Effects of BlueM® against Streptococcus mutans biofilm and its virulence gene expression

Abstract This study evaluated the antimicrobial capacity of BlueM® mouthwash against the bacterium Streptococcus mutans and its influence on gbpA gene expression as well as its cytotoxic effect on fibroblast cells. BlueM® showed antimicrobial activity, with MIC and MBC values of 0.005% and 0.01%, respectively. The MBIC was 6.25% for S. mutans. CFU count and confocal microscopy revealed significant effect of BlueM® on S. mutans biofilm pre-formed on dentin surfaces. Interestingly, the analysis of gbpA gene expression indicated a decrease in gene expression after 15 min of treatment with BlueM® at a concentration of 25%. Moreover, BlueM® exhibited low levels of cytotoxicity. In conclusion, our results showed the antimicrobial effectiveness of BlueM® against S. mutans, its ability to modulate the expression of the gbpA gene and its low cytotoxicity. This study supports the therapeutic potential of BlueM® as an alternative agent for the control of oral biofilm.

Resumo Este estudo avaliou a capacidade antimicrobiana do enxaguatório BlueM® contra a bactéria Streptococcus mutans e sua influência na expressão do gene gbpA, bem como seu efeito citotóxico em células de fibroblastos. BlueM® apresentou atividade antimicrobiana, com valores de CIM e CBM de 0,005% e 0,01%, respectivamente. O MBIC foi de 6,25% para S. mutans. A contagem de UFC e a microscopia confocal revelaram efeito significativo do BlueM® no biofilme de S. mutans pré-formado nas superfícies de dentinas. Curiosamente, a análise da expressão do gene gbpA, indicou uma diminuição na expressão do gene após 15 min de tratamento com BlueM® na concentração de 25%. Além disso, BlueM® exibiu baixos níveis de citotoxicidade. Em conclusão, nossos resultados mostraram a eficácia antimicrobiana do BlueM® contra S. mutans, sua capacidade de modular a expressão do gene gbpA e sua baixa citotoxicidade. Este estudo apoia o potencial terapêutico do BlueM® como agente alternativo para o controle do biofilme oral.

Biofilme dentário / Dental biofilm

O biofilme é uma estrutura complexa que se acumula nos tecidos duros quando em ambiente úmido. Muitas espécies de microrganismos encontram-se presentes no biofilme e seu mecanismo de adesão têm sido amplamente estudado devido ao desenvolvimento de patologias. Desta maneira, realizou-se uma revisão de literatura com o intuito de conceituar o mecanismo de formação do biofilme dentário e seu controle, considerando que estas informações são conceitos atuais e importantes para o cirurgião-dentista no estabelecimento de plano de tratamento adequado. O conhecimento completo sobre a estrutura e composição do biofilme dentário é necessário para total compreensão de doenças como a cárie e a doença periodontal

Presença de Streptococcus mutans e Streptococcus mutans associado a Streptococcus sobrinus em escolares de diferentes classes sócio-econômicas e sua relaçäo com a atividade cariogênica dessas populaçöes / Association between Streptococcus mutans/Streptococcus sobrinus in students of different social levels and their relationship with the cariogenic activity in these populations

As espécies de estreptococos do grupo mutans mais predominantemente isoladas de amostras salivares têm sido S. mutans e S. sobrinus. A detecçäo desses microrganismos em escolares de diferentes classes sócio-econômicas e sua relaçäo com a atividade cariogênica dessas populaçöes foi estudada, em correlaçäo com os parâmetros clínicos CPOD, CPOS, ceo e ceos. Duzentos (200) escolares pertencentes a cinco categorias sócio-econômicas foram separados em subgrupos de acordo com as espécies de microrganismos identificadas em suas amostras salivares. Do total de crianças analisadas, 103 (51,0 por cento) apresentaram apenas S. mutans na saliva, 33 (17,0 por cento) a associaçäo S. mutans/ S. sobrinus, e o restante, 64 (32,0 por cento), outras espécies do grupo mutans (individualmente ou em associaçäo). Nos subgrupos S. mutans e S. mutans/S. sobrinus 79,0 por cento (81) e 76,0 por cento (25), respectivamente, apresentavam cárie dentária, sugerindo um alto índice cariogênico. Para os indivíduos colonizados por S. mutans/S. sobrinus e apenas S. mutans, obtiveram-se valores médios de 9,40 e 6,70, respectivamente, para o índice de ceos, sugerindo que a associaçäo S. mutans/S. sobrinus é potencialmente mais cariogênica que a colonizacäo apenas por S. mutans

A expectativa dos cirurgiöes-dentistas em relaçäo a testes que indicam atividade cariogênica e sua aplicaçäo na clínica como rotina / The expectation of dentist in relation to indicating cariogenic activity tests and their application in daily clinical practice

A aplicaçäo de um questionário aos cirurgiöes-dentistas, objetivando conhecer as expectativas desses profissionais em relaçäo a testes que indicam atividade cariogênica e sua aplicaçäo na clínica como rotina, demonstrou-se, primeiramente, que tais profissionais possuem uma idéia satisfatória sobre o conceito de risco à cárie. Os profissionais mostraram estar cientificamente informados a respeito, revelando um conhecimento suficiente acerca de contagens de S. mutans e Lactobacillus associados a testes bioquímicos de secreçäo salivar e capacidade tampäo como parâmetro de avaliaçäo clínica complementar. Apesar de acreditarem na possibilidade de aplicar tais testes na sua própria clínica, a maioria deles sugere que sejam realizados em local específico, como na universidade ou em laboratório clínico particular. Parte desses profissionais considerou que tais testes näo säo de fácil realizaçäo rotineiramente, necessitando de condiçöes especiais e apropriados para a sua execuçäo. A maioria manifestou-se a favor da adoçäo desses testes como rotina em suas clínicas particulares ou instituiçöes de trabalho, considerando-se muito importantes para a obtençäo de dados preliminares e auxílio ao diagnóstico clínico, principalmente se houver a possibilidade de serem enviadas amostras (saliva) de seus pacientes para análise em local específico. Enfatizam a necessidade de que sejam contornados os problemas característicos de tal atividade, facilitando a sua aplicabilidade

Biotipos de Streptococcus grupo mutans E avaliaçäo de parâmetros clínicos e microbiológicos entre escolares de diferentes classes sócio-econômicas / Streptococcus group mutans biotypes, clinical and microbiological parameters evaluation among scholars of different socioeconomic status

Com o propósito de se analisar bioquimicamente e microbiologicamente a saliva de escolares de diferentes classes sócio-econômicas, com idades de 6 a 8 anos da regiäo de Piacicaba, 200 escolares totalizados pela soma de 40 crianças de 5 classes sócio-econômicas ( A á E), foram analisados procurando-se conhecer primeiramente a prevalência das espécies de Streptococcus grupo mutans e em segundo lugar, avaliar os parâmetros clínicos e microbiológicos, com ênfase em estudos sobre a atividade cariogênica dessas populaçöes. Dados clínicos de cárie (ceos/CPOS) foram obtidos preliminarmente á coleta da saliva. As amostras de saliva obtidas foram diluídas em soluçäo salina, e posteriormente semeadas em meio de cultura SB20. Previamente á diluiçäo, a saliva concentrada foi analisada, medindo-se o fluxo salivar, índice de capacidade tampäo e Ph.

Resolution of whole proteins of some oral Streptococci by polyacrylamide gel electrophoresis on slab and disc

Com o propósito de se aplicar as técnicas de eletroforese em gel de poliacrilamida em placa vertical e disco como uma contribuiçäo aos estudos de identificaçäo e da caracterizaçäo de Streptococcus orais e ainda ressaltar a capacidade de resoluçäo de cada técnica, amostras de culturas do grupo mutans foram analisadas empregando-se três metodologias distintas na obtençäo de proteínas intracelulares. Amostras de microorganismos foram semeadas em tubos contendo meio de cultura TYE. Em seguida, incubados a 37ºC em jarra de anaerobiose durante 48 horas. Após o crescimento bacteriano, as células foram centrifugadas (3000 rpm - 13 minutos) e lavadas duas vezes em soluçäo estéril de NaCl 0,15 M. Aos precipitados resultantes foram aplicadas as seguintes metodologias: Método I - o precipitado final foi ressuspendido em pequeno volume de SDS (solubilizaçäo direta); Método II - ao precipitado resultante, adicionou-se 0,15 grama de pérolas de vidro (74 a 110 µm de diâmetro), o qual foi submetido em seguida à agitaçäo por dois períodos de 3 minutos cada (mod. Phoenix AT 56) - choque mecânico; Método III - o precipitado foi ressuspendido em sacarose 0,5M e EDTA e mantido em banho de gelo por 20 minutos (choque osmótico). As suspensöes finais obtidas foram dissociadas por imersäo em água a 100ºC por 3 minutos. A eletroforese (placa e disco) processou-se em temperatura ambiente a 100 V em corrente constante de 20 mA. De modo geral, os resultados obtidos demonstraram, em primeiro lugar, que as metodologias de solubilizaçäo direta e choque mecânico permitem melhor visualizaçäo e separaçäo das diversas proteínas nos géis. Em segundo, verificou-se que o PAGE em placa permite uma melhor resoluçäo dos perfis protéicos, além de possibilitar que várias amostras possam ser analisadas em um único gel