Indolamina 2, 3-dioxigenase (IDO) em melanoma: regulação frente ao inibidor de BRAF e sua expressão na progressão da doença / Indoleamine 2, 3-dioxygenase (IDO) in melanoma: regulation against BRAF inhibitor and its expression in disease progression

Os inibidores de BRAF (iBRAFs) e de MEK (iMEK), inauguraram uma nova classe de medicamentos, a terapia direcionada, no combate ao melanoma metastático. Entretanto, os pacientes adquirem resistência ao tratamento em poucos meses. Além disso, a imunoterapia vem ganhando espaço no tratamento do câncer, incluindo o melanoma, porém, com alguns aspectos inexplorados. Dentro deste tema, a enzima IDO vem despertando um grande interesse pela participação nos mecanismos de imunotolerância, imunoescape e progressão tumoral. A IDO é responsável pelo consumo e depleção do triptofano, produzindo a quinurenina. Ela está presente em diversos tipos celulares, incluindo células do sistema imune e células tumorais. Este trabalho objetivou avaliar a expressão de IDO durante a progressão da doença - desde do nevo até o melanoma metastático e também avaliar a regulação de IDO induzido por IFN-γ após tratamento com iBRAF em linhagens parentais e resistentes ao iBRAF, buscando-se os mecanismos moleculares. Por fim, objetivou-se entender os efeitos do 1-metil-triptofano (1-MT), um inibidor de IDO, tanto na sua capacidade de inibir a atividade de IDO quanto na sua influência na capacidade clonogênica. O estudo de bioinformática sobre o repositório público GSE12391 mostrou que o nível de expressão gênica de IDO foi superior nos estágios mais avançado da doença. Além disso, todas amostras de melanoma primário de pacientes apresentaram a imunomarcação de IDO, enquanto que nenhuma amostra de nevo apresentou tal marcação. Adicionalmente, a ocorrência de IDO se deu nos infiltrados linfoides, em células mononucleares do sistema imune. Duas análises de bioinformática de expressão gênica demonstraram que a IDO estava expressa positivamente na fase de resistência ao iBRAF. Ademais, os resultados de expressão proteica mostraram que a inibição de via MAPK (tanto por iBRAF quanto por iMEK) conseguiu modular a expressão de IDO, sendo que a maioria das linhagens apresentou uma diminuição de IDO. A atividade de IDO, medida através da produção de quinurenina, por HPLC se mostrou em consonância com os resultados de expressão proteica, exceto pela linhagem WM164 que não apresentou atividade enzimática, embora a proteína estivesse presente. Por fim, o 1-MT conseguiu inibir de maneira eficiente a enzima IDO, bloqueando a produção de quinurenina. Além de que, o 1-MT reduziu a capacidade clonogênica de maneira dose-dependente. Portanto, conclui-se que a expressão de IDO é crescente conforme a progressão do melanoma, que a inibição da via MAPK regulou a expressão de IDO e que o 1-MT reduz a capacidade clonogênica, além da sua função primária de inibir IDO

BRAF and MEK inhibitors (BRAFi and MEKi) has launched a new class of medication, the target therapy, to combat metastatic melanoma. Nevertheless, patients acquired resistance to the treatment in few months. Additionally, immunotherapy has been gaining space in cancer treatment, including melanoma, but some aspects need to be explored. Inside this theme, IDO enzyme has called the attention due to its participation in the mechanisms of immune tolerance, scape and tumor progression. IDO is responsible for tryptophan consume e depletion, producing kynurenine. It is present in different cells, including cells from immune system and tumor cells. This work purposed evaluate IDO expression during disease progression - since nevus until metastatic melanoma and also, evaluate IFN-γ-induced IDO regulation after BRAFi treatment in parental and resistant melanoma cell lines, seeking the molecular mechanisms. Lastly, it was evaluated the effects of 1-methyltryptopahn (1-MT), an IDO inhibitor, by its ability to inhibit IDO and also by its influency on the clonogenic capability. Bioinformatic study performed on GSE12391 showed that gene expression level of IDO was superior in the most advanced stages of the disease. Additionally, all sample of patient's primary melanoma presented IDO immunostaining, whereas, no nevus samples presented such staining. Besides, IDO occurrence was in the lymphoid infiltrates, in mononuclear cells from immune system. Two bioinformatic analysis of gene expression demonstrated that IDO was differentially overexpressed during BRAFi resistance stage. Moreover, protein expression results presented that MAPK pathway inhibition (both by BRAFi and by MEKy) was able to modulate IDO expression, and most of the cell lines presented an IDO downregulation. IDO activity, measured through kynurenine production, by HPLC was consonant with protein expression results, except by WM164 cell line, which did not present enzymatic activity, albeit the protein was present. By the end, 1-MT could inhibit efficiently IDO enzyme, blocking kynurenine production. Furthermore, 1-MT reduced clonogenic capability in a dosedependent manner. Therefore, it was concluded that IDO expression increases along with melanoma progression, MAPK pathway inhibition regulated IDO expression and 1-MT reduced clonogenic capability, besides its primary function of IDO inhibitor

Efeitos do Tenoxicam sobre a cicatrização da parede abdominal: estudo experimental em ratos / Effects of Tenoxicam on the abdominal wall healing: experimental study in rats

OBJETIVO: Analisar os efeitos do tenoxicam, um antiinflamatório não hormonal, na cicatrização da parede abdominal de ratos. MÉTODOS: Foram utilizados 40 ratos adultos, submetidos à laparotomia mediana e distribuídos, aleatoriamente, em um grupo controle (C), constituído de 20 animais que receberam solução de NaCl a 0,9 por cento; e um grupo tratado (T), constituído de 20 animais que receberam o tenoxicam. Os animais de cada grupo foram divididos, conforme a data de sacrifício, em subgrupos de 10 animais, denominados C7, C14, T7 e T14. As inscrições 7 e 14 determinaram o sacrifício dos animais no sétimo e décimo quarto dia pós-operatório, respectivamente. As soluções de tenoxicam (1mg/ml) e de NaCl a 0,9 por cento foram administradas no pós-operatório imediato e nos quatro dias seguintes, por via intramuscular, na dose volume de 0,6 ml/kg/dia. No dia do sacrifício, realizou-se a ressecção de dois fragmentos da parede abdominal (1cm x 3cm), que foram utilizados para determinação da concentração de hidroxiprolina e avaliação da força de ruptura. RESULTADOS: Não foram observadas complicações da ferida operatória, incluindo infecção ou deiscência, nos quatro subgrupos de animais. Na análise comparativa dos quatro subgrupos de animais, não foi evidenciada diferença estatisticamente significante no estudo da força de ruptura (p=0,262) e na concentração de hidroxiprolina (p=0,392). CONCLUSÃO: A administração de tenoxicam, por via intramuscular, não interfere na cicatrização da parede abdominal de ratos.

Síndrome de conn causada por adenoma de adrenal-tratamento por videolaparoscopia / Conn's syndrome caused by an adrenal adenoma- videolaparoscopic treatment

The authors present a case-report a 43 years old, female patient presenting with an eight-year history of hypertension caused by an adrenal adenoma. Hypokalemia and supressed plasma renina confirmed the diagnosis of primary hyperaldosteronism. An abdominal computed tomography revealed a right adrenal mass. The patient was successfully treated laparoscopically. The histopathological diagnosis was adenoma. The patient had normal blood pressure within three months.

Mudanças na vascularização arterial da curvatura menor do estômago após gastrectomia segmentar associada à vagotomia gástrica proximal em cães / The arterial vascularization changes of the lesser curvature of the stomach after segmental gastrectomy and proximal gastric vagotomy in dogs

Para avaliar os efeitos da gastrectomia segmentar do corpo associada à vagotomia gástrica proximal (GS + VGP), sobre a vascularização arterial da curvatura menor do estômago, foram utilizados 24 cães distribuídos em dois grupos de 12 animais, com as seguintes denominações: Grupo I, animais submetidos à laparotomia e manipulação gástrica; Grupo II, animais submetidos à GS + VGP. Em cada grupo, metade dos animais foi sacrificada no terceiro, metade no oitavo dia pós-operatório. No dia do sacrifício, procedeu-se à injeção de mistura de bário-gelatina, na vascularização arterial do estômago. A seguir, o estômago foi removido do animal, fixado em solução de formol, aberto pela curvatura maior e radiografado com técnica padronizada. A intensidade da vascularização da curvatura menor do estômago foi determinada por microdensitometria e morfometria. Pela microdensitometria, foram determinados os valores de densidade óptica, convertidos em equivalentes de milímetros de alumínio, da imagem radiográfica da curvatura menor do estômago. Com base nesses resultados, verificou-se que os valores médios de densidade óptica do grupo II foram significativamente maiores do que o grupo I (p<0,001). Pelo estudo morfométrico de fragmento histológico da curvatura menor, observou-se que os valores médios de volume relativo das arteríolas, em relação ao volume total da camada submucosa, foram significativamente maiores no grupo II em comparação ao grupo I (p<0,001). Os valores médios dos diâmetros das arteríolas da camada submucosa foram significativamente mais elevados no grupo II que no grupo I (p<0,001). O número de arteríolas por mm² da camada submucosa não diferiu significativamente entre os dois grupos (p>0,05). Embora a execução da GS + VGP implique desvascularização da curvatura menor do estômago, observou-se aumento da intensidade da vascularização arterial desta curvatura nos animais do grupo II, consequente à dilatação das arteríolas da camada submucosa

Sensibilidade aos efeitos genotóxicos da bleomicina: colite ulcerativa versus câncer colorretal / Sensibility genotoxic effects of bleomycin: ulcerative colitis versus colorectal cancer

Neste estudo foram selecionados 35 pacientes, sendo 13 sadios (grupo I); 10 pacientes com colite ulcerativa (grupo II); e 12 pacientes com câncer colorretal (grupo III). Para determinar a resposta aos efeitos mutagênicos da bleomicina em cultura de linfócitos de sangue periférico, foram realizados dois tipos de cultura para cada paciente: a primeira, sem tratamento com bleomicina (cultura espontânea) e, a segunda, tratada com bleomicina (cultura induzida). Na avaliaçäo microscópica dos linfócitos em metástase, foram determinados o índice mitótico e as alteraçöes cromossômicas estruturais. Os três grupos de pacientes diferiram entre si quanto às determinaçöes do índice mitótico nas culturas espontâneas (p < 0,01) e significativamente maiores que os dos grupos I e III. Quanto à freqüência de quebras cromatídicas espontâneas por célula, näo houve diferença significativa entre os três grupos de pacientes (p = 0,39). Quanto à freqüência de quebras cromatídicas induzidas por célula, observou-se que havia diferença significativa entre os três grupos de pacientes (p < 0,001). O grupo III apresentou valores significativamente superiores aos verificados no grupo II, e este significativamente maiores que os do grupo I. Com base nos resultados, observou-se que a bleomicina induziu ao aumento significativo de aberraçöes cromossômicas nos linfócitos dos grupos de pacientes com colite ulcerativa e com câncer colorretal. A sensibilidade aos efeitos genotóxicos da bleomicina em pacientes com colite ulcerativa pode expressar maior predisposiçäo ao câncer colorretal

Hipertensão arterial sistêmica e hipopotassemia: hiperaldosteronismo primário (relato de um caso) / Arterial hypertension and hypokalemia: primary hyperaldosteronism

Introdução: O excesso de mineralcorticóides, mais frequentemtne da aldosterona, deve ser pesquisado quando ocorrer a concomitância de hipertensão arterial sistêmica, hipopotassemia e alcalose metabólica. Hiperaldosteronismo primário é um grupo de desordens onde há o aumento, não suprimível, da secreção de aldosterona, resultando em causa incomum de hipertensão arterial associada a hipopotassemia e supressão da atividade plasmática de renina. A incidência estimada de aldosteronismo primário, na população de hipertensos, é de 0,5 a 2 por cento, sendo que 70 por cento destes são portadores de adenoma unilateral de supra-renal. O diagnóstico deve ser confirmado mediante a utilização de testes hormonais apropriados. Exames de imagem são úteis, para a identificação de possíveis tumores de adrenal produtores de aldosterona. Objetivo: Apresentação de um caso de hiperaldosteronismo primário por macroadenoma de supra-renal, discutindo-se os principais aspectos do diagnóstico, da fisiopatologia e do tratamento dessa condição, relativamente rara, de hipertensão arterial. Material e métodos: Descrição de caso clínico e revisão de literatura. Resultados: Relato de caso clínico de uma paciente de 33 anos de idade, que apresentava hipertensão arterial diagnosticada há 8 anos, refratária ao uso de várias medicações anti-hipertensivas, associada a episódios intermitentes de parestesia de extremidades, cãibras e astenia. As várias dosagens de potássio sérico que realizou, durante o período, mostraram valores abaixo do normal (potássio sérico variando de 2,5 a 3,0 mEq/I). Os níveis da pressão arterial sistólica situavam-se entre 180 a 200 mm Hg e os da diastólica, entre 120 a 130 mm Hg, apesar do uso de medicamentos anti-hipertensivos. O teor da aldosterona sérica foi de 103,4 ng/dl (vlaores normais=3 a 10 ng/dl) e a atividade de renina, no sangue periférico, de 1,7 ng/dl (valores normais=0,3 a 1,6 ng/dl). A ecografia renal e a tomografia computadorizada de abdome mostraram massa sólida em topografia de glândula adrenal direita. A paciente foi submetida a adrenalectomia direita. O potássio sérico normalizou-se na primeira semana pós-operatória. A pressão arterial permaneceu elevada, porém em níveis mais baixos, necessitando de medicação anti-hipertensiva (130 x 90 mm Hg). Conclusão: A hipertensão arterial sistêmica, associada a anormalidades metabólicas, como a hipopotassemia, é sugestiva do diagnóstico de hiperaldosteronismo primário, que deve ser confirmado...

Apendicite aguda: 20 anos depois / Acute appendicitis: 20 years later

Os AA. analisam sua experiencia com 131 pacientes operados de apendicite aguda no Serviço de Cirurgia do Hospital Universitario de Brasilia, no periodo de janeiro de 1987 a abril de 1991. Comparam esta experiencia com aquela relatada por Barbosa e cols., ha aproximadamente 20 anos atras, na Universidade Integrada de Saude de Sobradinho, ressaltando os aspectos clinicos e cirurgicos considerados relevantes naquela epoca e os verificados atualmente. Destacam-se algumas coincidencias de resultados entre os dois estudos, como a faixaetaria mais acometida, queixa principal apresentada pelo paciente e incisao praticada pelos cirurgioes. Inumeras discordancias sao referidas, com relaçao ao sexo, sazonalidade, tipo e localizaçao inicial da dor abdominal, importancia do toque retal, do leucograma e da exploraçao radiologica no diagnostico da doença. A despeito da reduçao nos indices de infecçao de ferida operatoria e de mortalidade na experiencia atual, ocasionada possivelmente por atendimento medico mais precose e menos incidencia de peritonite generalizada, ambos os estudos apresentam a mensma ocorrencia de abscesso residual, a principal indicaçao para as reoperaçoes e responsavel por elevadas taxas de ocupaçao hospitalar.

Tratamento cirúrgico do megaesôfago chagásico: duas décadas de experiência numa regiäo endêmica / Surgical treatment of chagasic megaesophagus: two decades of experience in endemic region

Os autores relatam a experiência de 20 anos no tratamento do megaesôfago chagásico, período em que foram realizados 466 procedimentos cirúrgicos em 457 pacientes. Chamam a atençäo para o caráter endêmico do megaesôfago no Brasil Central, para a sua elevada incidência nos Estados que circundam o Distrito Federal, pelo acometimento de adultos jovens em plena fase produtiva, para a maior incidência no sexo masculino e a predominância dos megas avançados. A maioria dos pacientes foi submetida à cardioplastia à Thal, vindo a seguir a operaçäo de Heller e um grupo menor a cardiectomia com interposiçäo jejunal ou ileocecal. A indicaçäo da operaçäo de Serra-Dória e da esofagectomia subtotal sem toracotomia seguida de esofagogastroplastia foi feita em caráter excepcional. Analisam a importância das intercorrências clínicas relacionadas principalmente ao mau estado nutricional e à pneumopatia por aspiraçäo, preferência pela via de acesso abdominal por sua simplicidade e por possibilitar o tratamento no mesmo ato cirúrgico de outras afecçöes abdominais associadas. Discutem as complicaçöes precoces, dentre as quais sobressai a fístula como a principal responsável pela mortalidade pós-operatória, e as complicaçöes tardias, em que a esofagite de refluxo após interposiçäo jejunal e a estenose em todos os outros tipos de cirurgia, foram os principais responsáveis pelos maus resultados tardios. Consideram que a operaçäo de Heller, por ser praticamente isenta de complciaçöes, e por proporcionar bons resultados tardios quando bem indicada e corretamente realizada, é a operaaçäo mais adequada para o tratamento do megoesôfago näo avançado (grupos I e II). A cardioplastia à Thal, por ser um procedimento fácil de ser realizado, apresentar baixo índice de complicaçöes e de mortalidade e proporcionar bons resultados tardios, é a operaçäo mais adequada para o tratamento do megaesôfago (grupos III e IV) e do megaesôfago recidivado