Alternatively polyadenylated calpastatin transcripts in bovine muscles / Transcriptos alternativamente poliadenilados de calpastatina en músculos de bovino

Calpastatin activity has a key role in the tenderization process that occurs during postmortem storage of meat under refrigerated conditioning. The regulation of calpastatin (CAST) expression is highly complex, the gene has four putative promoters and at least three different polyadenylation sites, and it is also alternatively spliced. We investigated the presence of alternative polyadenylation (APA) isoforms of CAST transcripts in three muscles (infraspinatus, triceps brachii and semitendinosus) of two bovine breeds (Angus and Brahman). The 3´ RACE-PCR was used to specifically amplify the different APA sites. The amplified fragments were cloned and sequenced. Sequencing confirmed the existence of three expected polyadenylation sites corresponding to short, medium and long polyadenylated transcripts. Also, transcripts with a novel APA site were found in the three muscles of both breeds. Because the same APAs isoforms were found between muscles and breeds, we could hypothesize a possible contribution to the relative abundance of different isoforms, probably in coordination with promoter preference and alternative splicing. This knowledge would be useful in the design of future experiments to analyze differential expression of CAST isoforms and their contribution to the definition of beef tenderness.

La actividad de la calpastatina tiene un rol clave en el proceso de tiernización postmortem de la carne durante su almacenamiento refrigerado. La regulación de la expresión de calpastatina (CAST) es altamente compleja; el gen tiene cuatro potenciales promotores, diferentes sitios de poliadenilación de transcriptos y también splicing alternativo. En este trabajo se investiga la presencia de isoformas de transcriptos de CAST alternativamente poliadenilados (APA) en tres músculos (infraspinatus, triceps brachii y semitendinosus) de dos razas bovinas (Angus y Brahman). Se utilizó la técnica de 3´ RACE-PCR para amplificar específicamente los diferentes sitios APA. Los fragmentos amplificados fueron clonados y secuenciados. La secuenciación confirmó la existencia de tres sitios de poliadenilación conocidos. Un nuevo sitio APA fue identificado en transcriptos de los tres músculos y en ambas razas. Dado que cualitativamente no hubo variación en la presencia de isoformas definidas por APA entre músculos y razas de terneza contrastante, podría hipotetizarse una posible contribución a la abundancia relativa de distintas isoformas, probablemente en forma coordinada con la elección de promotores y el splicing alternativo. Este nuevo conocimiento podría ser de utilidad para el diseño de experimentos de análisis de expresión diferencial de isoformas de calpastatina, para ponderar la contribución de las mismas a las variaciones en terneza de la carne.

Genetic parameters of days open in Charolais cattle of Cuba / Parámetros genéticos de los días abiertos en ganado Charolais de Cuba / Parâmetros genéticos dos dias vazios no gado Charolês de Cuba

Background: there is little information in Cuba regarding the genetic components of the postpartum period in beef cattle. Objective: to compare estimates of genetic parameters of days open (DO) obtained with three models in Charolais cattle of Cuba. Methods: data from individual reproductive control of Charolais cattle from 17 herds in two Cuban companies were analyzed. The sample consisted of 16,891 calvings from 4,593 cows, daughters of 190 sires and 2,770 dams. Up to 10 parities per female between years 1981 and 2005 were considered. The WOMBAT program was used to estimate variance components. Three models were applied; an univariate model (UM) for each separate parity until the sixth calving; a repeatability model (RM) with all parities; and a random regression model (ARM) taking the number of calving as an independent variable. Results: the overall average for DO was 171 ± 93 days. The trend of the average value for DO in each calving was decreasing from the first to the tenth parity, with a seasonal performance around 155 days between the fourth and eighth calving. DO heritability estimated by UM was variable, with values of 0.03 for the first calving and 0.06 for the sixth. These variations cannot be observed with RM that estimated a heritability of 0.06. Values of 0.05 in the first calving until 0.07 in the tenth were estimated with ARM. Genetic correlations among DO for different parities were close to unity. Conclusions: changes of the estimated heritability for DO through the productive life of a female can be observed with ARM. The heritability estimates were low and did not differ from the results reported in other beef cattle breeds.

Antecedentes: en Cuba existe poca información relacionada con los componentes genéticos del periodo posparto en bovinos para carne. Objetivo: comparar los estimados de parámetros genéticos de los días abiertos (DO) obtenidos con tres modelos en ganado Charolais de Cuba. Métodos: los datos del control reproductivo individual de vacas Charolais de 17 hatos en dos empresas de Cuba fueron analizados. La muestra estuvo conformada por 16.891 partos de 4.593 vacas, hijas de 190 padres y 2.770 madres. Fueron considerados hasta 10 partos por hembras que ocurrieron entre 1981 y 2005. Se utilizó el programa WOMBAT para la estimación de componentes de varianza. Se aplicaron tres modelos; un modelo univariado (UM) para cada parto independiente hasta el sexto parto; un modelo de repetibilidad (RM) con todos los partos; y un modelo de regresión aleatoria (ARM) tomando el número del parto como variable independiente. Resultados: la media general de DO fue de 171 ± 93 días. La tendencia del valor promedio para DO en cada parto fue decreciente desde el primero al décimo, con un comportamiento estacional alrededor de 155 días entre el cuarto y el octavo parto. La heredabilidad de DO estimada por UM fue variable con valores de 0,03 en el primer parto y 0,06 en el sexto. Estas variaciones no pueden ser observadas con el RM que estimó una heredabilidad de 0,06. Valores de 0,05 en el primer parto hasta 0,07 en el décimo fueron estimados con el ARM. Las correlaciones genéticas entre DO para los diferentes partos fueron cercanos a la unidad. Conclusiones: los cambios de la heredabilidad estimada para DO a través de la vida productiva de una hembra pueden ser observados con los ARM. Los estimados de heredabilidad fueron bajos y no difiere de los resultados reportados en otras razas de ganado bovino para carne.

Antecedentes: em Cuba há pouca informação sobre os componentes genéticos do período pós-parto em bovinos de corte. Objetivo: comparar as estimativas de parâmetros genéticos de dias vazios (DO) obtidos com os três modelos em bovinos Charolês de Cuba. Métodos: os dados de controle reprodutivo individual de bovinos Charolês de 17 rebanhos em duas empresas de Cuba foram analisados. A amostra consistiu de 16.891 partos de 4.593 vacas, filhas de 190 touros e 2.770 matrizes. Até 10 partos foram considerados por fêmea que ocorreram entre 1981 e 2005. O programa WOMBAT foi utilizado para estimar os componentes da variância. Três modelos foram aplicados; um modelo univariado (UM) para cada paridade separado até o sexto parto; um modelo de repetibilidade (RM) com todas as parições; e um modelo de regressão aleatória (ARM), tendo o número de partos como uma variável independente. Resultados: a média geral foi de 171 ± 93 dias. A tendência do valor médio para o DO em cada parto foi diminuindo desde o primeiro até o décimo parto com um desempenho sazonal em torno de 155 dias entre o quarto e oitavo parto. A herdabilidade estimada para DO pela UM foi variável com valores de 0,03 no primeiro parto e 0,06 no sexto. Essas variações não podem ser observadas com RM que estimou uma herdabilidade de 0,06. Os valores de 0,05 no primeiro parto até 0,07 no décimo foram estimados com ARM. As correlações genéticas entre DO para diferentes partos foram próximas da unidade. Conclusões: alterações da herdabilidade estimada para DO durante a vida produtiva de uma fêmea pode ser observado com ARM. As estimativas de herdabilidade foram baixas e não diferiram entre os resultados apresentados em outras raças de gado de corte.

Neosporosis epidémica y endémica: descripción de dos eventos en bovinos para cría / Endemic and epidemic bovine neosporosis: description of two events in beef cattle

El objetivo de este trabajo es describir dos eventos producidos en la provincia de Buenos Aires en los cuales Neospora caninum estuvo asociado a la ocurrencia de abortos en bovinos de cría para carne. En uno de ellos se registraron 11 abortos en 57 vaquillonas durante 45 días, en este evento fue 5 veces más probable que una vaquillona que sufrió un aborto fuera seropositiva a N. caninum que una que no lo sufrió (odds ratio [OR] = 4,9 IC 1,2­19,9) (p<0,05). En el otro evento se registraron 14 abortos en 140 vacas, y no se observó asociación significativa entre los abortos y la seropositividad frente a N. caninum OR = 0,69 (0,06­7,31) (p>0,05). Se analizaron dos fetos de cada evento: estos resultaron negativos a otros patógenos de la reproducción, aunque presentaron anticuerpos específicos y lesiones histopatológicas compatibles con infecciones por N. caninum. Estos resultados sugieren dos posibles modalidades de presentación de abortos en bovinos causados por N. caninum: una epidémica, como la del primer evento aquí referido, y una endémica, como la del segundo

The aim of this study was to describe two events in which Neospora caninum was involved in bovine abortions in beef cattle. In the first event, 11 abortions in 57 heifers were recorded in 45 days. One aborted heifer was 5 times more likely to be seropositive than a non-aborted heifer (OR=4.9; IC 1.2­19.9) (p<0.05). In the second event, no association between serological results and abortions were observed (OR= 0,69; 0,06­7,31) (p>0.05). Neither antibodies nor isolation of other pathogens were achieved in any case. On the contrary, antibodies and pathognomonic histopathological lesions were observed in the four fetuses from both cases. Interestingly, the findings in the first event suggest the epidemic behavior of the disease. In contrast, in the second event it appears that few abortions were due to N. caninum, suggesting the presence of endemic neosporosis