ABSTRACT
Se obtuvieron anticuerpos contra angiotensina II (ANG II) para medir la concentración de este octapétido por radioinmunoanálisis (RIA). La NG II se acopló a proteínas de alto peso molecular, se emulsionó con adyuvante de Freund y se inyectó intradérmicamente. Las cuatro primeras inmunozaciones se dieron a intervalos semanales. Las proteínas a las cuales se acopló el octapéptido para la primera, segunda, tercera y cuarta inmunización fueron: tiroglobulina, albúmina sérica bovina, ovoalbúmina y tiroglobulina, respectivamente. La quinta inmunización se dio doce semanas después con ANG II acoplada a hemocianina. El título del anticuerpo se determinó por RIA. Uno de los conejos inmunizados produjo un anticuerpo altamente específico, con un título de 1: 10,000 y una sensibilidad de 1.9 picogramos de ANG II. La especificidad del anticuerpo se evaluó midiendo el porcentaje en que este anticuerpo cruza péptidos relacionados estructuralmente. La reacción cruzada con [Sar, Tres] ANG II, [Sar, Gli] ANG II, [Sar, Ile] ANG II, [Val] ANG I y angiotensinógeno fue indetectable. La reacción cruzada con [Sar, Ala] ANG II, angiotensina III, [Des-Asp] ANG I, [Val] ANG II y angiotensina I fue de 3.3, 8.3, 0.2, 3.1 y 1.0% respectivamente. El anticuerpo obtenido es adecuado para medir directamente la ANG II en el plasma de ratas, así como de otras especies tales como el perro, el conejo, el ratón y el humano, cuya secuencia de aminoácidos es idéntica
Subject(s)
Rabbits , Animals , Angiotensin II/immunology , Antibodies/analysis , RadioimmunoassayABSTRACT
En este trabajo se midieron los niveles de angiotensina II (ANG II) en ratas sometidas a estímulos del sistema renina angiotensina (SRA). Los estímulos usados fueron: isoproterenol, clonidina, propranolol, captopril, anestesia, deshidratación, binefrectomía, ligación ureteral y cloro de sodio al 1 y 2% en el agua de beber. En el plasma de estas ratas se midió además de la ANG II, la angiotensina I (ANG I), la actividad de renina (APR) y la concentración de renina (CPR), de angiotensinógeno (CPA) y de aldosterna (CPALDO). La anestesia, la deshidratación, el isoproterenol y el captopril aumentaron la renina y la ANG II, pero no la CPALDO. Por el contrario, la binefrectomía, el cloruro de sodio al 2%, la clonidina y el propranolol disminuyeron la renina. La clonidina disminuyó la ANG II y la binefrectomía al aumentó. El cloruro de sodio al 2% disminuyó la CPALDO y la binefrectomía la aumentó. La ligación ureteral y el cloruro de sodio al 1% no cambinaron la renina ni la ANG II, sin embargo la ligación ureteral aumentó la CPALDO. La binefrectomía, la ligación ureteral y el cloruro de sodio al 1 y 2% aumentaron la CPALDO y el captopril la disminuyó. No con todos los estímulos hubo un cambio paralelo de la ANG II y la actividad del SRA circulante. Esto puede ser explicado por cambios en la actividad del SRA tisular, por cambios en el catabolismo de la ANG II y/o por la actividad de otras enzimas, no relacionadas con el SRA, que producen ANG II