Avaliação de uma sonda genética (Sistema Accuprobe, Gen Probe®) para identificação de organismos do complexo Mycobacterium tuberculosis, em comparação com métodos tradicionais de caracterização / Evaluation of a genetic probe (Gen-Probe Accuprobe® system) in comparison to traditional methods for identifying members of the Mycobacterium tuberculosis complex

INTRODUÇÃO: O aparecimento da co-infecção tuberculose/síndrome da imunodeficiência adquirida, o aumento de doenças por micobactérias não tuberculosas e as confusões que estas podem ter com as emergentes cepas multirresistentes exigem respostas laboratoriais mais rápidas e de melhor rendimento, não só com isolamento das micobactérias, mas também com a sua identificação. OBJETIVO: Estudo comparativo entre uma nova ferramenta de identificação molecular com sonda genética baseada na unidade 16S do gene rDNA do Mycobacterium tuberculosis (Accuprobe Gen Probe®, Gen Probe Inc.) e a metodologia clássica. MÉTODO: Foram selecionados 55 isolados do gênero Mycobacterium, mantidos em bacterioteca, obtidos de escarros de pacientes de uma unidade de referência para tuberculose. Foram feitos repiques em três tubos: um destinado à identificação genética, outro para realização dos testes clássicos (produção e acumulação da niacina, e crescimento em meio de Lowenstein-Jensen com agentes inibidores - ácido p-nitrobenzóico e hidrazida do ácido tiofeno-2-carboxílico), e outro reserva. RESULTADOS: A sonda identificou 51 amostras do complexo M. tuberculosis (uma associada ao M. kansasii) e 4 como micobactérias não tuberculosas, posteriormente identificadas como M. kansasii (3) e M. avium (1). Os métodos tradicionais identificaram 47 amostras como do complexo M. tuberculosis, 4 com perfil de micobactérias não tuberculosas (concordante com o obtido pela sondagem genética) e 4 provas inconclusivas, uma delas exatamente a que associava duas espécies de micobactérias. CONCLUSÃO: Os benefícios da técnica de biologia molecular justificam sua implantação e uso rotineiro, associado aos métodos clássicos, numa unidade com alta demanda e que atenda casos de tuberculose de alta complexidade.

Rendimento da cultura de escarro na comparação de um sistema de diagnóstico automatizado com o meio de Lowenstein-Jensen para o diagnóstico da tuberculose pulmonar / Sputum culture yield: comparing an automated diagnostic system to Lõwenstein-Jensen medium in the diagnosis of pulmonary tuberculosis

INTRODUÇÃO: A tuberculose permanece um problema de saúde pública mundial. OBJETIVO: Avaliar um sistema de diagnóstico automatizado de tuberculose, comparando-o com baciloscopia e cultura em meio de Lowenstein-Jensen. MÉTODO: Estudo comparativo entre os resultados obtidos no sistema automatizado, baciloscopia do escarro e em meio de Lowenstein-Jensen, em 844 amostras de escarro de setembro a dezembro de 1999, em centro de referência para tuberculose em São Paulo (SP). RESULTADOS: Das 844 amostras, 27,1 por cento mostraram-se positivas para bacilo álcool-acidorresistente e 72,9 por cento negativas. Nos cultivos em Lowenstein-Jensen, 34,7 por cento foram positivas e 63 por cento negativas; no sistema automatizado, 37,1 por cento foram positivas e 56,9 por cento negativas. Observou-se sensibilidade de 98,1 por cento e 91.9 por cento no sistema automatizado e no Lowenstein-Jensen, respectivamente. A especificidade e o valor preditivo positivo foram de 100 por cento nos dois métodos. O valor preditivo negativo foi de 98,9 por cento no sistema automatizado e de 95,5 por cento no Lowenstein-Jensen. A acurácia foi de 99,3 por cento no sistema automatizado e 97 por cento no Lowenstein-Jensen e o Kappa de 0,99 no sistema automatizado e 0,94 no Lowenstein-Jensen. O tempo médio de detecção das micobactérias no sistema automatizado (10,5 dias) apresentou diferença estatística significativa quando comparado com o método de Lowenstein-Jensen (34,7 dias). CONCLUSÃO: O rendimento da cultura com o sistema automatizado apresentou diferença estatística significativa quando comparado com o meio de Lowenstein-Jensen. O tempo médio de detecção das micobactérias foi significativamente reduzido no sistema automatizado. O rendimento do sistema automatizado justifica sua utilização em unidade de referência ambulatorial para a tuberculose em São Paulo.

Microbiota do megaesôfago e carcinogênese / Megaesophagus microbiota and carcinogenesis

INTRODUÇAO: O risco de desenvolvimento de carcinoma esofágico em portadores de megaesôfago é 33 vezes superior ao da populaçäo em geral. Possível explicaçäo para este fenômeno poderia estar relacionada à produçäo de compostos N-nitrosos na luz do órgäo, a partir da transformaçäo de nitratos da dieta em nitritos, mediada por bactérias em suspensäo no líquido de estase e com o contato crônico destes carcinógenos com a mucosa esofágica. OBJETIVO: Analisar a microbiota esofágica em pacientes portadores de megaesôfago de etiologia chagásica, com especial atençäo para a presença de bactérias com capacidade de reduçäo de nitratos. CASUíSTICA: Foram estudados prospectivamente 15 pacientes portadores de megaesôfago chagásico com idades variando de 28 a 73 anos, sendo 9 do sexo feminino e 6 do sexo masculino, que foram divididos em 3 grupos iguais de 5, de acordo com o grau de dilataçäo do esôfago, segundo a classificaçäo de Rezende et al. (Grau I, Grau II e Grau III). MÉTODO: A coleta do líquido de estase para estudo microbiológico era realizada através de sonda de Levine nº 14, que era passada pela boca, por dentro de uma cânula de intubaçäo orotraqueal nº 7,5, mantendo-se sua extremidade escondida, a fim de evitar sua contaminaçäo. RESULTADOS: Foram obtidas 93,3 por cento de culturas positivas com grande variedade de microrganismos e predomínio de aeróbios Gram-positivos e anaeróbios. As concentrações de microrganismos foram tanto maiores, quanto maior o grau de dilataçäo do esôfago. Entre os microrganismos encontrados, o Staphylococcus sp, Corynebacterium sp, Peptostreptococcus sp e a Veillonella sp foram aqueles identificados como tendo a capacidade de reduçäo de nitratos a nitritos. CONCLUSÄO: No megaesôfago chagásico há bactérias na luz do órgäo com capacidade de reduçäo de nitratos da dieta, passo importante na produçäo de compostos N-nitrosos.

Molecular characterization of Listeria monocytogenes isolated from foods

A total of 30 strains of "Listeria monocytogenes" isolated from different foods (16 of different kinds of sausage, 14 cheese) purchased at groceries of São Paulo City were ribotyped and analysed for the presence and expression of hemolysin gene and production of phosphatidylinositol-specific phospholipase C-PI-PLC enzyme. The "L. monocytogenes" strains were differentiated into six ribotype classes. A total of 13 (43.3(per cent)) from these strains belong to the same ribotype (ribotype I), and was coincident to the ribotype of the standard "L. monocytogenes" prototype strain (ATCC-15313). The hemolytic activity was observed in 29 (96.7(per cent)) strains when incubated at 37ºC, but not at 4ºC. The direct colony hibridizatioon method for hemolysin gene detection showed a positive reaction with other "Listeria" spp. The PI-PLC was produced by (90(per cent)) of the strains analysed. There was no correlation between the six identified ribotypes and the virulence facors (hemolysin and PI-PLC) studied

Alternative culture medium for isolation and growth of Borrelia burgdorferi

Borrelia burgdofer é uma spirochete que é agente causador de doenças infecciosas: Doença Lyme (LD). Muitos meios de cultura säo descritos para isolamento e crescimento desse agente. O autor descreve um meio alternativo de cultivar em laboratório o vírus do Lyme spirochetes

Grau de sensibilidade de anaeróbios a antimicrobianos / Susceptibility degree of anaerobic bacteria to antimicrobial agents

Os autores verificaram o grau de sensibilidade de cinco (5) amostras de bactérias anaeróbicas estritas, isoladas do sulco gengival de pacientes normo-reativos, frente a oito (8) agentes antimicrobianos utilizados na clínica odontológica. As amostras, constituídas de Bacteroides me; aninogenicus, Fusobacterium necrophorum, Veillonella sp, Peptostreptococcus sp e Propionibacterium sp, foram inoculadas em meios seletivos baseados nos critérios indicados no Anaerobic Laboratory Manual (VIRGINIA POLYTECHNIC INSTITUTE & STATE UNIVERSITY ANAEROBE LABORATORY, 1977) e a suscetibilidade foi avaliada pelo método do disco em caldo (Wilkins & Thiel, 1973). Os resultados demonstram a eficiência dos agentes antimicrobianos na seguinte ordem descrecente: cloranfenicol, clindamicina, ampicilina, tetraciclina, cefalotina, penicilina G, eritromicina e metronidazol

Estudo da microbiota do ar da clínica odontológica do Hospital Universitário da Faculdade de Odontologia da Universidade de São Paulo / Study of environmental microbiology of the air of the dental clinic from a University Hospital of the Faculdade de Odontologia da Universidade de São Paulo

Com a finalidade de analisar a microbiota ambiental e verificar se existem diferenças entre as áreas estudadas, procedeu-se, no período de abril a junho de 1986, à análise microbiológica do ar do ambulatório da Faculdade de Odontologia da Universidade de São Paulo. Para tal foram realizadas 10 exposições em cada um dos 10 pontos estratégicos, durante 10 minutos, das placas de Petri contendo ágar-sangue e ágar-Sabouraud. As amostras foram incubadas, e os microrganismos isolados e identificados a nível de gênero (em alguns casos, espécie), segundo a metodologia convencional. Foi feita análise estatística, usando-se o teste Z, onde os resultados obtidos, após incubação, isolamento e identificação, evidenciaram maior incidência de bactérias do que de fungos e maior diversidade de fungos (10 gêneros) do que de bactérias (3 gêneros). Sob o ponto de vista de saúde odontológica, os microrganismos isolados, cosmopolitas do ar, não exibem patogenicidade, sendo, todavia, determinantes das condições de higiene local da Clínica Odontológica da FOUSP

Formaçäo da placa dentária "in vitro" por açúcar mascavo / \"In vitro\" dental plaque formation by unrefined sugar

Com o objetivo de avaliar o papel do açúcar mascavo na formaçäo da placa dental "in vitro" e seu poder acidogênico, foram feitos testes comparativos entre esta substância e açúcar refinado, sacarose (PA), sorbitol (PA) e xilitol (PA). O açúcar mascavo revelou-se um forte indutor de placa dental, como também acidogênico, comparável à sacarose e ao açúcar refinado, após determinaçäo de absorbância, nas lamínulas, e pH nos meios de cultura

Bacteriemias transitórias por microrganismos anaeróbicos pós-remoçäo de fio de sutura / Transitory bacteriemia due to anerobic microbes after sutura remotion

Visou a constataçäo da ocorrência de hemoculturas positivas, pós-remoçäo do fio de sutura, aposto na mucosa gengival depois de exodontia de molar superior, tendo sido feito, previamente, o uso, como colutório, de uma soluçäo aquosa de cloreto de cetilpiridínio 1:4.000 que embebia a regiäo durante um (1) minuto. Foram utilizados seres humanos do sexo masculino, normo-reativos, os quais foram divididos em grupos: A e B. O grupo A visava a detecçäo de possíveis bacteriemias transitórias, pela simples punçäo venosa do antebraço e a permanência do "butterfly" pelo tempo de duraçäo do teste (cinco minutos). O grupo B se contituía de pacientes que foram submetidos à avulsäo de dentes molares superiores nos quais, após oito dias, removia-se o fio de sutura. Do grupo A colhia-se 3 ml de sangue imediatamente à punçäo venosa e também um minuto e cinco minutos após. Do grupo B colhia-se a mesma quantidade de sangue, pré-remoçäo do fio de sutura e também um minuto e cinco minutos após a remoçäo do mesmo. Todas as hemoculturas foram processadas em meio de cultura para anaeróbicos, conforme as normas preconizadas pela Virginia Polytechnic Institute (VPI). Constatou-se que, em todos os casos do grupo A (dez indivíduos), as hemoculturas foram negativas. Nos pacientes do grupo B (dezoito pacientes), todas as hemoculturas feitas pré-remoçäo do fio de sutura foram negativas e nas hemoculturas realizadas a um minuto e a cinco minutos, após a remoçäo do fio, houve positivância em 50 por cento dos casos. As colônias de microrganismos encontradas foram identificadas quanto ao gênero