Eficiência de óleos essenciais na qualidade sanitária e fisiológica em sementes de feijão-fava (Phaseolus lunatus L. ) / Efficiency of essential oils in the sanitary and physiological quality of lima bean seeds (Phaseolus lunatus L. )

RESUMO A espécie Phaseolus lunatus L., conhecida popularmente como feijão-fava constitui uma das alternativas de renda e alimentação para a população da região Nordeste do Brasil. Um dos problemas enfrentados são as doenças que provocam grandes perdas na produção de sementes. O presente trabalho objetivou avaliar a eficiência dos óleos essenciais de copaíba, cravo-da-índia e manjericão na redução da incidência de fungos associados às sementes de feijão-fava, e sua interferência na qualidade fisiológica. Os tratamentos foram constituídos por óleos essenciais de copaíba, cravo-da-índia e manjericão nas concentrações de 0; 1; 1,5 e 2 mL. L-1 e fungicida (Captan®). Foram utilizadas 200 sementes por tratamento. Para análise da qualidade sanitária das sementes foi adotado o método de incubação em placas de Petri contendo dupla camada de papel-filtro umedecida com ADE, sob temperatura de 20 ±2 ºC, por 7 dias. A qualidade fisiológica das sementes foi determinada com base nos testes de germinação, emergência e vigor das sementes. Para o teste germinação foi empregado método de rolo de papel germitest e na emergência osemeio foi realizado em bandejas plásticas contendo areia lavada esterilizada, em condição de casa de vegetação, e após 9 dias da instalação foi determinado o vigor com base nos resultados de índice de velocidade de germinação e emergência; comprimento da parte aérea, raiz primária e plântula; e teor de massa seca da partes aérea, raízes e plântulas de feijão-fava. O delineamento experimental foi interiamente casualizados, em esquama de fatorial simples (3x4)+1 (óleos essenciais x concentrações + fungicida), com quatro repetições de 50 sementes. Os óleos essenciais de copaíba e manjericão reduziram consideravelmente o percentual de incidência dos fungos associados as sementes de feijão-fava. O óleo essencial de cravo-da-índia na concetração de 2 mL. L-1, reduziu a qualidade fisiológica das sementes de feijão-fava.

ABSTRACT The Phaseolus lunatus L. species, popularly known as lima bean, is one of the alternative sources of income and food for the population of Northeast Brazil. One of the problems is the diseases that cause great losses in seed production. This study evaluated the effectiveness of essential oils of copaiba, clove, and basil in reducing the incidence of fungi associated with lima bean seeds, as well as the effect on their physiological quality. The treatments consisted of essential oils of copaiba, clove, and basil at concentrations of 0; 1; 1.5; and 2 mL. L-1 and fungicide (Captan®). A total of 200 seeds were used per treatment. To analyze the sanitary quality of the seeds, the method used was incubation in petri dishes containing a double layer of filter paper moistened with distilled sterilized water at a temperature of 20 ± 2°C, for seven days. The physiological quality of the seeds was determined by testing their germination, emergence, and vigor. For the germination test, the method used was a roll of Germitest paper. For the emergence, the seeds were sown in plastic trays containing washed sterilized sand in greenhouse conditions. After nine days, the vigor was determined based on the results of germination and emergence speed rates; length of the aerial part, primary root, and seedling; and dry matter content of the aerial part, roots, and seedlings of the lima beans. The experimental design was completely randomized in a simple factorial arrangement (3x4)+1 (essential oils x concentrations + fungicide) with four replications of 50 seeds. The essential oils of copaiba and basil considerably reduced the percentage of incidence of the fungi associated with lima bean seeds. The essential clove oil at 2 mL. L-1 reduced the physiological quality of the lima bean seeds.

Qualidade sanitária e germinação de sementes de copaíba / Sanitary quality and germination of copaiba seeds

Copaifera langsdorffii Desf. pode ser empregada na arborização urbana e na recuperação de áreas degradadas, mas carece de informações sobre análise da qualidade de sementes para a formação de mudas. O objetivo foi determinar a população fúngica associada às sementes, testar métodos para a eliminação desses microrganismos e avaliar a influência desses procedimentos sobre a germinação. Foi realizado o teste de sanidade (método do papel de filtro e do meio BDA), tratamento de sementes (NaClO 2% por 0, 5, 10, 15 e 20 minutos) e o teste de germinação (BOD a 25oC com luz contínua). Os métodos de incubação em papel de filtro e em meio BDA podem ser usados para detecção de fungos em sementes de copaíba, mas o meio BDA é mais eficaz;; o uso de hipoclorito de sódio na concentração de 2% por períodos de 10, 15 ou 20 minutos é capaz de eliminar fungos presentes em sementes de copaíba, entretanto, o período de 15 minutos pode apresentar melhores resultados.

Copaifera langsdorffii Desf. can be used to urban arborization and recomposition of degraded area, but need information about its seed quality to seedlings formation. The aim were determine fungi population associated with seeds, try methods to eliminate it and evaluate the influence of these procedures in seeds germination. Were realized the sanitary test (blotter test and BDA medium),seed treatment (NaClO 2% during 0, 5, 10, 15 and 20 minutes) and germination test (BOD at 25oC with constant light). Blotter test and BDA medium can be used to detect fungi in C. langsdorffi seeds, but BDA is most efficient; NaClO 2% during 10, 15 and 20 minutes is able to eliminate fungi at seeds, but 15 minutes can present best results.

Medicinal plant extracts on the control of Diabrotica speciosa (Coleoptera: Chrysomelidae) / Extratos de plantas medicinais no controle de Diabrotica speciosa (Coleoptera: Chrysomelidae)

The aim of this study was to evaluate the insecticidal effect of aqueous, alcoholic, and oil extracts from leaves of eight medicinal plants against Diabrotica speciosa prepared at five concentrations. The extracts that used commercial soybean oil as solvent showed the highest D. speciosa mortality due to the solvent itself, regardless of the used plants and their concentrations. Thus, commercial soybean oil was discarded as solvent since at these volumes it would cause serious phytotoxicity problems. After 24 hours of exposure of the pest to the extracts, the highest D. speciosa mortality values were observed for Copaifera langsdorfii and Chenopodium ambrosioides extracts, both in 5% alcohol, and Artemisia verlotorum, in 10% water. However, in the last mortality assessment (48 h), C. langsdorfii extract in 5% alcohol showed higher mortality of this pest, followed by C. ambrosioides extract in 5% alcohol, compared to the remaining plants.

O objetivo deste trabalho foi avaliar o efeito inseticida de extratos aquosos, alcoólicos e oleosos de folhas de oito plantas medicinais contra Diabrotica speciosa preparadas em cinco concentrações. Os extratos que utilizaram óleo de soja comercial como solvente apresentaram as maiores mortalidades de D. speciosa em função do próprio óleo, independentemente das plantas utilizadas em suas concentrações. Sendo assim, o óleo de soja comercial foi descartado como solvente, pois nestes volumes acarretaria sérios problemas de fitotoxidade. Após 24 horas de exposição da praga aos extratos, os maiores valores de mortalidade de D. speciosa foram observados nos extratos de Copaifera Langsdorfii e de Chenopodium ambrosioides, ambos em álcool 5%, e de Artemisia verlotorum, em água 10%. Entretanto, na última avaliação de mortalidade (48 h), o extrato de C. langsdorfii em álcool a 5% apresentou maior mortalidade dessa praga, seguida pelo extrato alcoólico a 5% de C. ambrosioides comparada às demais plantas.

Antimicrobial activity of copaíba (Copaifera langsdorffii) oleoresin on bacteria of clinical significance in cutaneous wounds / Atividade antimicrobiana do óleo-resina de copaíba (Copaifera langsdorffii) em bactérias de significância clínica em úlceras cutâneas

The present study was designed to evaluate the in vitro antimicrobial activity of Copaifera langsdorffii oleoresin, which has been used in folk medicine as an anti-inflammatory, antibacterial, healing among others. The oleoresin was tested against Gram-positive (Staphylococcus aureus, Streptococcus pyogenes, Enterococcus faecalis) and Gram-negative (Pseudomonas aeruginosa and Escherichia coli) bacteria related to infections in cutaneous wounds. Antimicrobial activity was determined by the minimum inhibitory concentration (MIC) and minimum bactericidal concentration (MBC) assays. Copaiba oleoresin showed antimicrobial activity only against the Gram-positive bacteria with MIC of 200 µg/mL, 400 µg/mL and 1100 µg/mL for S. aureus, S. pyogenes and E. faecalis, respectively. MBC values were the same as MIC for S. aureus and S. pyogenes and for E. faecalis it was 1200 µg/mL. Considering that infection significantly impairs the wound healing process, we believe that the use of copaiba oleoresin as a component of a topical formulation could be a valuable adjunct in the treatment of infected wounds, mainly in the case of wounds infected by Gram-positive microorganisms.

Este trabalho avaliou a atividade antimicrobiana in vitro do óleo-resina da Copaifera langsdorffii, o qual vem sendo utilizado há muitos anos na medicina tradicional popular, principalmente devido às suas propriedades antiinflamatórias, antibacterianas, cicatrizante entre outras. O óleo-resina foi testado em bactérias Gram-positivas (Staphylococcus aureus, Streptococcus pyogenes, Enterococcus faecalis) e Gram-negativas (Pseudomonas aeruginosa e Escherichia coli) relacionadas com infecções de úlceras cutâneas. A atividade antimicrobiana foi determinada pelos testes da Concentração Inibitória Mínima (CIM) e Concentração Bactericida Mínima (CBM). O óleo-resina apresentou atividade antimicrobiana in vitro apenas para as bactérias Gram-positivas, com valores de CIM de 200 µg/mL, 400 µg/mL e 1100 µg/mL para S. aureus, S. pyogenes e E. faecalis, respectivamente. Os valores de CBM foram os mesmos que os valores de MIC para S. aureus e S. pyogenes. O valor de CBM para o microrganismo E. faecalis foi de 1200 µg/mL. Considerando que a presença de infecção significativamente impede o processo normal de cicatrização de úlceras cutâneas, acreditamos que o óleo-resina de copaíba, utilizado como componente de formulações tópicas, poderia ser um adjunto importante no tratamento de úlceras cutâneas infectadas, principalmente nos casos de infecção por microrganismos Gram-positivos.

Parâmetros fisiológicos de mudas de copaíba sob diferentes substratos e condições de sombreamento / Physiological parameters in seedlings of copaiba under different shade conditions and substrates

O presente trabalho teve como objetivo avaliar parâmetros fisiológicos de mudas de copaíba produzidas sob o efeito de diferentes níveis de sombreamento e tipos de substratos. O experimento teve a duração de 130 dias e foi conduzido em blocos casualizados no esquema fatorial 5x4, com cinco substratos: Bioplant®; 70% vermiculita + 30% casca de arroz carbonizada; 40% vermiculita + 30% casca de arroz carbonizada + 30% fibra de coco; 50% vermiculita + 30% casca de arroz carbonizada + 20% areia; 70% vermiculita + 15% casca de arroz carbonizada + 15% vermicomposto de resíduo de indústria têxtil; quatro níveis de sombreamento (100, 70, 50 e 30% do pleno sol) e três repetições. O nível de sombreamento de 50% em relação ao pleno sol possibilitou a produção de mudas de copaíba com maiores teores de clorofila b e clorofila total, além de proporcionar os menores valores de transpiração diária e ao longo do dia das plantas. A área foliar, os teores de clorofila e a transpiração das mudas de copaíba independem do tipo de substrato, podendo ser produzidas em qualquer um dos meios de crescimento avaliados.

This research aimed to evaluate physiological parameters of seedlings of copaiba produced under the effect of different shading levels and types of substrates. The experiment lasted 130 days and was conducted in randomized blocks in factorial scheme 5x4 with five substrates: Bioplant®, 70% vermiculite + 30% rice hulls, 40% vermiculite + 30% rice charred hulls + 30% fiber coconut, 50% vermiculite + 30% rice charred hulls + 20% sand, 70% vermiculite + 15% rice charred hulls + 15% vermicompost residue of textile industry; four shading levels (100, 70, 50 and 30% full sun) and three replications. The shade level of 50% compared to full sun, enabled the production of seedlings of Copaiba with higher concentrations of chlorophyll b and total chlorophyll, and provided the lowest daily transpiration throughout the day and the plants. The leaf area, chlorophyll content and transpiration of seedlings of Copaiba independent of the substrate and can be produced in any of the growth media evaluated.

An efficient and rapid DNA minipreparation procedure suitable for PCR/SSR and RAPD analyses in tropical forest tree species

An efficient and rapid DNA minipreparation modified method for frozen samples was developed for five tropical tree species: Copaifera langsdorffii, Hymenaea courbaril, Eugenia uniflora, Tabebuia roseo alba and Cariniana estrellensis. This procedure that dispenses the use of liquid nitrogen, phenol and the addition of proteinase K, is an adaptation of the CTAB-based DNA extraction method. The modifications included the use of PVP to eliminate the polyphenols, only one chloroform-isoamyl alcohol step and the addition of RNase immediately after extraction with chloroform. The yields of the DNA samples ranged from 25.7 to 42.1 µg from 100 mg leaf tissue. The DNA samples extracted by this method were successfully used for PCR (SSR and RAPD) analyses in these five and other twelve tropical tree species.

Este trabalho teve como objetivo otimizar um protocolo econômico, rápido e eficaz de minipreparação de DNA genômico, para as espécies florestais Copaifera langsdorffii (Óleo de Copaíba), Hymenaea courbaril (Jatobá), Eugenia uniflora (Pitanga), Tabebuia roseo alba (Ipê Branco) e Cariniana estrellensis (Jequitibá Branco). Este método é uma adaptação da técnica de extração CTAB de Doyle e Doyle (1990), o qual consiste principalmente na adição de PVP para eliminar polifenoles, somente uma etapa de extração com clorofórmio-álcool isoamílico e a adição da RNase A imediatamente após a extração com clorofórmio. O método também dispensa o uso de nitrogênio líquido, o uso do fenol e a adição de proteinase K. Os DNAs das espécies florestais extraídos apresentaram alto rendimento e boa qualidade, com rendimento de 25.7 a 42.1 µg de DNA a partir de 100 mg de tecido foliar congelado. Com este protocolo, em apenas 1 dia de trabalho, uma pessoa pode completar o isolamento do DNA de aproximadamente 50 amostras de folhas (dependendo da capacidade da centrífuga). O DNA obtido pode ser usado para métodos de análise baseados em PCR (SSR e RAPD).

Influência do óleo de Copaifera langsdorffii no reparo de ferida cirúrgica em presença de corpo estranho / Influence of Copaifera langsdorffii oil on the repair of a surgical wound in the presence of foreign body

A Copaifera langsdorffii é uma leguminosa nativa do Brasil, da qual pode ser extraído um óleo, popularmente conhecido como óleo de copaíba. Este óleo é amplamente utilizado para tratamento de feridas cutâneas por ser reconhecido como antiinflamatório e cicatrizante. Apesar disso, poucas comprovações científicas do verdadeiro efeito terapêutico desta planta medicinal foram produzidas. O objetivo desse trabalho foi avaliar o efeito do tratamento tópico com C. langsdorffii no processo de reparo quando um corpo estranho é o indutor da inflamação. Para isso, 60 camundongos da linhagem BALB/c foram submetidos à incisão cirúrgica linear de 1cm no dorso para realizar o implante de uma lamínula de vidro com 12mm de diâmetro no tecido subcutâneo. Quatro tratamentos para a ferida foram estabelecidos: controle (C) tratado com solução salina estéril, controle veículo (CV) tratado com óleo mineral estéril, tratamento 1 (T1) tratado com diluição (v:v) de óleo mineral estéril e óleo de C. langsdorffii, tratamento 2 (T2) tratado com óleo de C. langsdorffii puro. As avaliações foram realizadas em períodos de tempo pré-determinados (1, 3, 5, 7 e 14 dias). Era possível perceber características da fase proliferativa como a reepitelização, a presença de fibroblastos e a neovascularização, porém os grupos tratados com o óleo (T1 e T2) não apresentavam reepitelização aos três dias. Esses grupos aos 5 e 7 dias apresentavam no exame macroscópico maior intensidade de edema, hiperemia e permanência de crostas. Na microscopia, a reepitelização ainda não estava completa e a crosta era serocelular. Nos grupos C e CV, apesar de discreta, era predominante a presença de mononucleares, enquanto nos grupos T1 e T2 o infiltrado inflamatório era misto e com maior intensidade que nos outros grupos. Quatorze dias depois da incisão cirúrgica, os aspectos macroscópicos dos grupos C e CV eram semelhantes e os grupos T1 e T2, apesar de a ferida estar completamente fechada e sem...

Copaifera langsdorffii is a Brazilian native leguminosae that produce resin-oil, popularly known as copaíba oil. This oil is used for the treatment of skin wound due to its recognized antiinflammatory and wound healing effects. Despite, its popular use, there are few published data about the therapeutic effect of this medicinal plant. The aim of the study was to evaluate the topic treatment effect of the Copaíba oil on the process of skin repair inflammation induced by a foreign body subcutanously implanted. Sixty BALB/c mice were submitted to a 1cm linear incision and a 12mm circle coverslip was subcutaneously implanted. Four treatments groups were established: control, sterile saline (C); vehicle control, sterile mineral oil, (VC); treatment 1 (T1), mineral oil plus copaiba oil (V/V), and treatment 2 (T2) copaiba oil. The evaluations were performed at pre-determined time points (1, 3, 5, 7 and 14 days). It was possible to find fibroblasts, epithelial cells proliferation, re-epithelization and newly formed blood vessels in all groups, however, all oil treated groups (T1 and T2) did not present re-epithelization at three days post surgical incision. On days 5 and 7, a higher intensity of edema and hyperemia on the groups T1 and T2 was observed, besides that, the T1 and T2 groups presented a serous cellular scab on the wounds that was absent on the C and VC groups. The inflammatory reactions among the groups C and VC showed more mononuclear cells than the T1 and T2 groups that presented a mixed cell patter composed from both mono and polymorphonuclear cells. Although the surgical wounds were re-epithelizaded, in the groups T1 and T2, they were covered by a serous cellular crust and the dermis tissue still presented an intense mononuclear cell inflammatory focus. Fourteen days after of the surgical incision, the gross aspects on groups C and VC were similar and on groups T1 and T2, despite wound to be completely closed and without...