ABSTRACT
OBJETIVOS: O objetivo deste estudo foi à padronização de uma técnica de coleta e coloração em meio líquido que alie a praticidade e a riqueza citológica, possibilitando uma maior reprodutividade e facilidade microscópica. MÉTODOS: Ratas wistar (n=20) foram submetidas à coleta vaginal diária em salina e o lavado fixado (éter/álcool) e corado em suspensão com solução de azul de Evans 0,025 por cento. A amostra foi concentrada por centrifugação e observado sob objetiva de 40 x. RESULTADOS: Os esfregaços corados permitiram nítida diferenciação das fases do ciclo hormonal (diestro, proestro, estro e metaestro); além da diferenciação dos tipos celulares em relação ao seu grau de maturação tendo como parâmetros o tamanho celular, relação núcleo / citoplasma (RNC) e reação tintorial. O estudo demonstrou a existência de três padrões celulares básicos: células com baixa RNC, acentuada cianofília e pequeno tamanho; células com acréscimo na RNC, perda de cianofilia e maior volume citoplasmático e células queratinizadas anucleadas em aspecto de escama. CONCLUSÃO: A coloração do material permitiu, além da classificação citológica, a possibilidade de quantificação o que resultaria em um acompanhamento mais acurado do ciclo estral.
Subject(s)
Animals , Female , Rats , Estrous Cycle/physiology , Vagina/cytology , Vaginal Smears/methods , Cell Count , Cell Size , Coloring Agents , Cytological Techniques/methods , Cytological Techniques/standards , Evans Blue , Models, Animal , Rats, Wistar , Reproducibility of ResultsABSTRACT
Proteínas fosfatases são moléculas sinalizadoras que agem juntamente com as proteínas quinases para regular uma variedade de processos celulares fundamentais, bem como, crescimento celular, mitogênese, metabolismo, transcrição de gene, ciclo celular e resposta ao estresse e imune. O ácido okadáico é um potente e específico inibidor de proteína serina/treonina fosfatase (PP1 e PP2A). O objetivo deste estudo foi avaliar o efeito citotóxico do ácido okadáico na viabilidade de linfócitos humanos e sua ação mitogênica. Nos estudos de citotoxicidade avaliamos o efeito do ácido okadáico através dos seguintes parâmetros: redução do MTT (integridade mitocondrial), conteúdo total de proteínas (número de células) e atividade fosfatásica (metabolismo celular). O valor para redução do MTT e atividade fosfatase foram: 50nM e 100nM, respectivamente; não foi encontrado valor de IC50 para o conteúdo de proteína. A atividade fosfatásica não foi afetada pelo ácido okadáico (100nM) quando este composto foi adicionado no extrato celular. A proliferação de linfócitos foi estimulada em 25 porcento quando as células foram tratadas com o ácido okadáico durante o plaqueamento e na ausência da fitohemaglutinina (mitogêno). O estímulo máximo foi até 30 minutos. O ácido okadáico não foi citotóxico para os linfócitos. A ação mitogênica deste composto foi confirmada pelo conteúdo de proteína.