Análise da expressão imunoistoquímica de regy e de proteínas envolvidas na regulação da apoptose em carcinomas epidermoides de língua oral / Analysis of the immunohistochemical expression of regy and of proteins involved in the regulation of apoptosis in oral tongue squamous cell carcinomas

O câncer na cavidade oral é uma das lesões malignas mais frequentes na população mundial. Como o processo de desenvolvimento das neoplasias malignas remete a danos que promovem um desequilíbrio na regulação da divisão e morte celular, nos últimos anos, diversos estudos foram realizados com o intuito de verificar a influência desses danos no comportamento global das células e na evolução da doença. Nesse contexto, pesquisas recentes mostraram que alterações na expressão de REG podem desempenhar um importante papel na progressão tumoral de várias neoplasias malignas, por interferir na regulação da apoptose. Diante disso, o objetivo desse trabalho foi investigar a expressão imunoistoquímica dos marcadores REG, p53, MDM-2, Bcl-2 e Bax em carcinomas epidermoides de língua (CELs) oral, com a finalidade de promover uma análise comparativa da imunoexpressão destas proteínas com os parâmetros clínico-patológicos de agressividade da lesão, no intuito de identificar se o REG contribui para a progressão do tumor e se interfere na expressão das proteínas relacionadas a apoptose. Para tanto, foram coletadas informações clínicas de 58 pacientes acometidos por CELs. Em seguida, foi realizada análise histopatológica e imunoistoquímica dos marcadores supracitados, em amostras de material biológico parafinado da lesão. Os resultados mostraram que os tumores com metástase nodal e de alto grau histopatológico de malignidade apresentavam percentuais significativamente menores de REG (p<0,05). Em adição, a análise da expressão de p53, MDM-2 e Bax nos diferentes parâmetros clínico-patológicos avaliados nesse trabalho, não revelou diferenças significativas nos percentuais de imunopositividade desses marcadores. Com relação ao Bcl-2, foi visto que tumores de alto grau de malignidade e com óbitos relacionados a doença apresentavam percentual significativamente menor de positividade dessa proteína (p<0,05). Por fim, o teste de correlação de Spearman demonstrou existir fraca correlação positiva, estatisticamente significativa, entre os percentuais de REG e das proteínas MDM-2 e Bcl-2. Baseado nesses achados, pode-se concluir que a redução da expressão de REG parece contribuir para a progressão do CEL oral e pode influenciar na expressão das proteínas relacionadas a regulação da apoptose (AU).

Cancer of the oral cavity is one of the most common malignancies in the world. Since the development of malignant neoplasms is related to damage that causes an imbalance in the regulation of cell division and cell death, many studies have been conducted in recent years to verify the influence of this damage on overall cell behavior and on the progression of the disease. Within this context, recent studies suggest that changes in the expression of REG play an important role in the progression of different malignant tumors by interfering with the regulation of apoptosis. Therefore, the objective of the present study was to investigate the immunohistochemical expression of REG, p53, MDM-2, Bcl-2 and Bax in oral tongue squamous cell carcinoma (OTSCC), correlating the immunoexpression of these proteins with clinicalpathological parameters of tumor aggressiveness, in order to determine whether REG contributes to tumor progression and interferes with the expression of apoptosisrelated proteins. For this purpose, the clinical data of 58 patients with OTSCC were collected and paraffin-embedded tumor specimens were submitted to histopathological analysis and immunohistochemistry using the markers cited above. The results showed significantly higher expression of REG (p<0.05) in low-grade tumors and without lymph node metastases. In addition, comparison of the expression patterns of p53, MDM-2 and Bax according to the clinical-pathological parameters studied revealed no significant differences in the percentage of immunostaining for these markers. Regarding Bcl-2, a significantly lower percentage of immunostaining for this protein was observed in tumors with a high grade of malignancy and tumors associated with deaths related to the disease (p<0.05). Finally, Spearman's correlation test demonstrated a significant weak positive correlation between the percentages of REG and of MDM-2 and Bcl-2. These findings suggest that the reduced expression of REG contributes to the progression of OTSCC and may influence the expression of proteins related to the regulation of apoptosis (AU).

Estudo clínico-patológico do carcinoma epidermóide de língua e imunohistoquímico das proteínas bmp-2, bmpr-ia, bmpr-ii e endoglina / Physician-pathological study of the carcinoma epidermóide of language and imunohistoquímico of proteins bmp-2, bmpr-went, bmpr-ii and endoglina

As BMPs (proteinas morfogenéticas ósseas) são citocinas relacionadas com a proliferação e angiogênese em diversos tipos de câncer humano. Com este trabalho foi analisada a expressão imunohistoquímica das proteínas NMP-2, BMPR-IA, BMPR-II e endoglina (CD105), correlacionando-a com o comportamento biológico e a angiogênese local nos carcinomas epidermóides de língua (CEL). A amostra foi composta de 25 casos de CEL sem metástase (CELSM), 25 CEL com metástase (CELCM) graduados segundo Bryne (1198) e adaptado por Miranda (2002), além de 25 casos de hiperplasia fibrosa inflamatória (HFI), utilizado como grupo controle. Foi utilizado escore 0 para marcação ausente-fraca e 1 para forte; tipo de distribuição focal ou difuso. Adicionalmente, para o CD105 foi realizada a contagem microvascular (MVC). A maior parte dos pacientes com CEL foi do sexo masculino, no grupo CELSM a faixa etária foi maior que 65 anos e o CELCM se encontrou entre 45-65 anos; houve predomínio do estágio II do TNM, assim como de...

Expressão imuno-histoquímica de metaloproteinases em carcinoma epidermóide de lábio inferior e língua / Imuno-histochemical expression of metaloproteinases in epidermóide carcinoma of inferior lip and language

O carcinoma epidermóide oral é uma neoplasia maligna de alta incidência e uma importante causa de morbidade e mortalidade, que exibe, entretanto, variável comportamento biológico, em função de diversos fatores. O objetivo do presente estudo consistiu em avaliar a expressão imuno-histoquímica de MMP-1, MMP-2, MMP-7, MMP-9 e MMP-26 em carcinomas epidermóides, em relação à localização da lesão e ao seu grau histológico de malignidade. Foram selecionados 15 carcinomas epidermóides de lábio inferior e 15 de língua, que, após avaliação morfológica, foram classificados em neoplasias de baixo grau de malignidade (n=17) e alto grau (n=13), e subseqüentemente submetidos à marcação imuno-histoquímica para as MMPs. Todos os espécimes investigados expressaram pelo menos duas das metaloproteinases pesquisadas, que foram mais evidentes no citoplasma das células tumorais localizadas no front de invasão. Os carcinomas epidermóides de língua exibiram maior marcação imuno-histoquímica de MMPs pelas células neoplásicas que aqueles de lábio inferior, com diferença significativa estatisticamente para a MMP-9 (p=0,030). Os carcinomas epidermóides de alto grau demonstraram maior expressão de metaloproteinases, exceto para MMP-2, em comparação às lesões de baixo grau, com diferença significativa estatisticamente para MMP-7 (p=0,0001) e MMP-26 (p=0,016). Adicionalmente foi evidenciada uma relação direta entre os escores morfológicos de malignidade e a imunopositividade às MMPs, com significância estatística para MMP-7 e MMP-26. Com base nestes resultados, pode-se concluir que a maior expressão de MMPs pelas células tumorais, especialmente MMP-9, pode contribuir para o maior potencial invasivo dos carcinomas de língua em comparação aos labiais. Além disso, a gravidade histológica dos carcinomas epidermóides parece estar relacionada à marcação imuno- histoquímica de metaloproteinases, especialmente matrilisinas, o que sugere que a capacidade de degradar membrana basal parece ser determinante no padrão de diferenciação histológica das neoplasias pesquisadas. Os altos índices de positividade às MMPs encontrados nos espécimes estudados refletem a marcante participação destas enzimas no desenvolvimento dos carcinomas epidermóides de lábio inferior e língua (AU).

The oral epidermoid carcinoma is a malignant neoplasty with high incidence and an important cause of morbidity and mortality that presents, however, a variable biological behavior, due to several factors. The aim of this study has consisted in evaluating the immunohistochemical expression of MMP-1, MMP-2, MMP-7, MMP-9 and MMP-26 in epidermoid carcinomas, regarding the location of the lesion and its histological grade of malignancy. 15 squamous cell carcinomas of lower lip and 15 of tongue were selected and, after morphological evaluation, they were classified in low malignancy grade (n=17) and high malignancy grade neoplasties (n=13), and subsequently submitted to immunohistochemical study for the MMPs. All the specimens investigated expressed at least two of the researched metalloproteinases, hat were more evident in the cytoplasm of tumor cells located in the invasion front. The tongue epidermoid carcinomas presented greater immunohistochemical expression of MMPs by neoplastic cells than those of lower lip, with statistically significant difference for MMP-9 (p=0.030). The high grade epidermoid carcinomas presented greater expression of metalloproteinases, except for MMP-2, in comparison to the low grade lesions, with statistically significant difference for MMP-7 (p=0,0001) and MMP- 26 (p=0,016). In addition it was evidenced a direct relation between the morphological scores of malignancy and immunoreactivity to MMPs, with statistic significance for MMP-7 and MMP-26. Based on these results we can conclude that a greater expression of MMPs by tumor cells, especially MMP-9, may contribute to a higher invasive potential of tongue carcinomas in comparison to lip carcinomas. Besides, the histological severity of epidermoid carcinomas seems to be related to immunohistochemical expression of metalloproteinases, especially matrilysins, which suggests that the capacity of degrading basal membrane seems to be determinant in the pattern of histological differentiation of neoplasties studied. The high levels of reactivity to MMPs found in the specimens studied reflect the outstanding participation of these enzymes in the development of epidermoid carcinomas in lower lip and tongue (AU).

Implicações prognosticas da morfometria das regiões organizadas nucleolares argirófilas no carcinoma epidemóide de língua oral e soalho bucal

As regiões organizadoras nucleolares argirófilas (AgNORs) representam um marcador de proliferação celular relacionado às proteínas presentes no nucléolo, responsáveis pela transcrição nuclear, que são detectadas em nível óptico pela impregnação com prata. O objetivo do presente estudo dói avaliar as implicações prognosticas da morfometria dessas regiões, através de método de análise de imagem, em doentes portadores de carcinoma epidermóide de língua oral e soalho bucal. A morfometria das regiões organizadoras nucleolares foi estudada em lâminas de espécimes cirúrgicos fixaos e incluídos em paafina de 43 doentes portadores de carcinoma epidermóide de língua oral e soalho bucal, estádio clínico II, tratados por ressecção cirúrgica do tumor primário e esvaziamento cervical eletivo. Outros atores histopatológicos, relacionados ao prognóstico desses doentes, foram analisados e tiveram seus resultados comparados aos do método em estudo. A recorrência do carcinoma, o tempo livre de doença e o tempo de sobrevida constituíram variáveis dependentes da morfometria das AgNORs. Valores altos da morfometria das AgNORs, com áreas acima de 7,79um2/núcleo, foram associados a um maior risco de recorrência do carcinoma, menor tempo livre de doença e tempo de sobrevida, mais curto. A morfometria das AgNORs, quando comparada ao grau de diferenciação histológica, à metástase linfodonal microscópica, ao comprometimento de margens cirúrgicas, à espessura do tumor primário e à invasão vascular por células neoplásicas, mostrou uma melhor correlação em predizer a recorrência do carcinoma, e o tempo livre da doença, revelando ser, um método útil, em selecionar os doentes que evoluíram com um pior prognóstico.

Argyrophilic nucleolar organizer regions (AgNORs) represents a tissue marker of cell proliferative activity that detects nucleolar proteins associated with transcription activity analyzed at the optical level by means of argyrophilic staining technique. The purpose of this study was to assess the prognostic value of the AgNORs morphometry in oral tongue and floor of the mouth squamous cell carcinoma. The AgNORs morphometry was studied in paraffin sections by means of digital image analysis in tumor specimens of 43 cases of stage II oral tongue and floor of the mouth squamous cell carcinoma, treated by surgical resection of the primary tumor and elective neck dissection. The results were compared with the histopathological data. Tumor recurrence, disease-free interval and long term survival were considered a dependent variable of a binary indicator of AgNORs morphometry. High values of AgNORs area (>7,79 mm2/nucleus) were associated with high incidence of tumor recurrence, reduction on recurrence-free interval of disease and reduction on long term survival. When compared to degree of histologic differentiation, microscopic lymph node metastasis, involvement of the surgical margins, lesion thickness and vascular invasion by cancer cells, showed a better correlation to predict cancer recurrence and disease-free interval. The AgNORs morphometry was able to increase the capabiblity of selecting those patients with poor prognosis.