible utilidad como test predictivo en las prácticas de fertilización asistida. Para ello se analizaron 36 muestras de medios condicionados de cultivo de embriones humanos (MCCEH) de 24 horas y 17 medios controles (medios de cultivo igualmente adicionados con 10 por ciento de suero autólogo pero sin contacto con embriones). Se observó que los MCCEH de embriones que luego de ser transferidos produjeron embarazos viables tuvieron los valores más altos de IL-1b (82 ñ 4 pg/ml, n=11) con respecto a aquellos que no produjeron embarazos viables (14 ñ 2 pg/ml, n=25) p<0,001 y significativamente mayores a los medio controles (11 ñ 1 pg/ml, n=17). Estas diferencias en los niveles de IL-1ß fueron igualmente significativas al analizar los resultados obtenidos de acuerdo al número de embriones por muestra. La evaluación de los niveles de IL-6 sin embargo no dio resultados comparables a los obtenidos en la determinación de IL-1ß, puesto que los valores hallados fueron extremadamente bajos (= 20 pg/ml). Estos resultados indican que la determinación de los niveles de IL-1ß en MCCEH podría ser un buen parámetro predictivo en pacientes sometidas a técnicas de fertilización asistida

Accion de un polisacarido aislado del hongo Cyttaria johowii sobre el crecimiento del sarcoma 180 en ratones. / Effect of a polysaccharide isolated from the fungus Cyttaria johowii on the growth of sarcoma 180 in mice

Se estudio la actividad antitumoral de un polisacarido homogeneo obtenido del hongo Cyttaria johowii, a traves del efecto inhibitorio que produjo sobre el crecimiento del sarcoma 180 ascitico, inoculado por via intradermica o intraperitoneal en ratones endocriados de la cepa BALB/c. El polisacarido fue inoculado por via intraperitoneal durante 5 dias consecutivos comenzando 24 horas despues del inoculo tumoral. La dosis utilizada fue de 5 y 10 mg/kg raton/dia, para los grupos desafiados con sarcoma 180 intradermico y con sarcoma 180 intraperitoneal, respectivamente. Pudo observarse que el tratamiento con polisacarido produjo disminucion del crecimiento tumoral, maximo al 8o. dia tanto en los ratones inoculados con tumor por via id como ip. Ademas, se comprobo aumento del porcentaje de sobrevivientes y prolongacion de la media de dias de sobrevida, comparado con los animales tratados solo con tumor. Simultaneamente, fue analizada la accion del polisacarido sobre las poblaciones celulares de sangre periferica, observandose una disminucion significativa de linfocitos, maximo en el dia 15 en los ratones inoculados con sarcoma 180 ip, estas variaciones hematologicas no fueron observadas en los ratones desafiados con sarcoma 180 id. Ademas, se comprobo disminucion de la agregacion plaquetaria en los ratones con tumor tratados con polisacarido, respecto a los no tratados

Actividad supresora inducida por concanavalina A en linfocitos de sangre periferica de pacientes con tumores solidos malignos. / Suppressor activity induced by concanavalin A in peripheral blood lymphocytes of patients with solid malignant tumors

La actividad supresora inducida por concanavalina A fue evaluada en linfocitos perifericos de 20 pacientes con tumores solidos malignos de distinto origen: 9 carcinomas epidermoides de pulmon, 6 adenocarcinomas de mama y 5 melanomas. Simultaneamente se estudiaron 10 controles normales. En los resultados obtenidos, no se observaron diferencias significativas en los porcentajes de supresion de los pacientes afectados de adenocarcinomas de mama y carcinomas epidermoides de pulmon respecto a los controles normales, mientras que los enfermos con melanomas presentaron valores significativamente superiores. Al mismo tiempo, fue medida la respuesta linfoproliferativa a la concanavalina A, encontrandose un aumento de esta en el grupo de enfermos con melanomas en comparacion con los valores normales. El porcentaje relativo de linfocitos en sangre periferica no mostro diferencias entre enfermos y controles

Evaluacion de linfocitos perifericos en pacientes con tumores solidos malignos. / Evaluation of peripheral lymphocytes in patients with solid malignant tumors

Mediante la identificacion de diferentes poblaciones de linfocitos perifericos, se realizo un estudio comparativo entre 32 pacientes con neoplasias solidas malignas de distinto origen, sin tratamiento oncologico previo y 17 controles sanos. Para su evaluacion se utilizaron las tecnicas de formacion de rosetas espontaneas con globulos rojos de carnero (rosetas E) para linfocitos T, de rosetas EAC para celulas con receptor para el complemento, y de inmunofluorescencia directa para linfocitos con Ig de superficie. Ademas, se valoro el numero total de leococitos y el porcentaje de linfocitos antes y despues del tratamiento antineoplasico instituido. Los valores correspondientes al % de rosetas E, no mostraron diferencias entre los distintos grupos de enfermos ni con relacion a los controles normales. Con respecto al % de rosetas EAC no se observaron diferencias entre los testigos y los distintos grupos de enfermos estudiados, aunque si pudieran advertirse entre los pacientes con adenocarcinomas y los portadores de melanomas (p < 0.05). Los resultados obtenidos en el estudio de celulas con Ig de superficie, mostraron diferencias entre los enfermos con adenocarcinomas y los testigos sanos, y con el grupo de Ca epidermoide. El % de linfocitos antes y despues del tratamiento, fue similar en los enfermos con melanomas, adenocarcinomas y carcinomas epidermoides, pero disminuyo sensiblemente en el grupo con cancer de pulmon, estimandose que ese porcentaje durante la enfermedad, estaba en relacion directa con el periodo de sobrevida de los pacientes

Cancer y BCG. / Cancer and BCG

En el presente trabajo se evaluan distintos aspectos relacionados con las modificaciones que ejerce el Bacilo Calmette-Guerin (BCG) sobre el crecimiento tumoral en modelos experimentales y en su aplicacion a la clinica humana. Los mecanismos por los cuales un tumor inoculado conjuntamente con BCG es rechazado por el huesped, involucran la participacion de diferentes poblaciones celulares, tales como linfocitos sensibilizados, macrofagos activados y celulas efectoras de la citotoxicidad espontanea ("Natural Killer Cells") La dosis de BCG utilizada y la via de inoculacion tienen fundamental importancia para que el rechazo se efectue: dosis altas producen efectos toxicos y pueden activar mecanismos supresores mediados por celulas y factores sericos. La accion del BCG sobre el crecimiento tumoral se efectivizo unicamente en ciertas circunstancias, por lo tanto el sistema huesped-tumor empleado debe ser elegido cuidadosamente