Influence of EDTA and its Association with Benzalkonium Chloride on Enterococcus faecalis Adhesion to Dentin / Influencia del EDTA y su Asociación con Cloruro de Benzalconio en la Adhesión de Enterococcus faecalis a la Dentina

ABSTRACT: The aim of this in vitro study was to investigate the influence of ethylenediaminetetraacetic acid (EDTA) associated with the benzalkonium chloride (BAK) on the adhesion and formation of Enterococcus faecalis biofilms attached to coated dentin. Discs standard bovine dentin blocks were treated with the coating materials evaluated: Saline solution (control), 17 % EDTA, 17 % EDTA associated with 1 % BAK for 5 minutes and subsequently washed with saline solution. Afterwards, biofilms of E. faecalis (ATCC 29212) were grown on the surface of coated dentin blocks for time intervals of 1 hour and 7 days (n = 20) and were subsequently washed with phosphate-buffered saline (PBS). Bacterial viability and total biovolume were analyzed by confocal laser scanning microscopy (CLSM) using the Live/Dead technique. Nonparametric Kruskal-Wallis followed by Dunn tests were used to determine statistical differences (a = 5 %). The 17 % EDTA + 1 % BAK group showed significantly lower biovolume and bacterial viability values at the end of 1 hour (p < 0.05). After 7 days of contamination, the 17 % EDTA and 17 % EDTA + 1 % BAK groups showed similar results that differed statistically from those of the control group (p < 0.05). The saline solution group showed higher values. The use of BAK associated with EDTA on dentin blocks surfaces before exposure to contamination was able to interfere in the adhesion of E. faecalis to dentin. Also, dentin treatment by BAK associated with a chelating agent influences the secondary biofilm formation, which could have important effects on the long-term success of root canal treatment.

RESUMEN: El objetivo del estudio consistió en investigar in vitro, la influencia del ácido etilendiamino-tetraacético (EDTA) con cloruro de benzalconio (BAK) en la adhesión y formación de biopelículas de Enterococcus faecalis a la dentina. Discos de dentina bovina fueron tratadas con solución salina (control), 17 % de EDTA, 17% de EDTA asociado con 1 % de BAK durante 5 minutos y lavadas con solución salina. Las biopelículas de E. faecalis (ATCC 29212) se cultivaron sobre los discos de dentina durante intervalos de tiempo de 1 hora y 7 días (n = 20), lavados con solución salina tamponada con fosfato (PBS). La viabilidad bacteriana y el biovolumen total se analizaron mediante microscopía de barrido por láser (CLSM) utilizando la técnica Live / Dead. Se realizó prueba no paramétrica de Kruskal-Wallis, seguida por Dunn con una diferencia estadística (a = 5 %). El grupo de 17 % EDTA + 1 % BAK mostró valores significativamente menores de biovolumen y viabilidad bacteriana al final de 1 hora (p < 0,05). Después de 7 días de contaminación, los grupos de 17 % EDTA y 17 % EDTA + 1 % BAK mostraron resultados similares que diferían estadísticamente del grupo control (p < 0,05). La solución salina mostró valores más altos. La asociación de BAK con EDTA antes de la contaminación interfirió en la adhesión de E. faecalis. Además, el tratamiento de la dentina por BAK asociado con EDTA influye en la formación de biopelículas secundarias, lo que podría tener efectos importantes sobre el éxito a largo plazo del tratamiento del conducto radicular.

Comparación del efecto citotóxico de tres agentes quelantes sobre fibroblasto del ligamento periodontal humano. Estudio in vitro / Comparison of the cytotoxic effect of three chelating agents on human periodontal ligament fibroblast. In vitro study

Objetivo: Comparar in vitro el efecto citotóxico de tres agentes quelantes sobre fibroblastos del ligamento periodontal humano. Materiales y métodos: Se utilizaron cultivos de fibroblastos de ligamento periodontal humano, los cuales fueron colocados en contacto con los agentes quelantes a evaluar (RC-Prep, Glyde, EDTA al 17%) a intervalos de 15, 30 y 60 minutos. Se midió la absorbancia para cada uno de los grupos, para determinar el grado de actividad enzimática, que es indicador de muerte celular. Previo a la cuantificación de la absorbancia se corroboró microscópicamente la formación de los cristales de formazán, los cuales se forman alrededor de los fibroblastos, y su presencia es indicador de integridad de la membrana y de la actividad metabólica. Por microscopia se verificó la formación de cristales de formazan, después de agregar azul de tripán. Resultados: El Glyde mostró mayor grado de citotoxicidad, con una diferencia estadísticamente significativa, al compararlo con EDTA 17% y el RC-PREP. El EDTA presentó mayor citotoxicidad que el RC-PREP a los 15minutos, evento que cambió a los 30 y 60 minutos. Conclusiones: Los agentes quelantes RC-Prep, Glyde y EDTA tienen un efecto citotóxico a nivel de los fibroblastos del ligamento periodontal, siendo el EDTA el de menor efecto citotóxico a los 30 y 60 minutos comparado con RC-Prep y Glyde.

Objectives: To compare in vitro, the cytotoxic effect of three chelating agents on human periodontal ligament fibroblasts, RC-Prep, Glyde and EDTA. Methods: Fibroblast cultures of human periodontal ligament were used, which are placed in contact with chelating agents to evaluate (RC-Prep, Glyde, 17% EDTA) at time intervals of 15,30 and 60 minutes. Absorbance was measured for each group to determine the degree of enzyme activity, which is an indicator of cell death. Prior to the measurement of absorbance was confirmed microscopically, the formation of formazan crystals, which are formed around fibroblasts, and its presence is an indicator of membrane integrity and metabolic activity. Microscopy verified the formation of formazan crystals, after adding trypan blue. Results: Glyde showed greater cytotoxicity with a statistically significant difference when compared with 17% EDTA and RC-PREPchelants. The EDTA showed higher cytotoxicity than the RC-PREP to 15min, and that event changed at 30 and 60 minutes. Conclusion: It was shown experimentally that the chelating agents RC-Prep, EDTA and Glyde have a cytotoxic effect at the periodontal ligament fibroblasts. EDTA has a lowest cytotoxic effect at 30 and 60 minutes compared to RC-Prep and Glyde.

Tratamento da anemia ferropriva com ferro quelato glicinato e crescimento de crianças na primeira infância / Treatment of iron deficiency anemia with iron bis-glycinate chelate and growth of young children

Objetivo: Avaliar a resposta à suplementação diária com ferro quelato glicinato e seu impacto sobre o crescimento linear. Métodos: Realizou-se um estudo prospectivo com 790 crianças, de 6 a 36 meses, que freqüentavam creches municipais de São Paulo no período de 1999 a 2003. Ao início e ao final do estudo a hemoglobina, o peso corporal e a estatura/comprimento foram coletados. Utilizou-se suplemento contendo ferro quelato glicinato em gotas na dose de 5mg Fe elementar/kg peso/dia, administrado na própria instituição pelo profissional de saúde da creche, por um período de 12 semanas. Resultados: A suplementação resultou em um significante e positivo efeito sobre os níveis de hemoglobina. A resposta ao tratamento foi positiva em 85,3% das crianças, com um aumento médio de 1,6g/dL nos valores de hemoglobina(p<0,001). Nas crianças de 25-36 meses e naquelas com valores de hemoglobina mais baixas ao início da suplementação, observou-se ganho significantemente maior. Durante o período de intervenção não foi observada nenhuma intercorrência gastrintestinal ou intolerância ao suplemento. Verificou-se também impacto sobre o ganho de estatura e o indicador nutricional estatura/idade (escore-Z) nas crianças com idade acimade 12 meses, porém o mesmo não foi observado em relação ao peso e aos indicadores peso/estatura e peso/idade. Conclusão Os resultados indicam que o ferro quelato glicinato é um suplemento adequado para tratamento da anemiaferropriva em crianças na primeira infância, pela sua excelente tolerabilidade contribuindo também para o ganho de estatura entre crianças acima de 12 meses.

Objective: The objective of this study was to evaluate response to daily supplementation with iron bis-glycinate chelate and its impact on linear growth.Methods: A prospective study was done with 790 children aging from 6 to 36 months who attended daycare in SãoPaulo from 1999 to 2003. Hemoglobin levels, body weight and height/length were determined at the beginning and end of the study. Liquid iron bis-glycinate chelate was administered in a dosage of 5mg of elemental iron/kg of body weight/day given by the health provider of the daycare facility for a period of 12 weeks. Results: Supplementation resulted in a significant, positive effect on the hemoglobin levels of 85.3% of the children with a mean increase of 1.6g/dL (p<0.001). In children aging from 25 to 36 months and in those with lower hemoglobin levels at the beginning of supplementation, there was a significantly higher increase. No gastrointestinal problem or intolerance to the supplement was observed during the intervention period. Supplementation also had an impact on growth and on the height-for-age indicator (z-score) in children older than 12 months but there was no impact on weight and on the weight-for-height and weight-for-age indicators. Conclusion: The results show that iron bis-glycinate chelate is an adequate supplement to treat iron deficiency anemia in young children since it is very well tolerated and promotes growth in children older than 12 months.

Influência do pH na ação de alguns tipos de EDTA na forma gel nas paredes do canal radicular / Influence of pH in the action of some types of EDTA gels in the walls of the root canal

Este trabalho verificou a ação do EDTA nas paredes do canal radicular relacionando-a com o pH dos produtos utilizados. Vinte e cinco incisivos centrais superiores humanos foram tratados com diferentes tipos de EDTA e divididos em cinco grupos: Grupo 1-EDTA gel a 15%; Grupo 2 - EDTA gel a 17%; Grupo 3 - EDTA gel a 17%; Grupo 4 - EDTA gel a 24%; Grupo 5 - EDTA líquido a 17% (controle). Após o preparo químico-mecânico, os dentes foram analisados em Microscopia Eletrônica de Varredura (2000x) e foi observada a presença da smear layer nos grupos 1 a 4. Essas mesmas formulações foram submetidas à determinação de pH. Houve grande variação do pH entre as formulações de EDTA na forma gel, influenciando na liberação de EDTA e, consequentemente, na quelação.