Morphophysiological changes of Acca sellowiana (Myrtaceae: Myrtoideae) saplings under shade gradient

Abstract Understanding morphological and physiological changes under different light conditions in native fruit species in juveniles stage is important, as it indicate the appropriate environment to achieve vigorous saplings. We aimed to verify growth and morphophysiological changes under shade gradient in feijoa (Acca sellowiana (O. Berg) Burret) to achieve good quality saplings adequate to improve cultivation in orchards. The saplings were grown for twenty-one-month under four shading treatments (0%, 30%, 50%, and 80%). Growth, photosynthetic pigments, gas exchanges, chlorophyll fluorescence, and leaf anatomy parameters were evaluated. Saplings under full sun and 30% shade had higher height and diameter growth and dry mass accumulation due to higher photosynthesis rate. As main acclimatization mechanisms in feijoa saplings under 80% shade were developed larger leaf area, reduced leaf blade thickness, and enhanced quantum yield of photosystem II. Even so, the net CO2 assimilation and the electron transport rate was lower and, consequently, there was a restriction on the growth and dry mass in saplings under deep shade. Therefore, to obtain higher quality feijoa saplings, we recommend that it be carried out in full sun or up to 30% shade, to maximize the sapling vigor in nurseries and, later, this light environment can also be used in orchards for favor growth and fruit production.

Resumo A verificação de mudanças morfológicas e fisiológicas sob diferentes condições luminosas em espécies frutíferas nativas em estágio juvenil é importante, uma vez que indicam o ambiente adequado para a formação de mudas com alto vigor. Objetivou-se verificar o crescimento e as alterações morfofisiológicas sob gradiente de sombreamento em mudas de feijoa (Acca sellowiana (O. Berg) Burret) para obter mudas de boa qualidade, adequadas para fomentar os plantios da espécie em pomares. As mudas foram cultivadas por vinte e um meses sob quatro tratamentos de sombreamento (0%, 30%, 50% e 80%). Foram avaliados parâmetros de crescimento, pigmentos fotossintéticos, trocas gasosas, fluorescência da clorofila e anatomia foliar. Mudas a pleno sol e 30% de sombra apresentaram maior crescimento em altura, diâmetro e acúmulo de massa seca, devido à maior taxa de fotossíntese. Como principais mecanismos de aclimatação sob 80% de sombra, as mudas desenvolveram maior área foliar, redução da espessura do limbo foliar e aumento do rendimento quântico do fotossistema II. Mesmo assim, a assimilação líquida de CO2 e a taxa de transporte de elétrons foram menores e, consequentemente, houve restrição ao crescimento e acúmulo de massa seca das mudas no maior nível de sombreamento. Portanto, para a obtenção de mudas de feijoa de maior qualidade, recomendamos que seja realizada a pleno sol ou até 30% de sombra, para maximizar o vigor das mudas em viveiros e, posteriormente, este ambiente de luz também pode ser utilizado em pomares para favorecer o crescimento e a produção de frutos.

Morphophysiological changes of Acca sellowiana (Myrtaceae: Myrtoideae) saplings under shade gradient / Alterações morfofisiológicas em mudas de Acca sellowiana (Myrtaceae: Myrtoideae) sob gradiente de sombreamento

Abstract Understanding morphological and physiological changes under different light conditions in native fruit species in juveniles' stage is important, as it indicate the appropriate environment to achieve vigorous saplings. We aimed to verify growth and morphophysiological changes under shade gradient in feijoa (Acca sellowiana (O. Berg) Burret) to achieve good quality saplings adequate to improve cultivation in orchards. The saplings were grown for twenty-one-month under four shading treatments (0%, 30%, 50%, and 80%). Growth, photosynthetic pigments, gas exchanges, chlorophyll fluorescence, and leaf anatomy parameters were evaluated. Saplings under full sun and 30% shade had higher height and diameter growth and dry mass accumulation due to higher photosynthesis rate. As main acclimatization mechanisms in feijoa saplings under 80% shade were developed larger leaf area, reduced leaf blade thickness, and enhanced quantum yield of photosystem II. Even so, the net CO2 assimilation and the electron transport rate was lower and, consequently, there was a restriction on the growth and dry mass in saplings under deep shade. Therefore, to obtain higher quality feijoa saplings, we recommend that it be carried out in full sun or up to 30% shade, to maximize the sapling vigor in nurseries and, later, this light environment can also be used in orchards for favor growth and fruit production.

Resumo A verificação de mudanças morfológicas e fisiológicas sob diferentes condições luminosas em espécies frutíferas nativas em estágio juvenil é importante, uma vez que indicam o ambiente adequado para a formação de mudas com alto vigor. Objetivou-se verificar o crescimento e as alterações morfofisiológicas sob gradiente de sombreamento em mudas de feijoa (Acca sellowiana (O. Berg) Burret) para obter mudas de boa qualidade, adequadas para fomentar os plantios da espécie em pomares. As mudas foram cultivadas por vinte e um meses sob quatro tratamentos de sombreamento (0%, 30%, 50% e 80%). Foram avaliados parâmetros de crescimento, pigmentos fotossintéticos, trocas gasosas, fluorescência da clorofila e anatomia foliar. Mudas a pleno sol e 30% de sombra apresentaram maior crescimento em altura, diâmetro e acúmulo de massa seca, devido à maior taxa de fotossíntese. Como principais mecanismos de aclimatação sob 80% de sombra, as mudas desenvolveram maior área foliar, redução da espessura do limbo foliar e aumento do rendimento quântico do fotossistema II. Mesmo assim, a assimilação líquida de CO2 e a taxa de transporte de elétrons foram menores e, consequentemente, houve restrição ao crescimento e acúmulo de massa seca das mudas no maior nível de sombreamento. Portanto, para a obtenção de mudas de feijoa de maior qualidade, recomendamos que seja realizada a pleno sol ou até 30% de sombra, para maximizar o vigor das mudas em viveiros e, posteriormente, este ambiente de luz também pode ser utilizado em pomares para favorecer o crescimento e a produção de frutos.

Workers' exposure to occupational heat during manual coffee harvesting / Exposição de trabalhadores ao calor ocupacional durante a colheita manual do cafeeiro

ABSTRACT: This study evaluated the occupational exposure of workers to heat during manual harvesting of coffee. The case study was conducted between May to August. Occupational heat in coffee plantations was evaluated using the Wet Bulb Globe Temperature (WBGT) method and the metabolic rate. The WBGT was obtained using the TGD 400 thermal stress meter. The determined WBGT values ​​were compared to two standards: the Occupational Hygiene Standard (NHO) 06 and Regulatory Norm (NR) 09. For acclimatized workers, the exposure limit was not exceeded at any time during the evaluated period. Fornon-acclimatized workers, the exposure limit was not exceeded only in July.

RESUMO: O presente trabalhado teve como objetivo avaliar a exposição ocupacional de trabalhadores ao calor durante a colheita manual do cafeeiro. O estudo de caso foi desenvolvido entre os meses de maio a agosto. Avaliou-se o calor ocupacional em lavoura cafeeira através do método do Índice Bulbo Úmido Termômetro de Globo (IBUTG) e taxa metabólica. O IBUTG foi obtido utilizando o medidor de estresse térmico TGD 400. Os valores do IBUTG determinados foram comparados com duas normativas: Norma de Higiene Ocupacional (NHO) 06 e Norma Regulamentadora (NR) 09. Para trabalhadores aclimatizados o limite de exposição não foi superado em nenhum momento do período avaliado. Em relação aos trabalhadores não aclimatizados o limite de exposição não foi superado apenas em julho.

Exposure of workers to occupational heat during the application of phytosanitary products in coffee crop / Exposição de trabalhadores ao calor ocupacional durante a aplicação de produtos fitossanitários na cultura do cafeeiro

During the application of phytosanitary products in coffee trees, workers may be exposed to temperatures that could compromise their health. Exposure to occupational heat can lead to progressive dehydration, cramps, exhaustion and the possibility of thermal shock. Thus, knowing the levels of occupational heat that workers are exposed becomes important. This study aimed to evaluate workers' occupational exposure to heat during the application of phytosanitary products with manual costal pump in the coffee crops. The case study was developed at the IFSULDEMINAS school farm - Campus Inconfidentes in the months of September and October 2017. The occupational heat in the coffee crop was evaluated using the WBGTAVERAGE method, using TGD 400 thermal stress meter. The WBGT values found were compared to the exposure limits of NR 15 for the purposes of insalubrity classification and with NHO 06 for acclimatized and non-acclimatized workers. The results showed that the WBGT found is below the tolerance limit of NR 15, for the month of September. In October, the tolerance limit was exceeded in the period from 11:00 a.m. to 2:59 p.m., considering a continuous heavy activity and rest in the workplace, and the activity considered unhealthy. Considering the criteria of the NHO 06 it was observed that the limits of occupational exposure were exceeded in the month of October, for acclimatized and non-acclimatized workers. In September the occupational exposure limit of NHO 06 was exceeded only for non-acclimated workers. Therefore, the workers should be submitted to acclimatization during the phytosanitary application activity in the month of October.

Durante a aplicação de produtos fitossanitários no cafeeiro os trabalhadores podem estar expostos a temperaturas capazes de comprometer sua saúde. Exposição ao calor ocupacional pode levar a desidratação progressiva, câimbras, exaustão e possibilidade de choque térmico. Desta forma, conhecer os níveis de calor ocupacional que os trabalhadores estão expostos torna-se importante. O presente estudo teve como objetivo avaliar a exposição ocupacional ao calor de trabalhadores durante a aplicação de produtos fitossanitários com bomba costal manual na cultura do cafeeiro. O estudo de caso foi desenvolvido na fazenda-escola do IFSULDEMINAS ­ Campus Inconfidentes nos meses de setembro e outubro de 2017. Avaliou-se o calor ocupacional em lavoura cafeeira através do método do IBUTGMÉDIO, utilizando medidor de estresse térmico TGD 400. Os valores do IBUTG encontrados foram comparados aos limites de exposição da NR 15 para fins de classificação de insalubridade e com a NHO 06 para trabalhadores aclimatizados e não aclimatizados. Os resultados demostraram que o IBUTG encontrado está abaixo do limite de tolerância da NR15, para o mês de setembro. No mês de outubro o limite de tolerância foi ultrapassado no período das 11:00 às 14:59h, considerando uma atividade pesada contínua e descanso no próprio local de trabalho, sendo a atividade considerada insalubre. Ao considerarmos os critérios da NHO 06 observou-se que os limites de exposição ocupacional foram ultrapassados no mês de outubro, para trabalhadores aclimatizados e não aclimatizados. Em setembro o limite de exposição ocupacional da NHO 06 foi superado somente para trabalhadores não aclimatizados. Portanto os trabalhadores devem ser submetidos à aclimatização durante a atividade de aplicação de fitossanitários no mês de outubro.

Micropropagation of Chapada Diamantina ornamental bromeliad / Micropropagação de bromélia ornamental da Chapada Diamantina

ABSTRACT: Sincoraea mucugensis (Wand. & A.A. Conc.) LOUZADA & WAND, an endangered bromeliad, is confined to the central region of the Chapada Diamantina, in the municipality of Mucugê, Brazil. From various researches, it is evident that for the propagation of this species, the in vitro technique is a feasible option. However, due to the low multiplication rates reported in various papers, this study aimed to establish a micropropagation protocol of direct organogenesis for S. mucugensis. First, the inoculation of the stem explants was done in MS ½ culture medium which contained different levels of BAP (0.00; 6.66; 8.88; 11.10; 13.20 µM) and NAA (0.00; 2.60; 5.20 µM). These shoots were then subjected to a couple of distinct rooting periods (of 30- and 60-day duration) using activated charcoal; finally, these microplants were transferred to a greenhouse for acclimatization, and covered with transparent plastic cups, as a water loss prevention test method. All the data were submitted to the analysis of variance (ANOVA), and the means were subjected to regression analysis or compared using the Tukey test. The findings revealed that the S. mucugensis stem explants raised in the NAA-rich medium (6.42 to 7.43 shoots/explants) showed high multiplication rates; the shoot rooting was done for 30 days using activated charcoal with the medium. Acclimatization, which was performed by directly exposing the microplants to the ex vitro environment, showed 95% survival rate.

RESUMO: Sincoraea mucugensis (Wand. & A.A. Conc.) LOUZADA & WAND é uma bromélia vulnerável de ocorrência restrita ao município de Mucugê, Chapada Diamantina. Estudos indicam que a cultura de tecidos é uma alternativa viável para a propagação in vitro desta espécie. Contudo, em função das baixas taxas de multiplicação obtidas em estudos anteriores, objetivou-se estabelecer um protocolo de micropropagação via organogênese direta para S. mucugensis. Explantes caulinares foram inoculados em meio de cultura MS ½ contendo diferentes concentrações de BAP (0,00; 6,66; 8,88; 11,10; 13,20 µM) e ANA (0,00; 2,60; 5,20 µM). Os brotos obtidos foram submetidos a diferentes períodos de enraizamento (30 e 60 dias) com carvão ativado; posteriormente as microplantas foram aclimatizadas em casa de vegetação, testando-se o efeito da cobertura com copos plásticos transparentes como estratégias contra perda de água. Os dados foram submetidos à análise de variância (ANOVA) e as médias analisadas por regressão ou comparadas pelo Teste de Tukey. Os resultados demonstram que altas taxas de multiplicação de S. mucugensis são geradas a partir de explantes caulinares cultivados em meio contendo ANA (6,42 a 7,43 brotos/explantes); o enraizamento dos brotos é realizado por 30 dias em meio com carvão ativado e a aclimatização é feita com exposição direta das microplantas ao ambiente ex vitro com 95% de sobrevivência.

Carbohydrates on the growth of Cattleya schilleriana Reichb.f. seedlings (Orchidaceae) / Carboidratos no crescimento de plântulas de Cattleya schilleriana Reichb.f. (Orchidaceae)

ABSTRACT: The aim of the present study was to evaluate the effects of carbohydrate supplementation on the propagation of the orchid Cattleya schilleriana. The 120-d-old seedlings were subcultured in fructose-, glucose-, or sucrose-supplemented (0, 15, 30, and 45g L-1) ½ MS culture medium (half-strength macronutrient concentrations), using a completely random design with four repetitions per treatment. After 120d of treatment, root number and length, leaf number and length, and fresh weight were evaluated, and seedling survival was evaluated after 75d of acclimatization in a greenhouse. The in vitro growth data were submitted to regression analysis, whereas the percentage survival data were analyzed using ANOVA and Tukey's test. Both in vitro growth and ex vitro survival were lowest when the plantlets were grown in the absence of a carbohydrate source and highest (>90% survival) when supplemented with glucose. According to our findings, the addition of either glucose (30g L-1) or sucrose (30g L-1) is recommended for mass propagation of C. schilleriana.

RESUMO: O objetivo deste estudo foi avaliar a adição de doses de carboidratos em meio de cultura ½ MS para a propagação da orquídea Cattleya schilleriana. Plântulas com 120 dias após semeadura foram recultivadas em 12 tratamentos, onde foram investigadas a adição de diferentes doses de frutose, glicose e sacarose (0, 15, 30 e 45g L-1). O delineamento utilizado foi inteiramente casualizado com quatro repetições por tratamento. Após 120 dias nos tratamentos, foram mensurados o número de raízes, comprimento da maior raiz, número de folhas, comprimento da maior folha e massa fresca total. Depois as plântulas foram aclimatizadas em casa de vegetação e avaliada a taxa de sobrevivência após 75 dias. Os dados obtidos foram submetidos ao teste de Tukey a 5% de probabilidade e ajustadas curvas de regressão. A ausência de carboidrato reduziu o crescimento das plântulas entre todas as características avaliadas in vitro e ex vitro. As doses de glicose promoveram maior eficiência para o crescimento in vitro e sobrevivência acima de 90% após a aclimatização. Assim, a adição de glicose (30g L-1) ou sacarose (30g L-1) são recomendadas para a propagação massal de C. schilleriana.

Desenvolvimento e multiplicação in vitro de embriões obtidos por embriogênese somática direta de Coffea arabica L. CV. Acaiá Cerrado / Development and multiplication in vitro of embryo obtained by direct somatic embryogenesis of Coffea arabica L. CV. Acaiá Cerrado

Um importante método de multiplicação in vitro de plantas de Coffea é a embriogênese somática, que consiste no desenvolvimento de embrióides a partir de células haplóides ou somáticas possibilitando a micropropagação acelerada de clones superiores e a manutenção de híbridos interespecíficos. Entretanto, há poucos relatos da obtenção de embriogênese direta na espécie Coffea arabica. Objetivou-se com este trabalho estabelecer protocolo para desenvolvimento in vitro de embriões somáticos e produção de mudas de C. arabica cultivar Acaiá Cerrado. Avaliaram-se a influência de sacarose (0; 30; 60; 90 e 120 g L-1) x BAP (0; 2; 4 e 8 mg L-1) em embriões somáticos. No desenvolvimento das plântulas, testaram-se ANA (0; 0,25; 0,5 e 1mg L-1) x GA3 (0; 2,5; 5,0; 10 e 20 mg L-1) em brotações, com tamanho médio de 1 a 1,5 cm, oriundas de embriões somáticos in vitro. Durante a etapa de indução de embriões, o experimento foi conduzido em sala de crescimento em condições de escuro e, na etapa de desenvolvimento dos embriões e plântulas, os explantes foram submetidos à irradiância em torno de 32 µM m-2 s-1 e fotoperíodo de 16 horas, à temperatura de 25 ± 1 ºC. Na aclimatização, avaliou-se o efeito da presença e ausência de raízes em plântulas de cafeeiro oriundas de embriogênese somática direta. A adição de 90 g L-1 de sacarose e 2 mg L-1 de BAP ao meio de cultura proporciona melhor crescimento in vitro de embriões de cafeeiro. Utilizando-se 0,5 mg L-1 de ANA e 14,2 mg L-1 de GA3 obtém-se maior comprimento da parte aérea de brotações de C. arabica L. cv. Acaiá Cerrado. Conclui-se que é possível a obtenção de plântulas micropropagadas de C. arabica L. cultivar Acaiá Cerrado pela embriogênese somática direta. O enraizamento de brotações de cafeeiro cultivar Acaiá Cerrado ocorre simultaneamente ao processo de aclimatização.

An important method of in vitro plant's multiplication of Coffea is somatic embryogenesis, which consists in developing embryoid from haploid or diploid somatic cells, without the fusion of gametes allowing the accelerated micropropagation and maintenance of superior clones interspecific hybrids. However there are few reports of direct embryogenesis in Coffea arabica. The objective of this work to establish protocol for in vitro development of somatic embryos and seedlings of C. arabica Acaiá Cerrado. The influence of sucrose (0, 30, 60, 90 and 120 g L-1) x BAP (0, 2, 4 and 8 mg L-1) on somatic embryos from embryogenic were evaluated. In seedling development, NAA (0, 0.25, 0.5 and 1 mg L-1) x GA3 (0, 2.5, 5.0, 10 and 20 mg L-1) in shoots were tested, with average size of 1 to 1.5 cm, derived from somatic embryos in vitro. During the development stage of embryos and embryonic seedling induction, the experiment was conducted in a growth chamber under conditions of darkness and the stage of development of embryos and seedlings, the explants were subjected to irradiation around 32 mM m- 2 s-1 and a photoperiod of 16 hours at a temperature of 25 ± 1 º C. In acclimatization, the effect of the presence and absence of roots in coffee seedlings originating from direct somatic embryogenesis were evaluated. The addition of 90 g L-1 sucrose and 2 mg L-1 BAP to the culture medium provides a better in vitro growth of embryos from coffee. Using 0.5 mg L-1 NAA and 14.2 mg L-1 GA3 obtains greater shoot length of shoots of C. arabica L. cv. Acaiá Cerrado. It was concluded that it is possible to obtain plantlets C. arabica L. Acaiá Cerrado by direct somatic embryogenesis. The rooting of shoots of coffee Acaiá Cerrado occurs simultaneously with the process of acclimatization.

Influência de diferentes concentrações dos fitorreguladores ácido 6-benzilaminopurina e ácido naftalenoacético na propagação vegetativa de Malva sylvestris L / Effect of different BAP and NAA concentration on microprapagation of Malva (Malva sylvestris L. )

Malva sylvestris L. (família Malvaceae), conhecida como malva, é uma espécie medicinal nativa da Europa, cultivada no sul do Brasil. A espécie tem propriedade adstringente, suaviza a irritação dos tecidos e reduz inflamações, entre outras características e atributos medicinais. O estudo teve como objetivo verificar a eficiência dos hormônios ANA (ácido naftalenoacético) e BAP (ácido 6-Benzilaminopurina) na propagação vegetativa a partir do estabelecimento in vitro de segmentos nodais. Segmentos nodais obtidos de plantas matrizes mantidas em casa de vegetação foram submetidos à desinfestação e inoculados em meio MS (Murashige e Skoog) com diferentes concentrações e combinações de ANA (ácido naftalenoacético) e BAP (ácido 6-Benzilaminopurina) totalizando oito tratamentos com 60 repetições cada. Os explantes foram mantidos em sala de crescimento e, ao completar sete dias, as plântulas obtidas foram retiradas e avaliadas quanto ao número de folhas, altura total (cm) e massa fresca (g). As plântulas foram fixadas em substrato "Big bio" e transferidas para casa de vegetação com nebulização. Os dados obtidos foram submetidos à Análise de Variância, seguido pelo Teste de Tukey. As plântulas obtidas em meio MS acrescido de 2,0 mg/Lˉ¹ de BAP e de 0,5 mg/Lˉ¹ de ANA foram as que apresentaram maior média nas três variáveis avaliadas, sendo então o mais indicado para a produção de mudas. Em 10 dias foi observado o enraizamento de todas as plântulas transferidas para casa de vegetação. A aclimatização e o enraizamento ex vitro ocorrem em uma única etapa sem a necessidade da utilização de enraizadores. A técnica desenvolvida demonstra a possibilidade de produção de mudas com custos reduzidos, em larga escala, e com a garantia de fornecer mudas aptas para o cultivo em apenas 17 dias

Effect of different BAP and NAA concentrations on malva (Malva sylvestris L.) micropropagation. Malva sylvestris L. (Malvaceae family), known as mallow, is a medicinal species native toEurope, and it is grown in southern Brazil. It has astringent properties and can sooth tissue irritation and reduce inflammations among other medicinal characteristics. The study aimed to verify the efficiency of the hormones NAA (naphthalene acetic acid) and BAP (6-Benzilaminopurine acid) in propagating the species from establishing in vitro nodal segments. Nodal segments obtained from mother plants kept in greenhouses were disinfected and inoculated in MS medium with different concentrations and combinations of BAP and NAA, amounting to 8 processes with 60 repetitions each. The explants were kept in growth rooms, and after seven days the resulting seedling were removed and assessed regarding the number of leaves, total height (cm) and fresh mass (g). Subsequently, the seedling were fixed on the substrate "Big bio" and transferred to greenhouses with nebulization. The data obtained was subjected toVariance Analysis, followed by the Tukey's test. In 10 days,rooting could be observed in all the plantules transferred to the greenhouse. The plantules obtained in MS medium thatreceived 2.0mg/L-1 BAP and 0.5 mg/L-1 NAA were the ones that presented the highest average in the three variables assessed, therefore the most recommended to producing seedlings of this species. The ex vitro acclimatization and rooting occur in a single phase without the need of root promoters. The technique developed shows that it is possible to produce seedlings of this species at reduced costs, in large scale and with the guarantee to supply seedlings that can be planted in only 17 days.

In vitro behaviour of Aspasia variegata, an epiphytic orchid from the Brazilian Cerrado / Comportamento in vitro de Aspasia variegata, uma orquídea epífita do cerrado brasileiro

Aspasia variegata occurs naturally in the savanna of the Mato Grosso do Sul State, Brazil and it has been widely collected for its beautiful flowers. Additionally, its habitat has been greatly reduced and little or no investigation of its spread has been performed. Aiming to establish a protocol to obtain seedlings of the orchid A. variegata, different compositions of culture medium were tested to identify which one provided better in vitro growth and development and to assess the influence of these media in seedling acclimatisation. Thus, seeds obtained from mature capsules were inoculated in Knudson culture medium for 120 days until the protocorm stage. They were transferred to different culture media formulations, including MS and Knudson with half or full formulation, and 3.0 and 6.0g L-1 activated charcoal were added to them or not. After 180 days of protocorm inoculation, seedlings were evaluated for length of roots and shoots, number of roots and leaves, and chlorophyll contents. After that, seedlings were transferred to trays containing a mixture of Plantmax® and coconut fibre (1:1) for acclimatisation. Best results for the in vitro growth of A. variegata were obtained with the use of MS medium supplemented with 6.0g L-1 activated charcoal. Higher levels of chlorophyll were obtained, however, in treatments containing MS salts without activated charcoal presence, and lower levels in media containing Knudson salts with the presence of activated charcoal. The seedlings originated by higher chlorophyll levels during in vitro cultivation presented the highest survival rates and better development in the acclimatisation phase.

A orquídea Aspasia variegata ocorre naturalmente no Cerrado Sul-Matogrossense, e tem sido bastante coletada de seu habitat, devido à beleza de suas flores. Adicionalmente, sua área de ocorrência tem sido bastante reduzida e pouco ou nenhum estudo visando a sua multiplicação tem sido realizado. Objetivando estabelecer protocolo para obtenção de mudas de A. variegata, diferentes composições de meio de cultivo foram testadas para observar aquela que propicia melhores condições para crescimento e desenvolvimento dos protocormos in vitro e ainda a influência desses meios na fase de aclimatização das mudas. Para tal, foram utilizadas cápsulas maduras para obtenção das sementes, as quais foram inoculadas em meio de cultivo básico Knudson por 120 dias até o desenvolvimento de protocormos. Estes foram então transferidos para diferentes formulações dos meios de cultivo MS e Knudson, variando a concentração de sais e de carvão ativado (0; 3,0 e 6,0g L-1). Após 180 dias da inoculação dos protocormos, foram realizadas avaliações referentes ao comprimento da maior raiz e da parte aérea, número de raízes e folhas, e quantificados os teores de clorofila. Em seguida, as mudas foram transferidas para bandejas contendo uma mistura de Plantmax® e Fibra de Coco (1:1) para aclimatização. Melhores resultados para o crescimento in vitro de A. variegata foram obtidos com a utilização do meio de cultura MS, acrescido de 6,0g L-1 de carvão ativado. No entanto, os maiores níveis de clorofila foram obtidos nos tratamentos contendo sais MS desprovidos de carvão ativado, e os menores nos meios contendo sais Knudson providos com carvão ativado. As plantas oriundas dos tratamentos com maiores teores de clorofila total durante a fase in vitro obtiveram as maiores taxas de sobrevivência e melhor desenvolvimento na fase de aclimatização.

Protocol optimization and histological analysis of in vitro plant regeneration of RB92579 and RB93509 sugarcane cultivars / Otimização do protocolo e análise histológica da regeneração in vitro de plantas dos cultivares de cana-de-açúcar RB92579 e RB93509

The objectives of this study were to establish appropriate conditions for obtaining plant regeneration and acclimatization of the 'RB92579' and 'RB93509' sugarcane cultivars and to elucidate the shoots origin through histological analysis. For both cultivars, obtaining shoots showed better results with the culture of explants on a callus induction medium containing 2.0mg L-1 2,4-dichlorophenoxyacetic acid, followed by cultivation on a shoot induction medium containing 0.1mg L-1 kinetin and 0.2mg L-1 benzilaminopurine. The MS medium without growth regulators proved to be appropriate for elongation and rooting of shoots and the use of the composed substrate of vermiculite + MS salts was effective for acclimatization. Histological analysis revealed that the origin of the shoots in both cultivars occurred through indirect organogenesis.

Os objetivos deste estudo foram estabelecer condições apropriadas para a obtenção de regeneração de plantas e aclimatização das cultivares 'RB92579' e 'RB93509' de cana-de-açúcar e elucidar a origem das brotações através da análise histológica. Em ambas as cultivares, as brotações obtidas apresentaram os melhores resultados com a cultura dos explantes em um meio de indução de calo contendo 2,0mg L-1 de ácido 2,4-diclorofenoxiacético, seguido do cultivo em meio indutor de brotações, contendo 0,1mg L-1 de cinetina e 0,2mg L-1 benzilaminopurina. O meio MS sem reguladores de crescimento foi adequado para o alongamento e enraizamento das brotações e da utilização do substrato composto de vermiculite + sais do meio MS, foi eficaz para a aclimatização. A análise histológica revelou que a origem das brotações em ambas as cultivares ocorreu via organogênese indireta.

Variações anatômicas de Laelia purpurata var. cárnea cultivada in vitro sob diferentes intensidades e qualidade spectral de luz / Anatomical variations of Laelia purpurata var. cárnea in vitro cultured under different intensities and spectral quality of light

Plantas de Laelia purpurata var. cárnea propagadas in vitro e mantidas em sala de crescimento e em casa de vegetação foram submetidas a diferentes intensidades e qualidade espectral de luz, envolvidas com diferentes malhas coloridas: azul, vermelha e preta. Foi observado que a intensidade e qualidade espectral de luz interferiram de forma significativa em todos os parâmetros analisados, aos 120 dias de cultivo. Plantas cultivadas sob malha azul em sala de crescimento e casa de vegetação apresentaram maior espessamento da epiderme na face adaxial (31,73 e 35,46µm), respectivamente, diferindo estatisticamente quando comparado com os demais tratamentos. Foi observado aumento significativo no número de camadas de células do velame em raízes de plantas cultivadas em casa de vegetação, independente da malha de sombreamento, quando comparadas com as de sala de crescimento. Em secções transversais de raízes de plantas cultivadas em casa de vegetação sob malha azul, foi observada maior diferenciação dos tecidos (velame, exoderme, córtex e cilindro vascular).

in vitro propagated orchid (Laelia purpurata var. cárnea) were maintained in a growth chamber in a greenhouse and subjected to different spectral intensities and quality of light, using different colored shade-net (blue, red and black). It was observed that the light intensity and spectral quality influenced significantly all the parameters analyzed at 120 days of cultivation. Plants cultivated under blue color shade net at growth chamber and greenhouse presented higher thickening of epidermis on the adaxial face (31.73 and 35.46µm), respectively, and were statistically different when compared with other treatments. It was observed a significant increase in the number of velamen cell layers in plant roots grown in the greenhouse, regardless of the color shade-net used when compared with plants cultivated at growth chamber. It was observed a higher differentiation of tissues (canopy, exodermis, cortex and vascular cylinder) in cross sections plant roots grown in greenhouse under blue shade-net.

Micropropagação de Dioscorea multiflora Grised / Micropropagation of Dioscorea multiflora Grised

Dioscorea multiflora uma planta nativa do Sul do Brasil produz a diosgenina como metabólito secundário majoritário, uma substância potencialmente usada pela indústria farmacêutica para a produção de cortisona e substâncias com ação contraceptiva. Objetivou-se, neste trabalho otimizar o protocolo de micropropagação de D. multiflora, visando a produção de mudas em escala comercial. Segmentos nodais subcultivados em meio MS sólido foram transferidos para multiplicação em meio MS suplementado com BAP (0,01; 0,1; 0,5; 1,0 e 3,0 mg L-1)e meio MS suplementado com 0,1 mg L-1 ou 0,5 mg L-1 de BAP acrescido de diferentes concentrações de sacarose (2, 4, 6, 8 e 10 por cento). Para o enraizamento, as brotações foram cultivadas em meio MS suplementado com AIB (0,1; 0,5; 1,0 e 3,0 mg L-1) e meio MS suplementado com ANA (0,1; 0,5; 1,0 e 3,0 mg L-1). Os experimentos in vitro foram instalados em delineamento experimental inteiramente casualizado e cada tratamento constituiu-se de 3 repetições e 10 cubetas/parcela. Plântulas com e sem raízes foram aclimatizadas em casa de vegetação. Melhores resultados de multiplicação e enraizamento foram obtidos em meio MS + 0,1 mg L-1 de BAP (80 por cento) e em meio MS + 1,0 mg L-1 de AIB (42,6 por cento), respectivamente. Não houve diferença quanto à porcentagem de sobrevivência das plântulas in vitro e ex vitro durante a aclimatização (75 por cento). O protocolo de micropropagação para D. Multiflora é efetivo e pode ser usado para a produção em escala comercial.

Dioscorea multiflora is a plant native to southern Brazil that produces diosgenin as a major secondary metabolite, a substance which is used by the pharmaceutical industry for the production of cortisone and substances with contraceptive action. The objective of this work was to optimize the micropropagation protocol of D. multiflora, for the production of seedlings on a commercial scale. Nodal segments subcultured in solid MS medium were transferred for multiplication to MS medium supplemented with BAP (0.01, 0.1, 0.5, 1.0 and 3.0 mg L-1) and MS medium supplemented with 0.1 mg L-1 or 0.5 mg L-1 BAP plus different concentrations of sucrose (2, 4, 6, 8 and 10 percent). For rooting, the shoots were cultured on MS medium supplemented with IBA (0.1, 0.5, 1.0 and 3.0 mg L-1) and MS medium supplemented with NAA (0.1, 0.5, 1.0 and 3.0 mg L-1). A completely randomized design was used with treatment consisting of 3 replicates with 10 buckets per plot. Seedlings with and without roots were acclimatized in a greenhouse. The best results of multiplication and rooting were obtained in MS medium + 0.1 mg L-1 BAP (80 percent) and in MS medium + 1.0 mg L-1 IBA (42.6 percent), respectively. There was no difference in the survival percentage of seedlings in vitro and during ex vitro acclimatization (75 percent). The micropropagation protocol for production of D. multiflora is effective and can be used for commercial production.

Micropropagação e aclimatização de gerânio (Pelargonium graveolens L. ) / Micropropagation and acclimatization of geranium (Pelargonium graveolens L. )

O gerânio (Pelargonium graveolens L.) é uma planta medicinal e aromática nativa do sul da África, cujo óleo essencial é amplamente empregado nas indústrias de perfumaria e cosmético, além de ser usado como terapêutico. Avaliou-se o efeito da luminosidade e dos reguladores de crescimento BAP e ANA na multiplicação in vitro e o uso de diferentes substratos na aclimatização de mudas micropropagadas. Foram avaliadas as concentrações 0; 0,5; 1,0 e 2,0 mg L-1 de BAP, 0; 0,1 e 0,5 mg L-1 de ANA e duas condições de luminosidade (ausência e presença de luz), em esquema fatorial 4x3x2; para a aclimatização foram utilizados quatro substratos, pó de coco + Biosafra® (3-12-6) (12 g L-1) + calcário (1 g L-1) (PCBC); pó de coco + Biosafra® (3-12-6) (12 g L-1) + calcário (1 g L-1) + vermiculita (1:1) (PCBCV 1:1); pó de coco + Biosafra® (3-12-6) (12 g L­-1) + calcário (1 g L-1) + vermiculita (PCBCV 2:1) e vermiculita e adição semanal de sais MS (VS). Para a micropropagação de P. graveolens a utilização de 1,3 mg L-1 de BAP e 0,5 mg L-1 de ANA é eficiente na regeneração direta de plantas de gerânio, sendo a condição de escuro a mais indicada por proporcionar o maior número de brotos por explante. Para a aclimatização das mudas de gerânio, os melhores resultados foram obtidos em mudas aclimatizadas no substrato vermiculita com adição semanal de sais de MS seguido do substrato PCBCV 1:1.

Geranium (Pelargonium graveolens L.) is a medicinal and aromatic plant native to the south of Africa and whose essential oil is widely used by perfume and cosmetic industries, as well as in therapeutics. The effect of luminosity and growth regulators BAP and NAA on in vitro multiplication was evaluated, together with the use of different substrates on the acclimatization of micropropagated seedlings. The evaluated concentrations were 0, 0.5, 1.0 and 2.0 mg L-1 BAP; 0, 0.1 and 0.5 mg L-1 NAA; and two luminosity conditions (absence and presence of light), in a 4 x 3 x 2 factorial arrangement. For acclimatization, four substrates were tested: coconut dust + Biosafra® (3-12-6) (12 g L-1) + limestone (1 g L-1) (CDBL); coconut dust + Biosafra® (3-12-6) (12 g L-1) + limestone (1 g L-1) + vermiculite (1:1) (CDBLV 1:1); coconut dust + Biosafra® (3-12-6) (12 g L-1) + limestone (1 g L-1) + vermiculite (CDBLV 2:1); and vermiculite with weekly addition of MS salts (VS). For P. graveolens micropropagation, the use of 1.3 mg L-1 BAP and 0.5 mg L-1 NAA is efficient for the direct regeneration of geranium plants, and the dark condition is the most suitable since it provides a larger number of shoots per explant. For the acclimatization of geranium seedlings, the best results were obtained with seedlings acclimatized in the substrate vermiculite with weekly addition of MS salts, followed by the substrate CDBLV 1:1.

Micropropagação de plântulas de erva-mate obtidas de embriões zigóticos / Micropropagation of holly plantlets obtained from zygotic embryos

O objetivo deste trabalho foi avaliar o potencial de micropropagação de erva-mate (Ilex paraguariensis Saint Hilaire) a partir de plântulas assépticas oriundas de embriões zigóticos imaturos. Ápices caulinares foram inoculados em meio base, formado por ¼ da concentração dos sais do meio MS, com diferentes doses de 6-benzilaminopurina (BAP). Ápices caulinares foram enraizados em meio base com diferentes doses de ácido indolbutírico (AIB) e avaliado o efeito do AIB do meio de enraizamento in vitro na aclimatização das plantas. O meio base com 8,88µM de BAP foi o mais efetivo para a multiplicação, promovendo o maior número e comprimento de brotações adventícias. Ápices caulinares enraizaram em 30 dias de cultivo em meio base, acrescido de 7,38µM de AIB. A dose de AIB utilizada no enraizamento in vitro interfere na aclimatização das plantas. A técnica de micropropagação descrita pode ser utilizada para a produção massal de plantas de erva-mate.

The aim of this research was to evaluate the micropropagation potential of holly (Ilex paraguariensis Saint Hilaire) aseptic plantlets derived from immature zygotic embryos. Shoot tip were inoculated in a quarter-strength MS basal medium with different doses of 6-benzylaminopurine (BAP) to induce multiple shoots. Shoot tips were inoculated in a basal medium with different doses of indol-butiric acid (IBA) for in vitro rooting and to test their effects in plantlet acclimatization. The addition of 8.88µM BAP to the basal medium increased the number of adventitious shoots and shoot height. Shoot tip rooted in basal medium with 7.38µM IBA in 30 days of culture. The IBA doses of the rooting medium affect plantlet acclimatization. The described micropropagation protocol might be used to produce a high number of holly plants.

Adventitious shoots from nodule cluster cultures of Vriesea reitzii: an endemic and endangered bromeliad from atlantic forest / Brotos adventícios a partir de culturas nodulares de Vriesea reitzii: uma bromélia endêmica e em extinção da Mata Atlântica

The Atlantic Forest is a biome with megadiversity and a number of bromeliads take part of it. This is the case of Vriesea reitzii, an endemic bromeliad threatened with extinction. Tissue culture techniques are valuable tools for the mass propagation of bromeliads, thus reducing pressure in the natural habitat. The aim of the present work was to establish an in vitro protocol based on the induction and proliferation of nodule cluster cultures of this species. Plantlets maintained in MS liquid culture medium plus NAA (2µM) and BAP (4µM) had the basal regions of leaves excised and then inoculated in gelled with agar (7g L-1) MS culture medium plus with Dicamba (2.5; 5; 10; 20 e 30µM) and Kin (2µM) or free of plant growth regulators. Nodule cluster cultures arose from the basal region of explants. The subculture to MS liquid medium plus GA3 (10µM) and in MS liquid medium free of plant growth regulators resulted in a high proliferation rate. The mean regenerative rate was 39 plantlets/0.03g of nodule culture. Plantlets were acclimatized in a mix substrate of 1:1 (v:v) of carbonized rice coat and Turfa Fertil® mineral supplement.

A floresta tropical atlântica é um bioma de alta diversidade, rico em espécies endêmicas de bromélias, entre elas Vriesea reitzii, que se encontra ameaçada de extinção. Técnicas de cultura de tecidos possibilitam a propagação massal de bromélias, reduzindo a pressão de coleta na natureza. O presente trabalho teve como objetivo desenvolver um protocolo regenerativo baseado na indução e no desenvolvimento de culturas nodulares desta espécie. Plantas multiplicadas em meio MS líquido com ANA (2µM) e BAP (4µM) tiveram suas folhas excisadas e inoculadas em meio MS geleificado com ágar (7g L-1) e suplementado com Dicamba (2,5; 5; 10; 20 e 30µM) e Kin (2µM) ou isento de fitorreguladores. A indução de culturas nodulares foi observada na região basal dos explantes. Estas culturas foram subcultivadas em meio de cultura MS líquido suplementado com GA3 (10µM) e subseqüentemente para meio MS líquido isento de fitorreguladores, resultando em altas taxas de proliferação de culturas nodulares que originaram brotos adventícios e microbrotos. A taxa média de regeneração foi de 39 brotos/0,03g de culturas nodulares. As mudas foram aclimatizadas com sucesso em substrato composto por fertilizante organomineral Turfa Fértil® e casca de arroz carbonizada na proporção de 1:1 (v:v).

Luz natural na micropropagação do abacaxizeiro (Ananas comosus L. Merr) / Natural light in pineapple (Ananas comosus L) micropropagation / Luz natural en micropropagación de la piña (Ananas comosus L. Merr)

Brotações de Ananas comosus cv. Imperial, foram enraizadas in vitro em diferentes condições ambientais (luz artificial e natural) e após dois meses as plântulas foram transferidas para substrato comercial (Plantmax®) em casa de vegetação. O crescimento das plantas e anatomia foliar foram avaliados em diferentes tempos (0, 7, 15, 30 e 60 dias) do processo de aclimatização. O emprego de luz natural durante a fase de enraizamento in vitro proporciona melhor desempenho agronômico e anatômico das plantas de abacaxizeiro durante a fase de aclimatização, apresentando o benefício de economizar energia elétrica para iluminação artificial em laboratórios de cultura de tecidos vegetais.

Shoot tips of Ananas comosus ‘Imperial’ were rooted in vitro under two environments (artificial and natural light) and after two months the plantlets were transferred to commercial substrate (Plantmax®) in a greenhouse. Plant growth and leaf anatomy were evaluated at 0, 7, 15, 30 and 60-days during acclimatization. The in vitro rooting under natural light provides better agronomic and anatomical performances of Ananas comosus plants, with the benefit of saving electric energy for artificial illumination in vegetal tissue culture laboratories.

Brotes de Ananas comosus cv. Imperial fueron enraizados in vitro en distintas condiciones ambientales (luz natural y artificial) y después de dos meses las plántulas fueron transferidas para el substrato comercial (Plantmax®) en invernadero. El crecimiento de las plantas y la anatomía de las hojas fueron avaluadas en distintos tiempos (0, 7, 15, 30 y 60 días) del proceso de climatización. EL empleo de luz natural durante la fase de emisión de raíces in vitro proporciona el mejor desarrollo agronómico y anatómico de las plantas de piña durante la fase de climatización, presentando el beneficio de ahorrar energía eléctrica para la iluminación artificial en laboratorios de cultivo de tejidos vegetales.

Modificações na anatomia foliar de bananeiras durante o processo de micropropagação / Modifications on leaf anatomy of banana during the micropropagation process. / Modificaciones en la anatomía foliar de bananas durante el proceso de micropropagación.

O estudo e compreensão das alterações decorrentes do processo de micropropagação constituem caminhos interessantes para o aprimoramento desta tecnologia. O objetivo deste trabalho foi avaliar modificações anatômicas em folhas de bananeira (Musa spp.) durante o processo de adaptação das plantas micropropagadas às condições ex vitro. Brotações axilares assépticas da cv. Preciosa (AAAB) foram enraizadas em meio MS, adicionado de ANA (1mg·l-1) e ágar (6g·l-1) por 24 dias, e aclimatizadas por 120 dias. Os tratamentos consistiram de folhas em diferentes estádios de desenvolvimento: T1 - folhas de plantas ao final da fase de enraizamento in vitro, T2 - folhas persistentes de plantas aos 30 dias de aclimatização, T3 - novas folhas de plantas aos 30 dias de aclimatização (folhas de transição), T4 - folhas de transição de plantas aclimatizadas por 60 dias, T5 - novas folhas de plantas aclimatizadas por 60 dias, e T6 - novas folhas de plantas aclimatizadas por 120 dias. Maior grau de diferenciação e, portanto melhor adaptação ocorre em folhas provenientes de primórdios foliares diferenciados em condição ex vitro. A fase de aclimatização é imprescindível para o maior espessamento e diferenciação dos parênquimas clorofilianos e para corrigir as modificações desenvolvidas nas plantas in vitro. O estudo sobre a anatomia foliar possibilita uma melhor compreensão das alterações que ocorrem em plantas de bananeira micropropagadas.

The study and understanding of alterations taking place during the micropropagation process can provide valuable information about this technology. The objective of this work was to evaluate the anatomical modifications in leaves of micropropagated banana (Musa spp.) plants during their adaptation to ex vitro conditions. Aseptic axillary shoots of ‘Preciosa’ cultivar (AAAB) were rooted for 24 days in MS medium containing NAA (1mg·l-1) and agar (6g·l-1), and acclimatized for 120 days. The treatments consisted of leaves at different stages of development: T1 - leaves from plants at the end of in vitro rooting phase, T2 - persistent leaves from plants after 30 days of acclimatization, T3 - new leaves from plants after 30 days of acclimatization (transition leaves). T4 - transition leaves from plants after 60 days, T5 - new leaves from plants after 60 days of acclimatization, and T6 - new leaves from plants after 120 days of acclimatization. A higher degree of differentiation and, thereby, better adaptation took place in leaves from leaf primordial differentiated in ex vitro conditions. The acclimatization phase is crucial for a greater thickness and differentiation of spongy and palisade parenchyma, and to correct the modifications of plants developed in vitro. The study of leaf anatomy provides a better understanding of alterations occurring in micropropagated banana plants.

El estudio y comprensión de las alteraciones ocurridas durante el proceso de micropropagación pueden proveer información valiosa acerca de esta tecnología. El objetivo de este trabajo fue evaluar las modificaciones anatómicas que tienen lugar en las hojas de plantas de banano (Musa spp.) micropropagadas durante el proceso de adaptación de las mismas a las condiciones ex vitro. Brotes axilares asépticos de cv. Preciosa (AAAB) fueron enraizados por 24 días en medio MS, adicionado con ANA (1mg·l-1) y agar (6g·l-1); y aclimatados por 120 días. Los tratamientos consistían de hojas en diferentes estadios de desarrollo: T1 - hojas de plantas en el final de la fase de enraizamiento in vitro, T2 - hojas persistentes de plantas con 30 días de aclimatación, T3 - hojas nuevas de plantas con 30 días de aclimatación (hojas de transición), T4 - hojas de transición de plantas aclimatadas por 60 días, T5 - hojas nuevas de plantas aclimatadas por 60 días, y T 6 - hojas nuevas de plantas aclimatadas por 120 días. Mayor grado de diferenciación y, por tanto, mejor adaptación ocurrió en hojas provenientes de primordios foliares diferenciados en condiciones ex vitro. La fase de aclimatación es fundamental para un mayor espesor y diferenciamiento de los parénquimas clorofilianos y para corregir las modificaciones desarrolladas en las plantas in vitro. El estudio de la anatomía foliar posibilita una mejor comprensión de las alteraciones que ocurren en bananeras micropropagadas.

Efeitos de citocininas sobre a anatomia foliar e o crescimento de Annona glabra L. durante o cultivo in vitro e ex vitro / Effects of cytokinins on the leaf anatomy and growth of Annona glabra L. during in vitro and ex vitro culture

O efeito de diferentes fontes de citocininas durante o cultivo in vitro de A. glabra sobre características anatômicas de folhas e crescimento das plantas foi avaliado neste trabalho. BAP (6-benzilaminopurina) e KIN (cinetina) induziram aumento na espessura do mesofilo, enquanto que ZEA (zeatina) promoveu aumento na densidade e no índice estomático e no desenvolvimento do sistema vascular de folhas. A utilização de KIN e BAP proporcionou maior desenvolvimento e taxa de sobrevivência das plantas durante as fases de enraizamento e aclimatização.

The effect of different sources of cytokinins during the in vitro cultivation of A. glabra on anatomical characteristics of leaves and plant growth was evaluated in this work. BAP (6-benzilaminopurine) and KIN (kinetin) induced an increase in leaf mesophyll thickness, while the ZEA (zeatin) promoted an increase in density and stomatic index and development of leaves vascular system. The utilization of KIN and BAP improved higher plant development and survival rate during the acclimatization and rooting phases.

Ajuste do processo de micropropagação de barbatimão / Adjustment of the process of micropropagation of Stryphnodendron adstringens (Mart.) Coville

O objetivo desta pesquisa foi determinar um protocolo de micropropagação para o barbatimão. Para indução de brotações, os segmentos nodais foram inoculados em meio de cultura MS com diferentes concentrações de cinetina (0, 1, 2, 3, 4 e 5mg L-1). Para indução de raízes, brotações obtidas "in vitro" foram inicialmente transferidas para meio MS contendo 50 por cento da concentração de sais e com diferentes concentrações de ANA (0, 1, 2, 3 e 4mg L-1). Posteriormente, as brotações foram transferidas para meio MS contendo 50 por cento da concentração de sais, suplementado com carvão ativado. Para a aclimatização, as plantas obtidas foram transferidas para tubetes contendo diferentes substratos e, então, envolvidas com saco plástico transparente para auxiliar temporariamente na manutenção da umidade. As concentrações de 1 e 5mg L-1 de cinetina foram as mais eficientes na indução de gemas e brotos, respectivamente. Brotações com maiores comprimentos foram observadas em meio de cultura suplementado com 1mg L-1 de cinetina. Raízes em maior número e comprimento foram observados em meio de cultura suplementado com 4mg L-1 de ANA. Os substratos utilizados não afetaram significativamente a taxa de sobrevivência das plantas durante a fase de aclimatização.

The objective of the research was to determine a micropropagation protocol for the specie Stryphnodendron adstringens (Mart.) Coville. For shoot induction, nodal segments were inoculated in MS medium with different concentrations of kinetin (0, 1, 2, 3, 4 e 5mg L-1). For root induction, initially the shoots obtained 'in vitro' were transferred to MS containing 50 percent of salt concentration and with different concentrations of NAA (0, 1, 2, 3 e 4mg L-1). Lately, the shoots were moved to MS medium containing 50 percent of salt concentration, supplemented with activated charcoal. For acclimatization, the plants obtained were moved to plastic tubes containing different substrates and then covered with transparent plastic bags in order to maintain the environment humidity. The kinetin concentrations of 5.0 and 1.0mg L-1 were the most efficient for the induction of shots and buds, respectively. Shoot with a higher lengh were observed in MS medium supplemented with 1.0mg L-1 of kinetin. Roots in a higher number and length were observed in MS medium supplemented with 4.0mg L-1 of NAA. The substrates used had no significant effect on the rate of plant survival during the acclimatization stage.

Organogênese em capítulos florais e avaliação de características anatômicas da folha de Gerbera jamesonii Adlam / Capitulum organogenesis and anatomical characterization of Gerbera jamesonii Adlan leaves

Objetivou-se determinar um protocolo de micropropagação por organogênese indireta em capítulos florais de gérbera (Gerbera jamesonii Adlam) e comparar as características anatômicas de folhas de gérbera obtidas in vitro com as mantidas em condições in vivo. Capítulos florais de gérbera foram utilizados como fonte inicial de explantes para a indução de calos e regeneração. As brotações obtidas foram enraizadas in vitro e, após 30 dias, as plântulas foram aclimatizadas. Posteriormente, foram realizados estudos anatômicos de folhas provenientes do cultivo in vivo e in vitro. Obtiveram-se em média 3,2 brotações e 6,6 folhas a partir da indução de calos em capítulos florais de gérbera. Foi observada a formação de raízes na ausência e na presença de ANA, obtendo-se 100 por cento de enraizamento. A suplementação do meio de cultura com doses crescentes de ANA promoveram um aumento linear no número de raízes e no comprimento médio de raízes. As plântulas provenientes do cultivo in vitro apresentaram taxa de 100 por cento de sobrevivência na aclimatização. As estruturas foliares desenvolvidas in vivo apresentaram as epidermes adaxial e abaxial, parênquimas paliçádico e esponjoso mais espessos que no cultivo in vitro. O sistema vascular em folhas produzidas in vivo é mais desenvolvido que in vitro.

The objective was to determine a micropropagation protocol for indirect organogenesis and to compare the anatomical characteristics of leaves of gerbera (Gerbera jamesonii Adlam) obtained in vitro with the leaves maintained in vivo conditions. Capitulum explants of gerbera were taken as an initial source of explants to induce callus and regeneration. The obtained shoots were rootted in vitro and after 30 days seedlings were acclimatized.Thus, anatomical studies of leaves originating from of the in vivo and in vitro cultivation were taken. On average it was obtained 3,2 shoots and 6,6 leaves from the induction of callus in capitulum explants of gerbera. The formation of roots was observed in the presence and absence of NAA, obtaining 100 percent of rooting. The supplementation of NAA to the medium promoted a linear increase in the number of roots and in the mean length of roots. Seedlings from the in vitro cultivation showed rate of 100 percent of survival in the acclimatization. The foliar structures developed in vivo showed adaxial epidermis, palisade parenchyma, spongy parenchyma and abaxial epidermis thicker than in the in vitro cultivation. The vascular system in leaves produced in vivo is more developed than in vitro.